Аллергический метод диагностики токсоплазмоза животных.

• Автор: Коломацкий, Александр Прокофьевич
• Шифр специальности: 03.00.19
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1978
• Место защиты: Харьков
• Количество страниц: 194 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ .

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2. СРАВНЛТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ТОКСОЛЛ АЗгШОВ, ИЗГОТОВЛЕННЫХ РАЗЛИЧНЫМИ МЕТОДАМ .

3. УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СПОСОБА ИЗГОТОВЛЕНИЯ ТОКСОШ1АЗЫЕНН0Г0 АЛЛЕРГЕНА .

4. ИСПЫТАНИЕ ОПЫТНЫХ ОБРАЗЦОВ ТОКСОПЛАЗМШОГО АЛЛЕРГЕНА .

а антигенная активность .

С стерильность и безвредность.

в аллергические пробы па животных .

5. ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ РАЗНЫХ РАЗВЕДЕНЛй ТОКСО
Ш1 АЗМИ НА
6. ПРОЯВЛЕНИЕ ВНУТРИКОШИ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ ПРОБЫ У СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ, ДОМАШНЯ И ДИШ ЖИВОТНЫХ
7. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ТОКСШЛЗЫИИОВ ИЗ Т0КСОШ1АЗМ ПОЛЕВЫХ И ЛАБОРАТОРНОГО НН ШТАММОВ
Ь. ИЗУЧЕНИЕ СРОКОВ СОХРАНЕНИЯ АКТИВНОСТИ ТОКСО
ПЛАЗМИПАМИ .
9. ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ИСПЫТАНИЕ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ БНУ
ТШКОЖЖ ПРОБЫ НА ЖИВОТНЫХ
I. ИЗУЧЕНИЕ СПЕЦИФИЧНОСТИ ТОКСОПЛАШИНА УНИИЗВ И ВНУТРИКОЖНОЙ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ ПРОБЫ НА ТОКСОПЛАЗЫОЗ
II. ПОЛЕВЫЕ ШТАММЫ X II , ВЫДЕЛЕННЫЕ ОТ
гЛИПТНкГУ Нй ТйРРТПРеНЛ Л Л СП нГ. Ж 1 ПКАПТ1Д УППР
ЖИВОТНЫХ НА ТЕРРИТОРИИ ХАРЬКОВСКОЙ ОБЛАСТИ УССР.
. СПОСОБНОСТЬ Т0КС0ПЛАЗМ РАЗЛИЧНОЙ ВИРУЛЕНТНОСТИ
К ОБРАЗОВАНИЮ ОСЦИСТ .
Д. С Б С У а Д Е Н И Е РЕЗУЛЬТАТОВ.
1 а В ОД Ы .
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
ЛИТЕРАТУРА


В тех случаях, когда в эту смесь добавляется активатор, токсоплазми резко меняют сво отношение к красителю протоплазма остатся прозрачной, сохраняется форма и окрашивается только ядерная субстанция. Исследования многочисленных авторов позволили установить сходство активатора с комплементом. i указывает, что сыворотки крови людей, которые с отрицательным контролем дают менее неокрашенных токсоплазм тоже могут быть использованы в качестве активатора. Для этого необходимо их перед применением разводить физиологическим раствором 11 или 13. i а1. В последующем эти данные были подтверждены и другими исследователями i, Vi, . Исследуемые сыворотки крови в день постановки реакции инактивируют на водяной бане в течение минут при различных температурах, в зависимости от вида животных. После добавки свежеприготовленного раствора метиленовой синьки пробирки встряхивают и оставляют при комнатной температуре на минут. Реакцию учитывают микроскопически путм подсчта окрашенных и неокрашенных простейших в количестве 0 паразитов с обязательным наличием соответствующих контролей. Положительной считается реакция, когда после подсчта и более процентов паразитов остались неокрашенными сохранив свою форму. Предельным титром антител является такое разведение сыворотки, в котором Оолее токсоплазм остается неокрашенными. Если для учета реакции применяется фазовоконтрастный микроскоп, тогда метиленовую синьку заменяют 4 раствором формалина. Известно много модификаций реакции с красителем. С целью облегчения учта этой реакции , разработали микромодификацию этой реакции, которая ставится в специальных лоточках с плоским дном из неорганического стекла. РСФ является высокочувствительным и специфическим индикатором противотоксоплазменных антител как у человека, так и у животных iii, i0, она позволяет выявлять антитела ооычно через неделю после заражения. Ъ последующие 34 недели их титры резко возрастают и сохраняются на определенном уровне 11,5 года, а затем постепенно снижаются, но вс же реакция остатся положительной более продолжительное время, чем РСК. Несмотря на высокую чувствительность и специфичность РСФ довольно сложна в выполнении, требует исключительно точного соблюдения режимов постановки, специального лабораторного оборудования, а также наличия антигена живых токсоплазм, для чего неооходимо постоянно поддерживать в лаборатории высоковирулентный штамм возоудителя. Сывороткаактиватор быстро теряет свои свойства при хранении е в обычных условиях холодильника. И, наконец, необходимо определенное умение и соответствующие меры безопасности, чтооы избежать заражения. Реакция связывания комплемента РСК для диагностики токсоплазмоза была впервые применена i v, в практику введена i . Сущность е состоит в том, что специфические антитела, содержащиеся в сыворотке крови переболевших животных, обладают свойством в присутствии комплемента вступать в связь, то есть образовывать комплекс антителоантиген. В этом случае комплемент уходит на связь с этим комплексом. Когда исследуемая сыворотка не содержит специфических антител, комплекса антителоантиген1 не ооразуется и комплемент остается свободным. Поэтому он используется в качестве связующего звена между гемолизином и эритроцитами барана, являющихся в этом случае антителом и антигеном. При таком сочетании компонентов наступает полный гемолиз эритроцитов. Специфические комплементсвязывающие антитела в сыворотке крови зараженных токсоплазмами животных обычно появляются к концу второй недели. Установлено, что продолжительность сохранения их в диагностических титрах может зависеть от вида животного, возраста, способа заражения, дозы возбудителя, вирулентности штамма и целого ряда других факторов. В литературе описано довольно много способов приготовления токсоплазмозного антигена необходимого для постановки реакции. i и vо использовали в качестве антигена для РСК спиртовый экстракт высушенных селезнок кроликов, погибших от токсоплазмоза.