Влияние трансгенного фактора роста нервов (НГФ) млекопитающих на рост и морфологию клеточных систем

• Автор: Муркин, Евгений Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.26
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 98 с. : ил.

Оглавление
ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Трансгенные животные как экспериментальная модель

Нейрогенные гены.

Белковые продукты генов и

Нейротрофические факторы.

Классификация нейротрофических факторов

Фактор роста нервов

Характеристика фактора роста нервов
Сигнальные каскады, вызываемые .
Характеристика сигнальных каскадов, вызываемых .
киназный путь.
Генная экспрессия немедленно ранние гены
Экспрессия задержанноранних генов.
Фосфолипазный путь.
независимые сигнальные пути
Нейротрофиновый рецептор р.
Использование нейротрофических факторов для лечения некоторых нейродегенеративных болезней.
Белки теплового шока .
Регуляция экспрессии белков семейств
ГЛАВА 2.
Материалы и методы
Ферменты и реактивы.
Конструкции.
Рестрикция
Лигирование.
Приготовление компетентных клеток.
Трансформация бактерий . i плазмидами.
Выделение плазмидной ДНК из . i.
Электрофорез в агарозном геле.
Метод инъекций
Выведение гомозиготных линий мух
Контроль наличия вставки блотгибридизация по Саузерну
Выделение хромосомной ДНК.
Рестрикция хромосомной ДНК
Г ельэлектрофорез ДНК
Перенос ДНК на нейлоновую мембрану
Приготовление меченого зонда
Гибридизация
Контроль экспрессии Нозсрн блотгибридизация.
Выделение тотальной РНК.
Г ель электрофорез РНК
Перенос РНК на нейлоновую мембрану
Гибридизация
Гибридизация i i на целых эмбрионах.
Приготовление меченого зонда
Сбор и фиксация эмбрионов
Подготовка эмбрионов к гибридизации
Г ибридизация
Предадсорбция антител
Отмывка гибридизации и обработка антителами
Окрашивание
Вестерн блот гибридизацияиммуноблотинг.
Получение белковых лизатов.
Фракционирование белков в полиакриламидном геле
Перенос на нитроцелюлозную мембрану
Имуннодетекция.
Получение первичной культуры клеток ., трансгенных по гену п.
ГЛАВА 3
Результаты.
Исследование жизнеспособности клеток мух 0.те1а1аег, кокультнвированных со срезом мозга млекопитающих с помощью вРР подобного флуоресцентного белка ЛвКес.
Исследование влияния фактора роста нервов на клетки .ш, используемые при ксенотрансплантации.
ГЛАВА 4
Обсуждение результатов.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


ОГЛАВЛЕНИЕ. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ. ГЛАВА 1. Нейрогенные гены. Нейротрофические факторы. Сигнальные каскады, вызываемые . Характеристика сигнальных каскадов, вызываемых . киназный путь. Экспрессия задержанноранних генов. Фосфолипазный путь. Нейротрофиновый рецептор р. Использование нейротрофических факторов для лечения некоторых нейродегенеративных болезней. Белки теплового шока . ГЛАВА 2. Ферменты и реактивы. Конструкции. Лигирование. Приготовление компетентных клеток. Трансформация бактерий . i плазмидами. Выделение плазмидной ДНК из . Электрофорез в агарозном геле. Выделение хромосомной ДНК. Контроль экспрессии Нозсрн блотгибридизация. Выделение тотальной РНК. Гибридизация i i на целых эмбрионах. Вестерн блот гибридизацияиммуноблотинг. Получение белковых лизатов. Имуннодетекция. Получение первичной культуры клеток . Результаты. Исследование жизнеспособности клеток мух 0. РР подобного флуоресцентного белка ЛвКес. Исследование влияния фактора роста нервов на клетки . Обсуждение результатов. ВЫВОДЫ. СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ. БЛАГОДАРНОСТИ. 3 трансформирующий фактор роста, т. ЭДТА Этилендиамидтетрауксусная кислота.