Цитологический и изоферментный анализ видов рода Agaricus Fr. emend. Karst.

• Автор: Матросова, Елена Викторовна
• Шифр специальности: 03.00.24
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 199 с. : ил.

Введение.

Глава 1. Обзор литерату ры.

1.1. Систематика и экология рода i и вида i i.

1.1Л. Систематика рода.

1.1.2. Экология рода.

1.1.3. Практическая значимость представителей рода.

1.2. Жизненный цикл агариковых грибов.

1.2.1. Общая характеристика.

1.2.2. Особенности жизненного цикла .i.

1.3. Характеристика ядерного аппарата видов рода i.

1.3.1. Вегетативный мицелий.

1.3.2. Плодовые тела гименнй и субгимсний.
1.3.3. Характеристика ядериых циклов вида Л.i.
1.4. Несовместимость у агариковых грибов.
1.4.1. Вегетативная несовместимость.
1.4.2. Половая несовместимость.
1.5. Методы и критерии отбора гомокарионов.
1.6. Использование изоферментов и метода электрофореза.
Глава 2. Материалы и методы.
2.1. Используемые в работе культуры.
2.2. Получение споровых отпечатков.
2.3. Питательные среды.
2.4. Поверхностное культивирование.
2.5. Глубинное культивирование.
2.6. Получение моиоспоровых и миогоспоровых культур.
2.7. Проведение гибридизации.
2.8. Получение плодовых тел i i.
2.9. Микроскопия.
2 Электронная микроскопия.
2 Электрофорез.
Глава 3. Изучение свойств изолированных из природы штаммов шампиньона двуспорового .i и четырехспорового штамма рода i.
3.1. Прорастание спор.
3.2. Скорость и характер роста мицелия
3.3. Определение ядерного статуса медленнорастущих культур.
3.4. Подтверждение ядерного статуса тестами на фертильность.
3.5. Гибридизация.
3.5.1. Гибридизация на чашках с КГА.
3.5.2. Гибридизация на зерне.
3.6. Плодовые тела.
3.7. Изучение базидий и базидиоспор у плодовых тел исследуемых штаммов.
3.8. Исследование изоферментных спектров неспецифических эстераз методом электрофореза у штаммов рода i.
Заключение.
Иллюстрации к главе 3.
Глава 4. Особенности макро, микроморфологии и ультраструктуры мицелии штаммов рода i при роете на разных типах сред.
4.1. Макроморфология колоний исследуемых штаммов при росте на агаризоваииых средах.
4.1.1. Макроморфология колоний штаммов рода i при росте на суслоагаре.
4.1.2. Макроморфология колоний штаммов рода i при росте на картофельноглюкозном агаре.
4.1.3. Макроморфология колоний штаммов рода i при росте на голодном агаре.
4.2. Микроморфология мицелия штаммов рода i при росте на агаризоваииых средах.
4.2.1. Микроморфология мицелия штаммов рода i при росте на суслоагаре.
4.2.2. Микроморфология мицелия штаммов рода i при росте на картофельноглюкозном агаре.
4.2.3. Микроморфология мицелия штаммов рода i при
росте на голодном агаре.
4.3. Особенности роста исследуемых штаммов в глубинной культуре.
4.3.1. Макроморфология роста штаммов рода i в глубинной культуре 7е сутки роста.
4.3.2. Микроморфология мицелия при росте в глубинной культуре.
4.4. Морфология митохондрий исследуемых штаммов при росте в поверхностной и глубинной культурах.
4.5. Особенности макро и микроморфологии мицелия штаммов рода 3 .
4.5.1. Макроморфология колоний штаммов рода при 3 росте на агаризоваиных средах.
4.5.2. Микроморфология мицелия штаммов рода на 4 агаризоваиных средах.
4.5.3. Макроморфология роста штаммов рода в 5 глубинной культуре.
4.5.4. Микроморфология роста штаммов рода в 5 глубинной культуре.
4.5.5. Морфология митохондрий штаммов рода в 6 поверхностной и глубинной культурах.
4.6. Влияние добавления порошкового агара и объема среды а колбе 6 на рост мицелия исследуемых штаммов.
4.7. Поведение ядер в клетках мицелия штаммов рода i в 2 поверхностной и глубинной культурах.
4.7.1. Размер интерфазных ядер.
4.7.2. Количество ядер в клетках мицелия.
4.7.2.1. Количество ядер в клетках мицелия возрастом 7
4.7.2.2. Количество ядер в клетках мицелия возрастом
суток.
4.7.2.3. Количество ядер в клетках глубинного мицелия 2 7е сутки роста.
4.7.3. Ядериоплазменнос отношение.
4.8. Ультраструктура клеток видов рода Аагкш при росте в 7 поверхностной и глубинной культурах 7е сутки роста.
4.9. Возврат к нормальному росту после глубинного 7 культивирования.
4 Особенности роста штаммов рода Аапст при разных 3 температурах.
4 Влияние ингибиторов на рост штаммов Аагкш и РкиШш в 5 глубинной культуре.
Заключение.
Иллюстрации к главе 4.
Выводы.
Список литературы


Переход от гаплофазы к дикариофазе и половому размножению может происходить поразному у разных видов агариковых. Многим видам например, i i . Базидиоспора прорастает первичным стерильным мицелием. При слиянии разнокачественных первичных мицелиев образуется фертильный гетерокариотический мицелий. Для базидиальных грибов характерен физиологический гетероталлизм, при котором скрещивающиеся штаммы лишены морфологического диморфизма, но отличаются типом половых феромонов. У базидиальных грибов в природе встречается много различных состояний локусов спаривания, обеспечивающих половую совместимость их носителей. Такой контроль совместимости назван диафоромиксисом. Различают однофакторный, или биполярный диафоромиксис, при котором совместимые штаммы имеют различные состояния одного фактора, и двуфакторный, или тетраполярный диафоромиксис, при котором для протекания полового процесса необходима гетероаллельность по двум несцепленным факторам Дьяков, . Иногда, например, при недостаточно хорошей аэрации, вторичный мицелий может напоминать по морфологии первичный он не содержит пряжек и терминальные клетки гиф такого мицелия многоядерны. Некоторым видам i . В этом случае спора сразу прорастает фертильным первичным мицелием, па котором и образуются плодовые тела. Для ряда видов агариковых, например, для i i . В его основе лежит образование не одно, а двуядерных мейоспор, причем вследствие неслучайной ориентации веретена в одну спору попадают ядра, гетероаллельные по типам спаривания, т. Дьяков, . В процессе мейотических делений вследствие кроссинговера между локусом спаривания и центромерой возможна рекомбинация локусов спаривания и восстановление гетероталлизма. У грибов описаны механизмы снижения рекомбинации Захаров, , , , . У . Показано, однако, что такие споры формируют медленнорастущие колонии на агаровых средах, не способны оккупировать естественные субстраты, имеют пониженную жизнеспособность и не могут скольконибудь долго существовать в природе Камзолкина и др. Двуспоровые базидиомицеты амфиталличны, т. В первом случае спора при прорастании сразу формирует вторичный гстерокариотический мицелий с плодовыми телами, во втором спора прорастает первичным мицелием, а для формирования вторичного мицелия необходимо слияние двух первичных мицелиев, гетероаллельных по локусу спаривания Дьяков, . Для ряда грибов описана еще одна разновидность гомоталлизма кассетный механизм переключения типов спаривания. Подобный процесс описан у аскомицетов vii x I, , i i , и базидиомицетов i V. При наличии в двух кассетах последовательностей ДНК, гомологичных по разным типам спаривания, возможен перенос генетической информации из кассеты в локус, переключение типа спаривания у отдельных потомков одной мейоспоры и слияние их с другими потомками, у которых переключения не было, т. Дьяков, . Иногда первичный мицелий гетероталличных видов может образовывать плодовые тела , . В базидиях таких плодовых тел не происходит кариогамии и мейоза, они могут напоминать по форме базидии нормальных плодовых тел i i или сильно отличаться от них xix i . Гаплоидное плодоношение наблюдалось в культуре гомокарионов i i v. I i, и i i v. Обычно базидии партеиогснетических плодовых тел несут по две одноядерные споры и два ядра остаются в базидии , . В природе монокариотическое плодоношение встречается довольно редко, но, например, многие монокариотические штаммы вида Мусепа iii , x . Партсногснстичсские плодовые тела для таких штаммов являются единственным способом размножения. Повидимому, монокариотическое плодоношение является тупиком эволюции. Изучение жизненных циклов разных видов рода i показало, что для большинства из них характерен гетероталличный тип жизненного цикла , , i, . Исключение составляет вид . Особенности жизненного цикла . Они прорастают мицелием, способным к половому размножению без стороннего партнера. До недавнего времени случаи содержания большего числа спор на базидии считались аномальными, но в гимении плодовых тел всегда присутствует определенный процент трехссмиспоровых базидий с одноядерными спорами, которые прорастают гомокариотическим мицелием.