Ферментативные и патогенные свойства криптококков-изолятов от больных и сапробионтов

• Автор: Тилева, Екатерина Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.24
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 143 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Биология и таксономическая характеристика

СгурШсосст пе оо гта т.

1.1 Криптококки и кршпококкоз.

1.2 История открытия С. пеооппапя .

1.3 Криптококкоз во второй половине XX и в начале XXI века.

1.4 Классификация и таксономия криптококков

1.5 Род СгурЮсосст.

1.6 Экология и половой цикл С. пеоогтаю.

1.7 Эпидемиология криитококкоза
Глава 2. Патогенность С. пеоогтапБ
2.1 Факторы вирулентности.
2.2 Полисахариды капсулы
2.3 Фенолоксидаза и синтез меланина.
2.4 Продукция маннитола.
2.5 Тип спаривания и разновидности криптококков.
2.6 Экспериментальный криптококкоз и модели на животных.
Глава 3. Чувствительность патогенного криптококка к различным
химическим веществам
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 4. Объекты и методы исследования
Штаммы криптококков, использованные в работе. Методы их
идентификации хранения
Питательные среды.
Определение уреазной активности.
Определение образования крахмалоподобного вещества
Изучение ассимиляции источников углерода и азота.
Исследование ферментативной активности криптококков
Определение фенолоксидазы
Определение лецитиназы.
Определение липазы.
Определение протеазы.
Определение активности химических веществ
Выявление микоциногенной активности сапротрофных
криптококков
Окрашивание микропрепаратов .
Электронномикроскопическое исследование криптококков
Определение сублетальных доз и разработка экспериментальной
модели криптококкоза.
Исследование активности препаратов, ингибирующих меланогенез
на модели экспериментального криптококкоза.
Методы статистической обработки.
Глава 5. Микробиологическая характеристика штаммов криптококков
5.1 Морфология штаммов криптококков
5.2 Ассимиляция различных источников углерода и азота
5.3 Уреазная активность гфилтококков.
Спектр экзоферментов патогенных криптококков
5.4 Определение лецитиназы.
5.5 Определение липазы
5.6 Ол редел е те прогеаз ы
5.пределение фенолоксидазы и подбор оптимачьного субстрата для
дифференцировки С. пеоогтат .
Глава 6. Действие различных химических веществ
на патогенный криптококк.
6.1 Влияние алифатических карбоновых кислот
6.2 Влияние фенольных соединений
6.3 Влияние ионов металлов
6.4 Влияние микоцинов .
Глава 7. Экспериментальный криптококкоз
7.1 Определение сублетальной дозы
7.2 Разработка модели экспериментального криптококкоза.
7.3 Влияние пассирования через организм мышей на свойства
С. пеоогтат .
7.4 Исследование действия делагила на выживаемость животных на модели экспериментального криптококкоза
Глава 8. Телеоморфы криптококков
8.1 Распределение типов спаривания среди исследованных штаммов
С. пеоогтат
8.2 Морфология РИоЬаъ1ИеИа пеоогтат.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ
Практические рекомендации .
Список литературы


Сравнить на лабораторных животных вирулентность штаммов С. Большинство штаммов . Микоцины сапротрофных криптококков обуславливают их киллерную активность в отношении патогенного криптококка. Некоторые сапротрофные криптококки . .ii . В этой связи они могут быть рекомендованы для биотипирования . Существование двух типов спаривания в жизненном цикле . Среди культур, выделенных от пациентов, преобладают штаммы с типом спаривания альфа. Среда с экстрактом зверобоя продырявленного i пригодна для применения в лабораторной практике для первичного выделения и идентификации . Впервые проведены скрининговые исследования экзоклеточных ферментов штаммов . России, а так же получена телеоморфная фаза жизненного цикла этого гриба. Установлено, что среди штаммов С. МАТа и типа МАТа, причем первый тип является преобладающим. Исследовано влияние фенольных соединений на С. С.пеоогтат из патологического материала и его одновременного определения. Впервые оценено воздействие низкомолекулярных алифатических карбоновых кислот на С. Проведено сравнительное изучение вирулентности штаммов С. Предложенная дифференциальнодиагностическая среда может быть использована в практике микробиологических и микологических лабораторий для выделения С. Полученные данные о связи морфобиологических свойств и вирулентности С. Результаты скрещивания различных штаммов С. С. пеоогтат могут быть использованы при составлении определителей и ключей для характеристики таксонов. Результаты работы в целом могут служить основой для написания методических пособий по морфобиологической характеристике и биотипированию криптококков, выделенных от больных, с последующим использованием микробиологами и микологами в лабораториях лечебнопрофилактических учреждений, а также в учебном процессе медицинских вузов они могут быть включены в спецкурсы по медицинской микологии. Материалы диссертации доложены на ежегодных научнопрактических конференциях по медицинской микологии Кашкинские чтения г. Петербург, Россия, , и , на 6м конгрессе Европейской конфедерации по медицинской микологии в г. Барселона, Испания а так же на международной конференции i в г гЛондон, Великобритания, в г Родос, Греция и г г. Аделаида, Австралия. По теме диссертации опубликовано печатных работ, в том числе 4 статьи, 3 доклада и 5 тезисов. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Глава 1. Криптококкоз оппортунистическая инфекция, спорадически возникающая во всем мире. Возбудителем криптококкоза является СгурЮсосст пеоогтат, дрожжеподобный базидиомицетовый гриб. Случаи инфекций, вызванных криптококками других видов встречаются значительно реже ,,. Многие виды млекопитающих и даже рептилии подвержены криптококковым инфекциям , , 8, 3, 5. Считают, что основной путь заражения ингаляторный. Из очага в легких гематогенно криптококк попадает в ЦНС центральную нервную систему, длительное время развитие инфекции протекает бессимптомно. Без лечения криптококкоз ЦНС, как правило, имеет летальный исход 1. В группы риска по заболеваемости криптококкозом входят ВИЧинфицированные лица, пациенты, получавшие кортикостероидную терапию, больные лимфомой, идиоиатической СЭ4 Тлимфоцитопенией и пациенты, перенесшие трансплантацию органов и получающие иммуносупрессивную терапию 1,8,9. В США, в отсутствие профилактики, от 5 до ВИЧинфицированных заболевали криптококкозом таковы данные на г, для африканских стран эти цифры выше более 5, 1. У ВИЧинфицированных пациентов, зарегистрированных в СанктПетербурге в г, частота заболевания криптококкозом составила около . Данных по России в целом пока нет. Криптококкоз не передается от человека к человеку, не зарегистрировано случаев непосредственной передачи криптококкоза от больных животных людям. Изредка в литературе встречаются описания случаев криптококковых инфекций у новорожденных и пожилых людей ,2, но, как правило, криптококкоз обнаруживают у пациентов лет, среди них преобладают мужчины 4,1, 1.