Молекулярная изменчивость кластера импринтированных генов хромосомы 15 у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана

• Автор: Саженова, Елена Александровна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 148 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Феномен геномного имприитинга

1.2. Однородительская дисомия и геномный импринтинг.

1.3. Импринтированные гены человека и мыши

1.4. Механизмы регуляции геномного импринтинга

1.5. Особенности молекулярной организации импринтированных

генов хромосомы и регуляция импринтинга.

1.6. Клиническая характеристика и генетическая гетерогенность

синдромов ПрадераВилли и Энгельмана.

Заключение.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Объем и структура материала
2.2. Методы выделения ДНК.
2.3. Оценка статуса метилирования гомологов хромосомы
2.3.1. Определение метилированного и неметилированного
гомологов хромосомы с использованием бисульфитной обработки ДНК
2.3.2. Определение характера метилирования ДНК I экзона гена
с использованием метилчувствительных рестриктаз
2.4. Определение однородительской дисомии хромосомы
2.5. Культивирование фибробластов тканей спонтанных абортусов и
приготовление препаратов метафазных хромсом
2.6. Флюоресцентная гибридизация i i
2.7. Методы статистического анализа.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Полиморфизм ДНКмаркеров хромосомы у славянского
населения ЗападноСибирского региона России.
3.2 Оценка статуса метилирования импринтированных генов у
больных с синдромами ПрадераВилли и Энгельмана.
3.3. Анализ делеционного варианта синдромов ПрадераВилли
и Энгельмана
3.4. Однородительская дисомия хромосомы при синдромах ПрадераВилли и Энгельмана.
3.5. Генетическая гетерогенность и алгоритм диагностики синдромов ПрадераВилли и Энгельмана.
3.6. Особенности клинического полиморфизма разных молекулярных форм синдрома ПрадераВилли.
3.5. Оценка однородительской дисомии хромосомы как
возможного фактора пренатального отбора у человека
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Изучить вклад однородительской дисомии хромосомы в этиологию синдромов ПрадераВилли и Энгельмана, а также механизмы ее возникновения. Исследовать фенотипические особенности разных молекулярных вариантов синдрома ПрадераВилли. Оценить вклад однородительской дисомии хромосомы , как одного из молекулярных вариантов синдромов ПрадераВилли и Энгельмана, в эмбриолетальность у человека. Установлены молекулярные формы патологии у больных с синдромами ПрадераВилли и Энгельмана. Впервые у пробанда с синдромом ПрадераВилли обнаружена сегментная материнская однородительская гетеродисомия области я ц, что свидетельствует о возможности соматического кроссинговера как механизма, детерминирующего развитие данного заболевания. Выявлены фенотипические отличия между больными с синдромом ПрадераВилли, имеющими делеционный вариант заболевания и вариант болезни, обусловленный однородительской дисомией хромосомы материнского происхождения. Показано, что ОРД хромосомы не вносит заметного вклада в гибель кариотипически нормальных зародышей в эмбриональном периоде развития человека. ПрадераВилли и у больных с синдромом Энгельмана. Выявлены разные молекулярные варианты синдромов, определена их частота и фенотипическое проявление, оптимизированы подходы к диагностике этих болезней. Обнаружены достоверные отличия разных молекулярных вариантов синдрома ПрадераВилли по ряду систем аномалий развития органов аномалии нервной системы, позвоночника и конечностей, которые могут быть использованы для предварительной диагностики заболевания. Изученный в настоящей работе комплекс полиморфных ДНКмаркеров хромосомы может быть использован в молекулярногенетических исследованиях для ДНКдиагностики наследственной патологии, анализа сцепления, идентификации личности, определения биологического отцовства и других форм родства. Аллельный спектр полиморфных микросателлитных ДНКмаркеров хромосомы у славянского населения ЗападноСибирского региона России отличается от европейских популяций. У больных с синдромами ПрадераВилли и Энгельмана преобладающим типом мутаций области яя являются делеции, а доля однородительской дисомии хромосомы материнского и отцовского происхождения составляет ,0 и ,2 соответственно. Сегментная однородительская дисомия хромосомы , выявленная при синдроме ПрадераВилли, свидетельствует о возможности соматического кроссинговера как механизма, детерминирующего развитие данного заболевания. Больные с синдромом ПрадераВилли, имеющие делеционный вариант и ОРД хромосомы , отличаются по степени выраженности отдельных клинических признаков заболевания. Больные с ОРД имеют с меньшей частотой аномалии развития нервной системы, позвоночника и конечностей. Однородительская дисомия по хромосоме не вносит заметного вклада в раннюю эмбриональную летальность у человека. Апробация работы. В.П. Чехова Томск, научнопрактической конференции Медицинская генетика проблемы диагностики, профилактики и диспансеризации больных с наследственной патологией Томск, Всероссийской научной конференции, посвященной летию академика РАМН К. Новосибирск, II съезде Российского общества медицинских генетиков Курск, научной конференции молодых ученых СО РАМН Фундаментальные и прикладные проблемы современной медицины Новосибирск, научнопрактической конференции Молекулярнобиологические технологии в медицинской практике Новосибирск, V итоговой научной конференции НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН Томск, научнопрактической конференции Молекулярнобиологические технологии в медицинской практике Новосибирск, межлабораторном семинаре НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН Томск, . Публикации. По теме диссертации опубликовано работ. Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов, результатов собственных исследований с обсуждением по разделам, заключения, выводов и списка цитируемой литературы. Диссертация изложена на 6 страницах машинописного текста, содержит таблиц и рисунков. Список литературы включает 5 источников, из них отечественных и 2 зарубежных.