Формирование, ультраморфология, биология и экология мирацидия Fasciola hepatica L., 1758

• Автор: Соколина, Флюра Мухаметгалеевна
• Шифр специальности: 03.00.19
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 182 с. : ил.; 20х15 см

Необходимость выяснения особенностей условий обитания мирацидия побудила нас обратиться к его промежуточным хозяевам моллюскам. Проблемы, связанные с изучением паразитохозяинных отношений печеночной двуустки, изложены в соответствующей главе. Исследовались мирацидии дигенетической трематоды i i , из семейства ii ii . Жадину, . Изучения велись с г. Мариты печеночной фасциолы собирали при вскрытии печени коров в убойном цехе Казанского мясокомбината и в лабораторных условиях получали от них яйца. Моллюски добывались из водоемов Алексеевскою, Алькеевского и Высокогорского районов Республики Татарстан, из Волжских заливов в районе Биологической станции Казанского университета в Зеленодольском районе. Малый прудовик был собран в канавах и ручьях, расположенных на выпасах и скотоперегонных путях станицы Архонская в Северной Осетии и в Закарпатье. Моллюсков собирали для получения стерильного потомства и для вскрытий на зараженность. Прежде всего были разработаны методики содержания мариты фасциолы, получения яиц, инкубации, продления жизни и проникающей способности мирацидиев Соколина, ,,. Затем методика подготовки мирацидия для изучения в световом микроскопе Соколина, , , в фазовоконтрастном Соколина, а, в электронном Соколина, Голубев, . Умеренное количество паразитов в печени коров уже вызывает резкие паталогоанатомические изменения желчных путей. При высокой зараженности протоки печени сильно утолщаются и покрываются известью. Е.Павловский объясняет эти изменения как механическим и химическим воздействием паразита на их стенку, так и влиянием микробной флоры желчных путей в комбинации с патогенным действием двуусток. Благодаря сильному развитию соединительной ткани крупные желчные ходы просвечивают в виде беложелтых тяжей. Ф.М. Вскрытие печени поперечными разрезами на расстоянии 1 см друг от друга и легкое надавливание на желчные протоки перед линией разреза приводили к выскальзыванию фасциол из желчных протоков. Привезенные в лабораторию двуустки быстро ополаскивали в воде, помещали в чашки Петри с дистиллированной водой и ставили в термостат при температуре С на часа. Это давало возможность получить чистую культуру яиц. Большая часть зрелых яиц оставалась в желчном пузыре. Их взбалтывали и сливали в кристаллизатор, желчь сливали, яйца отмывали дистиллированной водой, обрабатывали в соответствии с методикой М. Жеппс , и ставили в термостат. Применяли метод иссечения половых протоков двуустки, рекомендованный доктором Илсоном. При этом в воде оставались кусочки ткани, что приводило к загниванию среды, размножению бактерий, которые мешали получить чистую культуру мирацидиев, необходимых при электронномикроскопическом исследовании и изготовлении гистологических препаратов. Самый чистый и урожайный способ получения яиц это сбор сосальщиков из теплой печени. Вскрывая печень по крупным желчным протокам, мариту извлекают пинцетом, быстро ополаскивают в дистиллированной воде С и помещают в чашку Петри с дистиллированной водой и капелькой пенициллина, который подавляет размножение бактерий. Выращенные из яиц мирацидии использовались для исследования их морфологии и биологии, для заражения моллюсков и получения партенит. Измерения и исследования подвижных частей тела мирацидия размера апикальной папиллыхоботка, ресничного покрова, изучение мерцательных клеток протонефридиев проводились с фазовоконтрастным устройством микроскопа МБИб. На опыте мы убедились, что этот способ микроскопирования должен обязательно иметь место при изучении живых объектов. Тонкая структура мирацидиев просматривалась на электронном микроскопе типа 7. В электронной микроскопии существует отработанная схема последовательности операций, которая включает ряд этапов фиксацию, обезвоживание, заливку в эпоксидные смолы, полимеризацию, получение ультратонких срезов, контрастирование срезов, просмотр срезов в электронном микроскопе, получение фотографий и их интерпретацию. В качестве фиксаторов применяют различные высшие альдегиды, четырехокись осмия, перманганат калия и другие вещества, растворенные или разведенные в буферных смесях , .