Изучение механизмов присоединения НеТ-А элементов к концу хромосомы у Drosophila melanogaster

• Автор: Кан, Татьяна Геннадьевна
• Шифр специальности: 03.00.26
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 88 с. : ил.

1.1. Белки, кошролирующие функции теломер у млекопитающих и дрожжей

1.2. Альтернативные ну ги удлинения теломер млекопитающих и дрожжей

1.3. Необычная структура теломер некоторых насекомых

1.4. Гипотезы об эволюционной связи между теломерами i и теломерами, использующими теломеразу

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Генетические методы

2.1.1. Мутации и линии i , использованные в работе

2.1.2. Генетические скрещивания

2.2. Молекулярные методы

2.2.1. Трансформация бактериальных клеток плазмидами

2.2.2. Выделение и очистка ДНК

2.2.2.1. Выделение Д1ПС дрозофилы
2.2.2.2. Выделение ДНК плазмид методом щелочного лизиса
2.2.2.3. Выделение фрагментов ДНК из геля и очистка
ДНК от продуктов ферментативных реакций
2.2.3. Саузернблот анатиз
2.2.3.1. Рестрикция, электрофорез и мобилизация
ДК на мембрану
2.2.3.2. Гибридизация ДНК на мембране с радиоактивными зондами
2.2.4. Амплификация ДНК
2.4.5. Сиквенс ПЦРпродуктов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Получение молельной системы для изучения механизмов транспозиции НеТА элементов на конец хромосомы
3.1.1. Определение минимального размера 5 области перед промотором гена , необходимого для его работы на конце хромосомы
3.1.2. Присоединение НеТА элемента к концу хромосомы с терминальной терминальной делецией компенсирует делению промотора гена
3.2. Частота присоединений ПеТА элементов к концу хромосомы с терминальной делецией в гене
зависит от генотипа линии
3.3. Определение минимального размера ДК ИеТА элемента, необходимого для поддержания экспрессии ген в щетинках
3.4. Удлинение концов хромосом, несущих НеТА элементы
3.5. Механизмы удлинения конца хромосомы
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Транспозиции НеТА элементов на конец Ххромосомы с терминальной делецией
4.2. Удлинение конца хромосомы у i
может осуществляться разными
способами
СПИСОК ЛИ ТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ


ГЛАВА 1. ГЛАВА 2. ГЛАВА 3. Присоединение НеТА элемента к концу хромосомы с терминальной терминальной делецией компенсирует делению промотора гена
3. ГЛАВА 4. Однако у некоторых насекомых в клетках отсутствует теломераза, а удлинение теломер происходит либо посредством генной конверсии или рекомбинации, либо в результате транспозиции мобильных элементов i, . Так, у i теломеры состоят из множественных копий мобильных элементов НеТА и , при этом НеТА элементы составляют , i, i, . Эти мобильные элементы относятся к классу ретроэлементов без длинных концевых повторов типа I , i, i, , i , . Элементы НеТЛ и располагаются на теломерах всегда в одной ориентации головахвост vi . Существующие литературные данные предполагают, что удлинение теломер дрозофилы происходит в результате 1ранспозиции мобильных элементов i . На основе этой гипотезы был сделан вывод, что регуляция длины теломер определяется уровнем экспрессии НеТА и мобильных элементов , i, . Однако известные экспериментальные исследования
по определению частоты присоединений мобильных элементов к концу хромосомы, не позволяют сделать окончательных выводов как о механизме присоединения мобильных элементов к концу хромосомы, так и об их частоте. Одной из причин является отсутствие iснетических систем для анализа частоты присоединения мобильных элементов к концу хромосомы. Основной задачей данного исследования было создание удобных генетических моделей для изучения частоты и механизмов присоединения НеТЛ элемента к концу хромосомы. Полученные результаты позволили существенно изменить общепринятую концепцию механизмов контроля длины теЛомер у i .