Изучение нерасхождения и потерь половых хромосом в мейозе у Drosophila melanogaster при нарушении синтеза белков теплового шока

• Автор: Комарова, Анна Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 203 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Гам стогенез дрозофилы.II

1.1. Оогенез и его регуляция.

1.2. Сперматогенез и его регуляция.

2. Оплодотворение у дрозофилы.

3. Нарушения в распределении хромосом при клеточных

делениях

4. Система БТШ

4.1. Основные семейства БТ1 и их функции.

4.1.1. Семейство БТШ
4.1.2. Высокомолекулярные БТШ.
4.1.3. Низкомолекуляриые БТШ.
4.2. Синтез БТШ в оогенезе дрозофилы
4.2.1. Индуцибельный синтез БТШ .
4.2.2. Конститутивный синтез БТШ.
5. Ответная реакция организма на действие гипертермии . . . .
5.1. Повреждающий зффект теплового воздействия
5.2. Защитная реакция клеток на действие стрессовых
факторов
5.3. Термотолерантиосгь.
6. Особенности мутантной линии 3 i
.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Изучение влияния мутации I3 на чувствительность к тепловому воздействию С, 1 ч самок i
по различным критериям
1.1. Использованные линии и гибриды
1.2. Методика экспериментальных воздействий
2. Изучение влияния мугации 3 на чувствительность к тепловому
воздействию С, I ч самцов i
по различным критериям
2.1. Использованные линии
2.2. Методика экспериментальных воздействий
3. Статистическая обработка резу льтатов экспериментов . .
РР.ЗУЛЬТЛТЫ.
1. Влияние мутации 3 на чувствительность к тепловому
воздействию С. 1 ч самок i
по различным критериям
1.1. 1 ерасхождение и потери половых хромосом в мейозе
у самокимаго
1.2. Выживаемость.
1.3. Плодовитость.
1.4. Уровень стерильности.
1.5. Распределение различных стадий оогенеза в яичниках самок линий и I3 и рецинрокных
меж.линейных гибридов в опыте и контроле.
1.6. Повреждаемость яйцевых камер в овариолах.
1.6.1. Распределение нормальных и поврежденных яйцевых камер по критерию повышения проницаемости мембран
для витальных красителей
1.6.2. Повреждения яйцевых камер, вызывающие
характерные нарушения овариол после теплового воздействия .
1.6.2.1. Деформация яйцевых камер
1.6.2.2. Слипание яйцевых камер
1.6.2.3. Резорбция яйцевых камер.
1.6.2.4. Пустые зоны в овариолах.
1.7. Сравнение динамики изменения числа зрелых оощпов
в яичниках обработанных самок с динамикой яйцеоткладки в
течение 4 суток после воздействия
1.8. Анализ экспрессии генарспортера
в яичниках самокимаго в качестве критерия экспрессии
генов БТШ
2. Изучение формирования тсрмотолерап пости у самок i по различным критериям
2.1. I расхождение и потери половых хромосом в мейозе
у самокимаго
2.2. Выживаемость самокимаго
2.3. Плодовитость самокимаго
2.4. Уровень стерильности
2.5. Распределение яйцевых камер на разных стадиях
оогенсза в яичниках
2.6. Повреждаемость яйцевых камер в овариолач
2.6.1. Деформация яйцевых камер
2.6.2. Слипания яйцевых камер
2.6.3. Резорбция яйцевых камер.
2.6.4. Пустые зоны в овариолах.
2.7. Сравнение динамики изменения числа ооцитов
в яичниках обработанных самок с динамикой яйцеоткладки в течение 4 суток после воздействия.
3. Влиятие мутации 3 на чувствительность к тепловому воздействию С, 1 ч самцов i
гю различным критериям
3.1. Нерасхождсние и потери половых хромосом
в результате действия ТШ на мейоциты самцов, находившихся в момент обработки на стадии куколки.
3.2. Выживаемость.
3.3. Плодовитость.
3.4. Уровень стерильности
ОБСУЖДЕНИИ
1. Нерасхожление и потери половых хромосом в оогенезе у самок i , содержащих в генотипе мутацию 3
2. Формирование термотолсрантности у самок линии дикого типа и мутантной линии 3.
3. Характер наследования плейотропных эффектов
мутации 3.
3.1. Рецессивные эффекты мутантного аллеля
при действии теплового шока.
3.1.1. Выживаемость
3.1.2. Уровень стерильности
3.1.3. Дифференциальная чувствительность стадий
оогенеза и динамика яйцеоткладки.
3.2. Полудоминантные эффекты мутантного аллеля
при действии тепловою шока.
4. Возможное влияние продукта мутантного аллеля 3 на нерасхожление и потери половых хромосом в мейозе
при тепловом воздействии на самок дрозофилы
5. Возможное влияние продукта мутантного аллеля
на расхождение материнских и отцовских половых хромосом
при тепловом воздейст вии на самцов дрозофилы.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Он способен гидролизовать молекулы АТФ и преобразовывать выделяющуюся при этом химическую энергию в механическую, за счет которой осуществляется движение сперматозоида 0ама е а1, . Таким образам, спермин прегерпеваст далеко идущие преобразования для переноса своего наследственного материала в ооцит. Теперь рассмотрим вкрат це строение зрелой яйцеклетки. Ооцит заключен в прочный хорион, сформированный фолликулярным эпителием. Под хорионом располагается гликопротсиновая желточная оболочка, которая также образована при участии фолликулярного эпителия. Она играет важную роль в обеспечении видовой специфичности при проникновении спермия. Цитоплазма ооцита непосредственно окружена плазматической мембраной, которая регулирует при оплодотворении поступление некоторых ионов главным образом ионов натрия и способна сливаться с плазматической мембраной спермия 8с1тгое1ег, . Состояние ядра зрелого ооцита определяется как мстафаза 1. Ядерная оболочка разрушается, и хромосомы оказываются лежащими свободно в оо плазме, в передней трети я йод ближе к дорзальной стороне. Эта структура называется кариосфсрой. Следующие фазы мейоза два деления с образованием грех направительных телец и одного пронуклеуса происходят в оплодотворенном яйце НиеШтег, . Для свежеотложенных янц характерно быстрое протекание этих стадий. При стандартных условиях от метафазы 1 до момента завершения второго мсйотического деления проходит минут. В течение следующих 3 минут один из четырех 1аплоидных продуктов мейоза формирует материнский пронуклеус. Во время этого минутного периода конденсированная головка сперматозоида увеличивается в размере и преобразуется в отцовский пронуклеус. До мстафазы первого деления отцовские и материнские хромосомы располагаются на веретене дробления раздельно. Первое митотическое деление завершается приблизительно на минуте после откладки яйца ОУйфег, . Таким образом, проникновение спермия в ооцит является стимулом, запускающим запрограммированную цепь метаболических событий. В результате происходит активация ранее метаболически инертного ооцита, которая, повидимому, обусловлена повышением внутриклеточной концентрации ионов кальция, сопровождающимся повышением внутриклеточного . ДНК i . Результаты ряда опытов свидетельствуют о том, что именно увеличение содержания ионов Саг играет важную роль в активации развития зародыша. Если в оплодотворенные яйца инъецировать связывающее кальций вещество ЭГТА, то в них не происходит активации метаболизма. Напротив, неоплодотворенные яйца можно активировать искусственно посредством воздействий, повышающих концентрацию ионов Са2 в цитоплазме Ныло показано, что микромолярные количества кальциевого ионофора А7 вызывают реакции, характерные для оплодотворенных яиц в нормальной последовательности происходят отделение оболочки оплодотворения, повышение внутриклеточного , скачкообразное увеличение потребления кислорода, интенсификация синтеза белков и ДНК i, . Однако впоследствии развитие таких искусственно активированных яиц останавливается, так как они остаются гаплоидными. Обычно раннюю остановку развития таких яиц объясняют отстуствием в них отцовской центросомы, необходимой для организации веретена деления Гилберт, . Однако многие исследователи считают, что в гаметогенезе дрозофилы решающую роль в организации микротрубочек играют не центросомы, а кинегохоры хромосом и ассоциированные с ними белки. Имеется ряд доказательств, подтверждающих эту точку зрения. Так, рост микротрубочек начинается не от полюсов клетки, а от места скопления хромосом. Более того, отделенные от веретена делешя хромосомы образуют вокруг себя скопления микротрубочек, напоминающие веретено деления. Эго явление наблюдается как в оогенезе, так и в сперматогенезе . V, i, . Показано также, что антитела к тубулину преимущественно связываюгся с хроматином в области метафазной пластинки ооцита, а по направлению к полюсам клетки шггенсивность окрашивания быстро снижается , , . В литературе имеются сведения о том, что центросомы редуцируются в гаметогенезе и восстанавливаются после оплодотворения , .