Острые пострецепторные механизмы защиты миокарда 17'бета'-эстрадиолом при ишемии (экспериментальное исследование)

• Автор: Совершаев, Михаил Александрович
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Архангельск
• Количество страниц: 120 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Клеточные эффекты рэстрадиола

1.2. Внутриклеточные эффекты протеин киназы В

1.3. Внутриклеточные эффекты протеин киназы С

1.4. Свободные радикалы хорошие или плохие

1.5. Феномен прекондиционирования к ишемии

1.6. Ишемия и реперфузия миокарда

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Система изолированного сердца
2.2. Измерение зоны риска и размера инфаркта
2.3. Субклеточное фракционирование
2.4. Определение общей концентрации белка в пробах
2.5. и Вестерн иммуноблоттинг
2.6. Инкубация мембран с антителами и визуализация сигнала
2.7. Хемилюминесцентное определение свободных радикалов
2.8. Статистический анализ
2.9. Реагенты ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Влияние рэстрадиола на функцию изолированного сердца
3.1.1. Коронарный ток
3.1.2. Давление, развиваемое левым желудочком
3.1.3. Конечнодиастолическое давление
3.1.4. Частота сердечных сокращений
3.2. Влияние 3эстрадиола на размер инфаркта миокарда
3.2.1. Выбор концентрации рэстрадиола
3.2.2. Пол крыс и влияние рэстрадиола на размер инфаркта
3.2.3. Вортманнин и прекондиционирование рэстрадиолом
3.2.4. Шелеритрин и прекондиционирование рэстрад иол ом
3.2.5. Ишемическое прекондиционирование и прекондиционирование рэстрадиолом
3.2.6. Меркаптопропионилглицин и прекондиционирование рэстрадиолом
3.3. Другие планиметрические показатели
3.4. Влияние прекондиционирования рэстрадиолом на внутриклеточный сигналлинг в миокарде
3.4.1. Протеин киназа В и прекондиционирование рэстрадиолом
3.4.2. Протеин киназа С и прекондиционирование рэстрадиолом
3.4.3. Экстраклеточнорегулируемые протеин киназы 12 и прекондиционирование рэстрадиолом
3.5. Оценка кроссконтаминации субклеточных фракций
3.6. Эффект рэстрадиола на образование свободных радикалов
т v
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Эффекты Рэстрадиола на функции сердца
4.2. Эффекты 3эстрадиола на толерантность к ишемии в миокарде крысы
4.3. Роль протеин киназы В в прскондиционировании рэстрадиолом
4.4. Роль протеин киназы С в прекондиционировании рэстрадиолом
4.5. Экстраклеточнорегулируемые протеин киназы 12 и прекондиционирование рэстрадиолом
4.6. Роль свободных радикалов в прекондиционировании рэстрад иолом
Выводы
Список литературы


Наличие установленной связи между и альфа субъединицей белков i М. С i С может активировать РКС каридиомиоцитов, что не доказано экспериментально и требует исследования. Понимание молекулярных механизмов развития клеточной адаптации к условиям ишемическогореперфузионного стресса имеет особенную важность для поиска и внедрения в клиническую практику фармакологических методов усиления ишемической толерантности тканей и органов организма человека. Цель исследования изучить на модели изолированного сердца крысы острые пострецепторные механизмы защиты миокарда Рэстрадиолом при ишемии. Изучить роль острого воздействия Определить влияние рэстрадиола на уровень активации протеин киназы В и протеин киназы С в клеточных и субклеточных фракциях прекондиционированного миокарда. Исследовать значение свободных радикалов в развитии антиишемического эффекта рэстрадиола. Оценить функциональное состояние изолированного сердца крысы во время острого воздействия эстрадиола. Острое введение Рэстрадиола в эффективных концентрациях, превышающих физиологические, обеспечивает повышение толерантности миокарда крыс к ишемии. В механизме кардиопротективного эффекта Рэстрадиола при ишемии играет роль активация пострецепторных сигналлинговых путей протеин киназы В и протеин киназы С. Увеличение выработки свободных радикалов в миокарде в ответ на введение рэстрадиола является медиатором повышения толерантности сердца к ишемическомуреперфузионному повреждению. Индуцированный эстрадиолом отрицательный инотропный эффект опосредуется активацией протеин киназы В и протеин киназы С. Впервые на модели изолированного сердца крысы изучены молекулярные механизмы кардиопротективного эффекта Рэстрадиола с точки зрения его влияния на внутриклеточные пострецепторные сигнальные пути, активация которых обусловливает развитие клеточной адаптации к условиям ишемическогореперфузионного повреждения. Показано, что вызванная 3эстрадиолом активация протеин киназ В и С в предишемическом миокарде является необходимым условием улучшения выживания миокарда в условиях ишемического стресса. Новыми являются данные, свидетельствующие о роли транзиторного повышения внутриклеточного уровня свободных радикалов в развитии острого кардиопротективного эффекта Рэстрадиола. Результаты исследования вносят вклад в понимание молекулярных механизмов защитного эффекта полового гормона рэстрадиола на сердечнососудистую систему. Рэстрадиолом. Данное исследование вносит вклад в понимание механизмов межполовых различий в заболеваемости и смертности от сердечнососудистых заболеваний. Результаты, полученные в работе, используются в курсах нормальной и патологической физиологии Северного государственного медицинского университета акт внедрения от . Материалы диссертационного исследования были доложены на ежегодных итоговых сессиях СГМУ , , ежегодном конгрессе Всемирного Общества по Исследованиям Сердца Ii i , i i, Сегед, Венгрия, 36 июля, г. Здоровье и образование в XXI веке Москва, г. Скандинавского общества анестезиологов Тромсе, Норвегия. Университета г. Тромсе Норвегия, состоявшихся января года и марта года, на заседаниях Института клинической физиологии СГМУ , г. СГМУ г. Публикации. По результатам исследования опубликовано 5 работ. Структура и объем диссертации. Работа изложена на 9 страницах машинописи. Состоит из введения, обзора литературы, глав Объекты и методы исследования, Результаты собственных исследований, Обсуждение полученных результатов, выводы и списка литературы. Диссертационная работа иллюстрирована таблицами и рисунками. Список литературы содержит 4 наименования. Экспериментальная часть исследования выполнена на кафедре анестезиологии и реаниматологии СГМУ г. Архангельск, а также на кафедре медицинской физиологии Университета г. Тромсе Норвегия. Диссертационное исследование проводилось в рамках научнотехнической программы Здоровье населения Европейского Севера и имеет номер государственной регистрации 4.