Изучение MAXI-K+-каналов и потенциал-управляемых K+-каналов семейств Kv1, Kv2 в гладкомышечных клетках мелких артерий

• Автор: Лысенко, Наталья Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СОКРАЩЕНИЯ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Физиологическая роль калиевых каналов гладких мышц артерий

1.2. Типы Кканалов

1.2.1. Куканалы

1.2.2. КСаканалы

1.2.3. Кпгканалы

1.2.4. КАТРканалы

1.3. Потенциалуправляемые Кканалы семейств v, v2

1.3.1. Молекулярная организация Ку1, Ку2 Кканалов
1.3.2. Физиология Ку1, Ку2 Кканалов
1.3.3. Фармакология i, v2 Кканалов
1.4. МахГКканалы
1.4.1. Молекулярная организация шах1Кканалов
1.4.2. Физиология тахьКканалов
1.4.3 Фармакология xiканалов
г ГЛАВА II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Объект исследований
2.2. Растворы
2.3. Методы получения препаратов артерий
2.3.1. Получение изолированной хвостовой артерии крысы
2.3.2. Метод получения препарата .i i
2.4. Методы получения изолированных гладкомышечных клеток артерий
2.4.1. Метод получения изолнровашых гладкомышечных клеток большой хвостовой артерии
2.4.2. Метод получения изолированных гладкомышечных клеток из
.i i
2.5. Регистрация электрофизиологических свойств свежеизолированных гладкомышечных клеток
2.6. Изучение локализации ионных каналов в стенках
.i i
2.7. Метод растяжения гладкомышечных клеток
2.8. Реактивы
2.9. Анализ данных
ГЛАВА III РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Изучение вклада тахКканалов в механизм механоэлектрической обратной связи в сосудах
3.1.1. Изучение механосенситивности изолированных клеток
3.1.2. Изучение эффекта ВТХ на шахКканаль
3.2. Результаты изучения локализации ионных каналов в стенках .i i
3.2.1. Изучение локализации ионных каналов семейств Ку1, Ку2 в стенках
.i i
3.3. Характеристика выходящего Ктока
3.4. Характеристика эффекта 4аминопиридина на v
3.5. Характеристика эффекта i на Ку1ток
3.6. Характеристика эффекта xi1 на Ку2ток
3.7. Характеристика эффекта ixiЗ и xi на потенциалуправляемый Кток
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Анализ литературных данных показал, что известно наличие экспрессии отдельных подсемейств потенциалуправляемых Кканалов в мелких мозговых сосудах 3, , , и определены селективные ингибиторы для некоторых подсемейств этих Кканалов. Роль потенциалуправляемых Кканалов семейства Ку1 и Ку2 в работе мелких мозговых артерий изучена недостаточно 3. В связи с этим необходимо изучить влияние специфических блокаторов на Кток, для более полного описания эффекта исследуемых ингибиторов. Исходя из изложенного, целью настоящей работы явилось изучение тахКканалов и потенциалуправляемых Кканапов семейств Ку1, Ку2 в Кток гладкомышечных клеток мелких артерий. Изучение реакции гладкомышечных клеток на растяжение и исследование механизма этого явления. Изучение влияния аксиального растяжения клетки на проводимость тах1Кканалов. Изучение локализации ионных Кканалов в мембране гладкомышечных клеток. Изучение биофизических свойств выходящего Ктока в изолированных гладкомышечных клетках. Изучение эффекта 4аминопиридина на выходящий Кток в свежеизолированных гладкомышечных клетках. Изучение влияния i и i на выходящий Кток в свежеизолированных гладкомышечных клетках. Изучение влияния xi1 на выходящий Кток в свежеизолированных гладкомышечных клетках. Изучение влияния ixiЗ и xi на выходящий Кток в свежеизолированных гладкомышечных клетках. Диссертационная работа построена по стандартному принципу и состоит из разделов обзор литературы, материалы и методы, результаты и обсуждение, выводы, построенные на базе полученного материала. Работу завершает список цитируемой литературы. В главе Обзор литературы, в соответствие с поставленной целью, изложено описание Кканалов, исследуемых в работе. Представлена классификация калиевых каналов, дана их краткая характеристика. Описана молекулярная структура тахКканалов и потенциалуправляемых Кканалов. Описана физиологическая роль калиевых каналов в регуляции тонуса мелких артерий. Показан эффект используемых в экспериментальной работе действующих веществ на характеристики Ктока изолированных гладкомышечных клеток. В главе, посвященной Материалам и методам, охарактеризован объект исследований. Описана методика получения препаратов артерий из мозга и хвоста крысы, методика получения препарата изолированных гладкомышечных клеток из фрагментов артерий. Представлено описание метода , необходимого для регистрации токов в мембране изолированных гладкомышечных клеток. Представлены составы физиологических растворов и соединения, используемые для экспериментальной работы. В главе Результаты и обсуждение представлены полученные данные о растяжении изолированных гладкомышечных клеток мелких артерий, наличие тахьКканалов, ингибируемых селективным блокатором ибериотоксином. С помощью иммуногистохимического методы показано наличие прокрашивания мембраны гладкомышечных клеток артерий антителами против Ку1. Ку1. v. v1. v1. v1. v2. В изолированных гладкомышечных клетках . Кканалов, выявлено наличие каналов, принадлежащих к семейству Ку1. Проиллюстрирован эффект специфических блокаторов Ку1. Ку1. i и i С. Продемонстрирован, впервые исследованный, эффект на К ток в специфического блокатора v2. v2. xi1 изолированных гладкомышечных клетках . Показано влияние специфических ингибиторов подсемейств V1 каналов ixiЗ и xi1 на изменения Ктока. Работу завершают выводы, вытекающие из обобщения результатов экспериментов. Работа выполнена на 2 животных, содержит рисунков, 2 таблицы. В заключении представлен список литературы из 1 источника. Мембранный потенциал гладкомышечных клеток артерий, регулируемый потенциалуправляемыми Кканалами, является важным регулятором тонуса артерий и, следовательно, их диаметра 8. Аюшвация Кканалов в мембране клеток гладких мышц артерий увеличивает выход К, являясь причиной гиперполяризации мембраны, что приводит к инактивации потенциалзависимых Са2каналов, уменьшает вход Са2 и приводит к вазодилятации. Инактивация Кканалов лежит в основе вазоконстрикции.