Получение энтеросорбента микотоксинов из дрожжей Saccharomyces cerevisiae

• Автор: Ахмадышин, Равиль Айратович
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Щёлково
• Количество страниц: 163 с. : ил.

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Микотоксины. Общая характеристика

1.2. Регламентированные в кормах микотоксины

1.2.1. Афлатоксины

1.2.2. Т2 токсин

1.2.3. Дезоксиниваленол

1.2.4. Зеараленон

1.2.5. Охратоксин А

1.2.6. Патулин

1.3. Энтеросорбция способ обезвреживания кормов от микотоксинов

1.4. Адсорбционные свойства клеточных стенок дрожжей
1.5. Обоснование исследований, необходимых для получения энтеросорбента микотоксинов из дрожжей vii
2. Материалы и методы исследований
2.1. Характеристика используемых материалов
2.1.1. Биомасса дрожжей
2.1.2. Химические реагенты
2.1.3. Ферментные препараты
2.1.4. Микотоксины
2.1.5. Витамины
2.1.6. Микроэлементы
2.1.7. Адсорбенты
2.1.8. Лабораторные животные
2.2. Методы исследований
2.2.1. Методы обработки дрожжевой биомассы
2.2.1.1. Автолиз
2.2.1.2. Протеолиз
2.2.2. Определение сырого протеина по Кьельдалю
2.2.3. Определение белка по Барнштейну
2.2.4. Метод проведения адсорбции микотоксинов. Выделение микотоксинов из раствора
2.2.5. Обнаружение и количественное определение микотоксинов
2.2.6. Сушка адсорбентов
2.2.7. Определение удельной поверхности адсорбентов
газохроматофафическим методом
2.2.8. Определение удельной поверхности, общего объема пор, количества активных центров адсорбентов методом ЯМР
2.2.9. Определение функциональных фупп адсорбентов
2.2 Определение насыпной плотности
2.2 Метод проведения адсорбции витаминов и микроэлементов
2.2 Количественный анализ витаминов
2.2 Количественный анализ микроэлементов
2.2 Метод проведения экспериментов i viv по определению эффективности адсорбента при острой интоксикации Т2 токсином
2.2 Статистическая обработка экспериментальных данных
3. Результаты и их обсуждение
3.1. Сравнительная оценка адсорбции Г2 токсина кормовыми дрожжами i ii и дрожжами vii
3.1.1. Сравнительная адсорбция Т2 токсина промышленно изготовляемыми дрожжами vii
3.2. Влияние условий обработки биомассы дрожжей vii на содержание белка в концентрате клеточных стенок
3.2.1. Анализ содержания белка в дрожжевых продуктах методом ЯМРралакеации
3.2.2. Влияние содержание белка в концентратах клеточных стенок на структурные свойства
3.2.3. Преимущество применения протеолитического ферментного препарата x 6 в процессе получения дрожжевых клеточных стенок
3.3. Сравнительная оценка адсорбции Т2 токсина адсорбентов, полученных из дрожжей vii
3.4. Взаимосвязь адсорбции Т2 токсина клеточной стенкой дрожжей vii со структурными свойствами адсорбентов на основе дрожжевых клеточных стенок
3.4.1. Различия в функциональных ix дрожжевых адсорбентов. Вероятность участия функциональных групп в адсорбции микотоксинов
3.5. Влияние клеточной стенки дрожжей vii на адсорбцию Т2 токсина
3.6. Влияние внешней поверхности дрожжевой клеточной стенки в адсорбции Т2 токсина
3.7. Сравнительная оценка адсорбции микотоксинов адсорбентами, полученными из дрожжей vii
3.7.1. Адсорбция афлатоксинов
3.7.2. Адсорбция зеараленона
3.7.3. Адсорбция охратоксина А
3.7.4. Адсорбция Т2 токсина
3.7.5. Адсорбция патулина
3.7.6. Адсорбция дезокси ни вал енол а
3.8. Влияние клеточной стенки дрожжей в адсорбции микотоксинов
3.9. Сравнительная оценка эффективности адсорбции Т2 токсина i viv различными адсорбентами
3 Сравнительная оценка адсорбции Т2 токсина i vi различными адсорбентами
3 Оценка адсорбции витаминов и микроэлементов клеточной стенкой дрожжей vii
3 Различие и общность адсорбентов на основе клеточных стенок дрожжей
3 Разработка технологии энтеросорбента микотоксинов из дрожжей
vii
Выводы
Практические предложения
Библиографический список
Приложения
Приложение 1
Приложение 2
Приложение 3
Приложение 4
Приложение 5
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Микотоксины образуются в цепи последовательных ферментных реакций из относительно небольшого числа химически простых промежуточных продуктов основного метаболизма, таких как ацетат, малонат, мсвалонат и аминокислоты. Наиболее важными этапами биосинтеза микотоксинов являются реакции конденсации, окислениявосстановления, алкилирования и галогенизации, которые приводят к образованию различных по структуре предшественников микотоксинов. Известно более 0 микотоксинов. Более 0 штаммов, относящихся к 0 видам, продуцируют микотоксины 2, с. ЗЗ. В России, в. Татарстане по степени распространенности наибольшее значение имеют фузариотоксины Т2 токсин, дезоксиниваленол ДОН и зеараленон. Наибольшее распространение в Центральном, Поволжском, Уральском, Сибирском, Дальневосточном регионах России имеет К ярогоМсИгеИа. Причины развития плесневых грибов. Плесневые грибы поражают корма при благоприятных условиях для их роста оптимальной температуре и
влажности. Подходящие условия для роста определенного вида гриба могут сложиться как в поле, так и в зернохранилищах 4, с Большинству грибов требуется, по крайней мере, кислорода. Влияние развития, плесневых грибов на кормовое сырье. Экономические последствия. В связи с этим в отдельных зернопродуктах возможно превышение ПДК даже при содержании микотоксина в зерне в пределах нормы 6, с. Индонезия Филиппины Тайланд на уровне 0 миллионов долларов в год, в развивающихся странах до всех заболеваний прямо или косвенно
связаны с микотоксинами 2, с. ЗЗ. Потери от микотоксинов в Европейском союзе оцениваются более чем 5 миллиардов евро в год 8, с. Биологическое действие микотоксинов. Микотоксины, поступая в организм с кормом, могут вызвать изменение состава микрофлоры в кишечнике, а, всасываясь в желудочнокишечном тракте оказать негативное действие на клетки, органы, ткани, физиологическое состояние животных. Наиболее восприимчивыми к действию микотоксинов являются молодняк, беременные самки, моногастричные животные. Жвачные животные более устойчивы, к микотоксинам по сравнению с моногастричными животными, поскольку микроорганизмы рубца способны инактивировать микотоксины. Микотоксины, обладая действием, угнетающим иммунитет, могут стать причиной инфекционного заболевания, снизить эффективность вакцинации 9, с Считается, что иммунодефицитные состояния животных, вызванные микотоксикозами, являются одной из основных причин широкого распространения лейкоза и туберкулеза у крупного рогатого скота на Кубани. ДНК, РНК и образование аддуктов ДНК. Охратоксин А, Т2 токсин подавляют в клетках синтез протеина, ДНК и РНК , с. Микотоксины могут стимулировать липидное персокисление в тканях. Это может быть результатом действия охратоксина А, Т2 токсина, афлатоксина, фумонизина, ДОНа, зеарапенона. Данный эффект микотоксинов во многих случаях вызван ухудшением антиоксидантной защиты организма , с. При одновременном поступлении нескольких микотоксинов в организм животного они могут усилить токсическое действие друг друга. Взаимодействие между ДОНом и фузаровой кислотой является превосходным примером синергичного взаимодействия между микотоксинами. Фузаровая кислота не токсична для животных даже при очень высоких концентрациях, но ее комбинация с ДОНом является высокотоксичной 8, с. При совместном воздействии Т2 токсина и афлатоксина острая средне смертельная доза соответственно составляет для белых крыс 0, мгкг и 2, мгкг, овец 0, мгкг и 3,8 мгкг. В то время как при, раздельном поступлениимикотоксинов эти дозы равнялись для крыс 2, и мгкг, для овец 3,1 и 9 мгкг массы тела. Сочетанный 2афлатоксикоз характеризуется усилением тератогенного и эмбриотоксического действий . Регламентированные в кормах микотоксины. Наиболее распрастраненными. Т2 токсин, зеараленон, охратоксин А, патулин и дезоксиниваленол. Их содержание в кормах регламентируется. Ветеринарными правилами и нормами по безопасности кормов, кормовых добавок и сырья для производства кормов ВетПиН. Установлены методы определения Т2 токсина, зеараленона и охратоксина А , патулина , , афлатоксинов . Афлатоксины. Продуценты афлатоксинов. Основными грибамипродуцентами афлатоксинов являются токсигенные штаммы грибов i v и i ii. От видового названия гриба . Гриб . России.