Иммунохимический анализ, диагностическая эффективность и протективные свойства клеточных антигенов протосколексов Echinococcus multilocularis

• Автор: Руднева, Ольга Вячеславовна
• Шифр специальности: 03.00.19
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 148 с. : ил.

Оглавление.
Введение.

1. Обзор литературы.

.

1.1 Антигены эхинококков, их характеристика,

диагностическая эффективность.

1.2 Иммунопрофилактика

ларвальных .

цестодозов.

2. Собственные исследования.

2.1 Материалы и методы.

.
2.1.1. Подготовка к проведению культуральной работы. .
2.1.2. Получение инвазивного материала . ii, . заражение белых крыс.
2.1.3. Получение вторичных ларвоцист . ii 2, 4 и 6 месячного возраста, приготовление первичной клеточной культуры протосколексов, проверка ее . жизнеспособности.
2.1.4. Культивирование клеток протосколексов из ларвоцист .ii разного возраста, получение клеточных метаболитов, оценка их антигенной активности. .
2.1.5. Контроль клеточных метаболитов на стерильность, безвредность, определение содержания белка. .
2.1.6. Иммунохимический анализ антигеновметаболитов клеточной культуры протосколексов из 2, 4 и 6 месячных ларвоцист . ii .
а с кроличьей гипериммунной сывороткой к антигенам соматического экстракта протосколексов паразита .
б с сывороткой человека с подтвержденным диагнозом цистного и альвеолярного эхинококкозов .
с с сыворотками экспериментально зараженных Е. ii белых крыс. .
2.1.7. Исследование антигеноактивных серий метаболитов клеточных антигенов протосколексов из ларвоцист . ii иммуноферментной реакцией . ИФР.
а с сыворотками свиней .
б с сыворотками людей. .
2.1.8 Изучение иммунопрофилактических свойств клеточных антигенов при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе мышей в комплексе .
а с иммуномодулятором риботаном .
б с полным адъювантом Фрейнда. .
2.1.9. Статистическая обработка результатов. .
2.2 Результаты исследований. .
2.2.1. Анализ данных по культивированию клеток протосколексов . ii из 2, 4 и 6 месячных ларвоцист паразита. .
2.2.2. Характеристика и контроль клеточных антигенов протосколексов из 2, 4 и 6 месячных ларвоцист Е. ii. .
2.2.3. Результаты иммунохимического анализа клеточных антигенов протосколексов. .
2.2.4. Оценка диагностической эффективности клеточных антигенов протосколексов из 2, 4 и 6месячных ларвоцист . ii. .
а при цистном эхинококкозе свиней .
б при цистном эхинококкозе людей. .
2.2.5. Сравнение диагностической эффективности клеточных антигенов протосколексов из 2, 4 и 6 месячных ларвоцист . ii при цистном эхинококкозе человека.
2.2.6. Иммунопрофилактические свойства клеточных антигенов в комплексе с риботаном при экспериментальном вторичном альвеолярном эхинококкозе мышей.
2.2.7. Иммунопрофилактические свойства клеточных антигенов в комплексе с адъювантом Фрейнда при экспериментальном вторичном альвеолярном эхинококкозе мышей.
3. Обсуждение полученных результатов.
4. Выводы.
5. Список использованной литературы.
Приложение.
.
.
1.
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В заявку на изобретение Способ профилактики вторичного альвеолярного эхинококкоза гидатидоза. Получено положительное решение на выдачу патента от г. Установленная диссертантом иммунохимическим анализом идентичность антигеновметаболитов культивируемых в искусственной питательной среде клеток протосколексов . Апробация работы. Секции Инвазионные болезни животных Отделения ветеринарной медицины РАСХН г. Культивирование клеток протосколексов, выделенных из ларвоцист . Иммунохимический анализ клеточных антигенов разного типа с использованием кроличьей гиперимунной сыворотки к соматическому экстракту протосколексов паразита, сыворотки человека с подтвержденным диагнозом цистного и альвеолярного эхинококкоза и сыворотки экспериментально зараженных . Оценка диагностической эффективности ИФР с клеточными антигенами . Протективные свойства полученных клеточных антигенов при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе. Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных работ и 2 работы приняты к публикации. Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на страницах машинописного текста. Состоят из введения, обзора литературы, раздела собственных исследований, включающего материалы и методы, результаты исследований и их обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы и приложение. Список литературы включает 0 источников, в том числе отечественных и 7 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована таблицами и рисунками. Обзор литературы. Проблема профилактики и ликвидации гельминтозов сельскохозяйственных животных продолжает оставаться актуальной, несмотря на многочисленные разработки способов и методов борьбы с ними. Особую сложность представляют собой тканевые формы гельминтозов, как ларвальные цестодозы, паразитологическая диагностика которых не представляется возможной, а недостаток, а иногда отсутствие эффективных антгельминтных препаратов при этих гельминтозах выдвигает в качестве первоочередной задачи изыскание и разработку иммунопрофилактических средств. Иммунопрофилактика, которая достигается иммунизацией животных специфическими антигенными препаратами гельминтов и сопровождается формированием защитной реакции к последующему заражению, является одним из перспективных направлений борьбы с этими гельминтозами. Анализ научной литературы показал различные подходы к получению антигенов гельминтов, используемых как в иммунодиагностике, так и в иммунопрофилактике гельминтозов. В целом эти подходы включают использование в качестве антигенов ослабленных облучением гельминтов соматические экстракты из них метаболические или экскреторносекреторные антигены, вырабатываемые культурами гельминтов i vi. Антигены высокомолекулярные коллоидные вещества, способные при поступлении в организм вызывать образование особых глобулинов антител, специфически реагирующих с антигенами. От качества используемых для иммунодиагностики антигенов чистоты, активности, специфичности во многом зависит эффективность чувствительность и специфичность иммунологических реакций. Говоря о характеристике паразитарных антигенов, Саргоп а. При этом важны природа и происхождение антигенов в зависимости от структуры и физиологии паразита. В практическом плане целесообразно развитие и использование комбинированных методов, включающих биохимические, физикохимические, иммунологические и биотехнологические исследования для характеристики и очистки антигенов. Необходима реальная оценка пригодности антигенов для диагностики паразитарных инвазий у человека и домашних животных и их потенциальное значение в развитии программ вакцинации. По своей природе антигены гельминтов можно классифицировать как функциональные, основу которых составляют в основном экскреты и секреты гельминтов и соматические, содержащиеся в тканях тела и высвобождающиеся при нарушении их целостности, гибели и распаде в теле хозяина. В настоящее время накопилось достаточное количество экспериментальных данных по иммунохимической характеристике и диагностической эффективности тех и других.