Исследование Р2-рецепторов и активности экто-нуклеотидаз гемопоэтических клеток человека

• Автор: Казакова, Рената Рувшановна
• Шифр специальности: 03.03.04, 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 107 с. : ил.

Оглавление

Список использованных сокращений

1. Введение.

2. Обзор литературы

2.1. Общие сведения об АТФ.

2.2. Классификация пуринорсцспторов

2.4. Р2рецеиторы .

2.3. Аденозиновые рецепторы

2.4.1. Р2Хрецепторы.

2.4.2. Р2Урецепторы.

2.4.3. Р2рецепторы на клетках крови.

2.5. Эктонуклеотидазы.
2.5.1. Эктонуклеотидазы в клетках крови.
2.6. Гемопоэтические стволовые клетки
2.6.1. Общие сведения о кроветворении
2.6.2. С4 позитивные клетки.
2.6.3. ск1Г позитивные клетки.
3. Материалы и методы
3.1. Аспекты биомедицинской этики
3.2. Определение экспрессии Р2рецепторов
3.2.1.Иммуномагнитная сепарация СЭ клеток.
3.2.2. Иммунофлуореснентный анализ.
3.2.3. Проточная цитофлуориметрия
3.3. Определение активности эктоАТФаз.
3.4. Статистическая обработка результатов
4. Результаты собственных исследований.
4.1. Определение наличия Р2рецепторов.
4.1.1. Определение наличия Р2Х и Р2Урецепторов на клетках пуповин
ной крови человека
4.1.2. Определение наличия Р2Х и Р2Урецепторов на клетках периферической крови человека
4.1.3. Наличие Р2Хрсцепторов на СскП и СЭскйклетках пуповинной крови человека
4.1.4. Наличие Р2Урецепгоров на скп7С4клетках пуповинной крови человека
4.1.5. Сравнение наличия Р2Хрецепторов на разных типах клеток
4.1.6. Сравнение наличия Р2Урецепторов на разных типах клеток
4.2. Определение активности эктоАТФаз в клетках крови человека
5. Обсуждение полученных результатов.
Выводы.
Практические рекомендации
Список литературы


Р2Хрецепторы. Р2Урецепторы. Р2рецепторы на клетках крови. Эктонуклеотидазы. Эктонуклеотидазы в клетках крови. С4 позитивные клетки. Г позитивные клетки. Иммуномагнитная сепарация СЭ клеток. Иммунофлуореснентный анализ. Определение активности эктоАТФаз. Результаты собственных исследований. Определение наличия Р2рецепторов. Обсуждение полученных результатов. Выводы. 2йодо Ме8АТФ 2 метилтиоаденозин 5чрифосфорная кислота. Аюуальность темы. Проблема гуморальной регуляции функционирования различных клеток и тканей остается одной из самых значимых и недостаточно исследованных в биологии медицины. Актуальность исследования возможностей гуморального контроля различных свойств клеток обусловлена в первую очередь запросами клиники, где врачам приходится сталкиваться с последствиями разнообразных нарушений такой регуляции i . ., Т. i . Зачастую эти нарушения связаны не только и не столько с наличием или отстутствием самого регуляторного фактора, как с возможной потерей чувствительности клеток к нему i . . . Вот почему изучение рецепторного аппарата клетки в решении этой проблемы имеет первостепенное значение. В рамках этой проблемы несомненный интерес представляет наличие Р2рецепторов рецепторов к АТФ на разных клетках, в том числе на активно изучаемых сейчас стволовых клетках. В последнее время пристальный интерес исследователей связан с возможностью применения стволовых гемопоэтических клеток для решения ряда клинических задач, например для лечения сахарного диабета Михайлов В. В., Сагалович Б. М., , Vvi V. Паркинсона . Альцгеймера . i . iv . i . i М. Несмотря на то, что функциональные свойства любой клетки наряду с работой гена определяются во многом и ее рецепторным аппаратом, изменения качественного состава рецепторов в процессе онтогенеза для большинства клеточных типов практически не исследованы i . . . . . . . В рамках этой проблемы несомненный интерес представляет рецепторый аппарат разнообразных стволовых клеток, способных к дифференцировке в различные клеточные типы i М. Одними из таких рецепторов могут быть Р2рецепторы, основным естественным лигандом которых является АТФ. В литературе имеются убедительные свидетельства наличия Р2рецепторов во всех органах и тканях человека . Р2рецепторов также установлено в отдельных форменных элементах крови и их предшественниках К. Вместе с тем, как изменяются функциональные свойства клеток с появлением или исчезновением этих рецепторов совершенно не ясно. Не известно, когда они начинают экспрессироваться и характерны ли они для всех форменных элементов крови и их предшественников К. Кроме того, отсутствуют исследования, посвященные взаимосвязи наличия подтипов Р2рецепторов в стволовых клетках с активностью эктонуклеотидаз внеклеточных ферментов, участвующих в распаде нуклеотидов Зиганшин А. У., Зиганшина I. ., . В настоящее время бурно развивающейся областью медицины и биологии являются попытки использования различных стволовых клеток для лечения и профилактики разнообразных заболеваний i М. . ., . . i . . . Причем, выявление разнообразных стволовых клеток является отдельной трудоемкой задачей и в настоящее время в основе их идентификации лежит, в первую очередь, наличие или отсутствие поверхностных маркеров. В крови имеются клетки предшественницы гемопоэза маркерами которых является мембранный фосфогликопротеин и i, представляющий собой трансмембранный рецептор белка тирозинкиназы, также известным, как рецептор фактора роста стволовых клеток. Вместе с тем, совершенно не исследование распределение различных подтипов Р2рсцепторов у и i позитивных клеток, хотя имеются основания считать, что Р2рецепторы могут присутствовать на этих ранних стадия развития гемопоэтических клеток, и быть вовлечены в процессы дифференцировки и созревания клеток.