Изучение антигенной структуры поверхностного белка А (OspA) спирохеты Borrelia burgdorferi как основа для разработки новых иммунохимических методов диагностики болезни Лайма

• Автор: Садыкбекова, Роза Куанышкалиевна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 206 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ стр.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ЧАСТЬ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. ИКСОДОВЫЕ КЛЕЩЕВЫЕ БОРРЕЛИОЗЫ БОЛЕЗНЬ ЛАЙМА КАК СОВОКУПНОСТЬ ТРАНСМИССИВНЫХ ПРИРОДНООЧАГОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ СПИРОХЕТАМИ РОДА I
1.1. Основные этапы становления научных знаний о природе иксодовых клещевых боррелиозов болезнь Лайма

1.2. Молекулярнобиологические аспекты болезни Лайма

1.2.1. Молекулярная структура, иммунологические и биологические свойства поверхностного белка А спирохеты В. i

1.3. Эпидемиология болезни Лайма.

1.4. Клиника болезни Лайма

1.5. Особенности иммунного оУвета при болезни Лайма

Глава 2. ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНИ ЛАЙМА
2.1. Методы антигенной диагностики.
2.2. Методы серологической диагностики.
2.3. Чувствительность и специфичность методов
серодиагностики
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ЧАСТЬ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Материал
3.1.1. Возбудители.
3.1.2. Антигены для серологических реакций.
3.1.3. Клещи.
3.1.4. Клинический материал
3.1.5. Антитела
3.2. Методы исследований.
3.2.1. Выделение иммуноглобулинов
3.2.2. Получение коньюгатов
3.2.3. Постановка ТИФА.
3.2.4. Постановка ЛИФА.
3.2.5. Конкурентный анализ на основе ЛИФА
3.2.6. Метод электронной микроскопии.
3.2.7. Проведение статистических вычислений
Глава 4. ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕННОЙ СТРУКТУРЫ
ПОВЕРХНОСТНОГО БЕЛКА .I ВОЗБУДИТЕЛЯ БОЛЕЗНИ ЛАЙМА.
4.1. Эпитопное картирование белка А спирохеты
В.i с помощью панели моноклональных антител и конкурентного анализа на основе ЛИФА
4.2. Изучение реактивности МКА с российским штаммом
.ii I методом иммунной электроной
микроскопии
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Глава 5. РАЗРАБОТКА ТЕСТСИСТЕМ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ БОЛЕЗНИ ЛАЙМА В ЛАБОРАТОРНЫХ И ПОЛЕВЫХ МАТЕРИАЛАХ МЕТОДОМ ЛИФА
5.1. Оптимизация условий проведения анализа
5.2. Чувствительность и специфичность
индикационных тестсистем на основе ЛИФА
5.3. Сравнительный анализ результатов ЛИФА и ТПМ при детекции В.i в экспериментально зараженных клещах I.
5.4. Оценка возможности одновременного выявления возбудителей БЛ и КЭ в клещах I. в условиях модельной смешанной инфекции
5.5. Детекция возбудителя Б Л в полевых клещах, собранных в Московской области в эпидсезоны
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Глава 6. РАЗРАБОТКА И КЛИНИЧЕСКАЯ АПРОБАЦИЯ ТЕСТСИСТЕМ ДЛЯ СЕРОДИАГНОСТИКИ БОЛЕЗНИ ЛАЙМА НА ОСНОВЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ I и I АНТИТЕЛ В СЫВОРОТКАХ И СУХИХ ПЯТНАХ КРОВИ ПАЦИЕНТОВ .
6.1. Оптимизация условий детекции I и I антител к возбудителю болезни Лайма методами ЛИФА и ТИФА.
6.2. Выбор порогового уровня для оценки результатов серологических реакций при определении антител
методами ЛИФА и ТИФА.
6.3. Клиническая апробация иммуноферментных и
иммунофлуоресцентных тестсистем для
серологической диагностики болезни Лайма.
6.4. Чувствительность и специфичность
серодиагностических тестсистем в зависимости
от вида иммобилизованных антигенов.
6.5. Применение ЛИФА и ТИФА тестсистем для контроля лечения пациентов, больных Лаймборрелиозом
6.6. Чувствительность и специфичность ЛИФА и ТИФА тестсистем при выявлении антиборрелиозных антител
в сыворотках крови пациентов.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ОБСУЖДЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Коромыслову за помощь в решении технических вопросов при выполнении и оформлении работы, С. Ю.Ларичевой, Л. А.Деминой, А. И.Лямину за моральную поддержку, а также всем сотрудникам отдела ГНЦ ГосНИИ БП за теплое отношение. Отдельные разделы работы выполнены совместно со с. Ю.П. Кадошниковым, к. Е.А. Гущиной проф. Р.Л. Наумовым, с. И.С. Васильевой, В. С.Гальченко д. Л.П. Ананьевой, к. В.Г. Барсковой, Е. С.Федоровым с. М.В. Соколовой, М. В.Калюжной. Искренне благодарю за материальную и моральную поддержку мужа, родителей Джайкиева К. К., Карагужину З. Г., Садыкбекову А. Т., братьев, сестер, а гакже академика Западного отделения НАН Ш. М.Айталиева и ректора СГМА проф. Т.К. Раисова, Республика Казахстан, за предоставленную возможность обучения в аспирантуре. ЧАСТЬ I. Глава 1. ИКСОДОВЫЕ КЛЕЩЕВЫЕ БОРРЕЛИОЗЫ БОЛЕЗНЬ ЛАЙМА КАК СОВОКУПНОСТЬ ТРАНСМИССИВНЫХ ПРИРОДНООЧАГОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ СПИРОХЕТАМИ РОДА I. Основные этапы становления научных знаний о природе иксодовых клещевых боррелиозов болезнь Лайма. В г. Бушвальд опубликовал работу Диффузная идиопатическая атрофия кожи, в которой описал классическое поражение кожи хронический атрофический акродерматит ХААД, наблюдавшееся у летнего немца в течение лет 4. В г. А.М. Поспелов назвал это заболевание Самостоятельная атрофия кожи у взрослых. В г. Хронический атрофический акродерматит. В г. Афцелиус i продемонстрировал Шведскому Дерматологическому Обществу кольцевое поражение кожи в виде распространяющейся красной сыпи на месте укуса клеща Ix ivii старое название I. В г. Липшютц i наблюдал подобное кожное поражение у пациента в течение 7 месяцев и для обозначения этого дерматоза предложил термин хроническая мигрирующая эритема . С этого времени и до сегодняшнего дня эритема, возникающая на месте присасывания иксодового клеща, многими дерматологами называется по имени авторов эритема АфцелиусаЛипшютца. В г. Гарин i и Буадо ix, а затем и Баннварт в г. Позднее этот синдром получил название синдрома Баннварта. В г. Хеллсрстром наблюдал больного с клиническими признаками менингоэнцефалита, сочетающегося с мигрирующей эритемой МЭ. В х годах в литературе сформировалось устойчивое мнение относительно инфекционного характера заболевания . В г. Свартц v впервые применил антибиотик пенициллин для лечения ХААД. В г. Хеллерстром сообщил о лечении пенициллином неврологических проявлений заболевания, отличающегося от клещевого энцефалита, но развивающегося после присасывания иксодовых клещей. С.Н. Давиденкова, А. Н. Шаповал, Ю. К. Смирнова и К. Г. У майского, которые впервые в России высказали мнение, что МЭ это проявление инфекции, передаваемой клещами. Исследователи дифференцировали эриматозную форму от клещевого энцефалита и задолго до открытия В. В г. Стир описал вспышку ювенильных ревматоидных артритов у детей в небольшом городке Лайм штата Коннектикут США. Стир и его сотрудники описали ревматоидный артрит как комплексное полисистемное заболевание неизвестного происхождения, возникающее как у детей, так и у взрослых в результате укуса клещом. По названию места, где проводились исследования, заболевание получило название болезнь Лайма БЛ 2, 3. В г. Ix ii близко родственный I. Как в США, так и в Европе причина и возбудитель болезни были неизвестны, хотя роль клещей в ее передаче была установлена. В г. I.i старое название I. Так был открыт возбудитель болезни Лайма. В г. Джонсон 7 идентифицировал эти спирохеты как неизвестный ранее вид рода i, и в честь их первооткрывателя дал им название i i или i i . В г. В. i был разделен Барантоном на три основные геновида В. Барантоном была выявлена антигенная неоднородность изолятов боррелий, полученных в разных точках нозоареала этой инфекции. В г. В В. В настоящее время значительно расширены знания о спектре клинических проявлений БЛ, апробированы схемы этиотропной терапии. Разработана и проходит испытания генноинженерная вакцина для людей, иммуногеном которой является экспрессированный в . БЛ. В России целенаправленные исследования по изучению БЛ начали проводиться с г.