Цитопротекторное и цитотоксическое действие тромбина при повреждении клеток и воспалении

• Автор: Киселева, Екатерина Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 141 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Полифункциональность и структурные особенности молекулы

тромбина.

1. Полифункциональность тромбина

2. Структурные особенности тромбина.

Глава 2. Рецепторы тромбина.

1. Открытие тромбиновых рецепторов

2. Рецепторы, активируемые протсиназами особенности

структуры и функции

3. Активация рецепторов нсснецифичными протсазами
широкого спектра действия
Глава 3. Участие рецепторов, активируемых протсиназами,
в процессах воспаления.
Глава 4. Рецепторы, активируемые протсиназами, в мозге
1. Локализация в мозге.
2. Ингибиторы тромбина в мозге
3. Сериновые протсиназы в тканях мозга
4. Эффекты сериновых протеаз на нейроны и глиальные клетки
5. Ишемическое и токсическое повреждение мозга
6. Толерантность мозга, вызванная тромбином.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 5. Материалы и методы исследования
Глава 6. Исследование роли тромбина и рецепторов, активируемых
протсиназами, в процессах воспаления
1. Исследование влияния тромбина на секрецию медиаторов
перитонеальными тучными клетками
2. Исследование влияния пептидаагониста I на секрецию преформированных медиаторов перитонеальными тучными
клетками
3. Исследование влияния пептидаагониста 2 на секрецию преформированных медиаторов перитонеальными
тучными клетками
4. Исследование экспрессии рецепторов на линии тучных клеток
23.
5. Исследование влияния дссснситизации тромбиновых
рецепторов на секреторную активность тучных клеток
6. Фармакологический анализ процесса активации
перитонеальных тучных клеток крысы тромбином
7. Исследование зависимой активации перитонеальных тучных
клеток крыс с перитонитом.
Глава 7. Исследование экспрессии мРНК и влияния тромбина и
агонистов сто рецепторов на изменение 2 в перитонеальных
макрофагах крысы
Глава 8. Исследование влияния агониста рецептора I на процесс
репарации ткани в модели заживления резаной раны у мышей
Глава 9. Исследование нейротропных эффектов тромбина и других протеиназ
системы гемостаза.
1. Исследование влияния тромбина на уровень Са2 в
гиппокампальных нейронах.
2. Влияние тромбина на Са2сигнал, вызванный активацией
глутаматных рецепторов ЫМОА типа.
3. Влияние тромбина на выживаемость гиппокампальных
нейронов.
4. Влияние тромбина на выживаемость гиппокампальных нейронов в
условиях цитотоксичности, вызванной гемоглобином.
5. Исследование роли тромбина, фактора Ха свертывания крови и активированного протеина С на выживаемость нейронов в условиях
цитотоксичности, вызванной глутаматом
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Впервые получены данные о цитопротекторном действии низких доз тромбина и фактора Ха свертывания крови в условиях глутаматной цитотоксичности. Показано, что защитный эффект тромбина реализуется через рецептор I. Выявлено антиапоптотичсское действие активированного протеина С на гиппокампальные нейроны. Научнопрактическая значимость. Полученные в работе факты расширяют теоретические представления о роли тромбина вне системы гемостаза не только как провоспалитслыюго агента, но и регулятора, контролирующего токсические воздействия на клетку. Наши данные демонстрируют возможность межрецепторного взаимодействия и рецепторов глугамата. На основе синтетических аналогов агонистов и антагонистов рецепторов могут быть предложены новые эффективные средства для регуляции процессов воспаления и цитотоксичности. Иммобилизованный в биодеградабельные микрочастицы сополимера молочной и гликолевой кислот пептидагонист I может быть предложен для использования в медицине как новый препарат, ускоряющий заживление ран. Апппобация материалов диссертации. XVIII съезде физиологического общества им. И.П. Павлова , Казань, , Эрфурт, Германия, на юбилейной конференции, посвященной летию основания Всероссийской ассоциации по изучению тромбозов, геморрагий и патологии сосудов им. А.ШмидтаБ. Кудряшова , Москва, на III Всероссийской конференции Механизмы функционирования висцеральных систем, посвященная 5летию со дня рождения Ф. В.Овсянникова, , СанктПетербург, на Симпозиуме Дунайской лиги по борьбе с тромбозами и нарушениями гемостаза , СанктПетербург, XIX Съезде физиологического общества им. И.П. Павлова , Екатеринбург. Структура и объем диссертации. Диссертация состоит введения, обзора литературы, описания методов исследования, изложения результатов экспериментов, их обсуждения, выводов и списка литературы. Основной материал изложен на 1 страницах машинописного текста, содержит рисунков. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Глава 1. Полифункциональность и структурные особенности молекулы тромбина. Полифункциональность тромбина. Тромбин ключевой фермент системы свертывания крови. Он превращает фибриноген в фибрин основу тромба, и участвует в регуляции процессов, направленных на ускорение свертывания крови. При этом тромбин индуцирует адгезию клеток к поврежденной стенке сосуда, агрегацию тромбоцитов, активирует факторы V, VIII и XIII свертывания крови. Тромбин также регулирует процессы, направленные на торможение свертывания стимулирует высвобождение из сосудистого эндотелия простациклина мощного ингибитора агрегации тромбоцитов, в комплексе с тромбомодулином эндотелия активирует протеин С, который проявляет антикоагулянтные свойства, ингибируя факторы V и Vi и повышает фибринолитическую активность крови. Тромбин также регулирует фибринолиз, стимулируя продукцию клетками эндотелия активатора плазминогена и его ингибитора, а также активируемого тромбином ингибитора фибринолиза I Дугина и др. Тромбин стимулирует клетки, учавствующие в процессах воспаления и репарации тканей, в том числе моноциты, Тлимфоциты, клетки эндотелия, фибробласты, гладкомышечные и глиальные клетки. Тромбин стимулирует синтез и экспонирование на поверхности клеток эндотелия адгезивных белков, активаторов и ингибиторов фибринолиза, стимуляторов и ингибиторов адгезии и агрегации клеток крови Струкова и др. , i, . Действие тромбина на тонус сосудов проявляется в его способности освобождать из эндотелия оксид азота и простациклин , тем самым стимулируя вазодилатацию, или эндотелин1, а из тромбоцитов тромбоксан Аг, вызывая вазоконстрикцию , , . Взаимодействуя со всеми звеньями гемостаза белками, клетками крови и стенки сосудов, тромбин выступает как регулятор динамического баланса про и антикоагулянтных свойств крови и сосудистой стенки, проявляя свои протеолитическис и гормоноподобные функции. В этом отношении тромбин отличается от трипсина, химотрипсина и других протеиназ системы ссриновых гидролаз пищеварительного тракта.