Протонный и натриевый насосы в плазматической мембране галотолерантной водоросли Dunaliella Maritima Massjuk

• Автор: Шумкова, Галина Александровна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 104 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Ионный гомеостаз цитоплазмы как необходимое

условие существования организма

1.2. Активный гран с порт натрия через плазмалемму растительной клетки

1.2.1. I ротонная АТФаза плазмалеммы растительной клетки.

1.2.2. 7 антипортер плазмалеммы.

1.2.3. транспортирующие АТФазы в плазматической мембране живых организмов

1.2.4. Ыатранспортирующая АТФаза в плазматической

мембране галотолерантных микроводорослей.

1.3. i уникальный объект для изучения механизмов
ионного гомеостатирования и солеустойчивости.
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
2.1. Объект исследования и условия культивирования
2.2. Методы, используемые в исследованиях i viv.
2.3. олучение фракции плазматической мембраны.
2.4. Регистрация АТФзависимой генерации АрН и i на везикулах плазмалеммы
2.5. Регистрация поглощения везикулами плазматической мембраны.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Оценка возможности вовлечения антипортера в экспорт натрия из клеток .ii
3.2. Исследование транспортирующих механизмов плазмалеммы
.ii i viv
3.2.1. Молельные системы для изучения транспорта ионов на интактных клетках.
3.2.2. Влияние наружной среды и протонофора КЦФГ
на трансмембранный перенос ионов и К.
3.2.3. Эффект внезапного закисления наружной среды
3.2.4. Замена ионов К ионами в индуцировании потоков через плазматическую мембрану.
3.2.5. Эффект ДЦКД
3.2.6. Эффект амил ори да.
3.3. Исследование ионтранспортирующих механизмов
плазматической мембраны .ii i vi с использованием мембранных везикул.
3.3.1. НАТФаза и 7 антипортер в плазматической мембране
1.ii.
3.3.2. Исследование электрогенеза на везикулах плазмалеммы .ii
3.3.3. Исследование транспорта натрия с помощью на
выделенных везикулах плазматической мембраны
.ii
3.3.4. Некоторые кинетические характеристики транспортирующей АТФазы плазматической мембраны
.ii
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


НМ, белковых препаратах, протеолипосомах , , , , . В последнее десятилетие этот фермент исследуется с использованием молекулярнобиологических подходов. Известна аминокисл очная последовательность НАТФазы, выделены гены фермента . . , , . Подавляющее большинство работ, посвященных НАТФазе ПМ, выполнено на высших растениях. Основные функции этого фермента состоят в электрогенезе плазматической мембраны и рНстатировании цитоплазмы. Генерируемые НАТФазой разность электрического потенциала и АрН служат движущей силой переноса через плазмалемму ряда веществ , , . В отличие от НгА ГФазы, транспортирующие АТФазы в эукариотах растительного происхождения обнаружены лишь в самое последнее время i . . , , прокариотических организмах , , ii, , , а также дрожжах . Сравнительно недавно ЫаАТФаза была найдена в ПМ галотолерантных водорослей i viii i, v, и i i . а. v . Вместе с тем, эти ферменты различаются по ряду параметров, в частности, по молекулярной массе и некоторым функциональным характеристикам. АГФаза ПМ . ,ЛТФазс животных клеток . ПМ 1 . в обмен на Н Пагис и др. Исключая вышеприведенные работы, сведения о гранспортирующих АТФазах в плазматической мембране организмов растительного происхождения отсутствуют. i. Представители этого рода относятся к экстремальным галотолерантным организмам, и наличие мощной помпы давно предполагалось в М этого объекта , i, i . Однако попытки выделить функционально активную плазмалемму клеток i и идентифицировать помну, а также другие ионтранснортирующие системы, оказались несостоятельными i . , , Драпп, i . В целом, следует отметить, что механизмы транспорта ионов у алотолерантных водорослей, и особенно Патранспортирующие механизмы, изучены слабо. 1, а также I. ГМ. Исследовать транспорт на интактных клетках . Выделить мембранную фракцию, обогащенную везикулами ПМ . С использованием мембранных препаратов идентифицировать ранспортирующую АТФазу и Нтранспортирующую АТФазу в ИМ . Исследовать функции транспортных АТФаз плазмалеммы, а также их роль в элсктрогенезе этой мембраны. Функционально идентифицировать V антипортер ГУМ. Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Ионный гомеостаз цитоплазмы как необходимое условие существования организма. Биологические мембраны представляют собой высокоизбирательные барьеры проницаемости. Моток молекул и ионов между клетками и окружающей средой строго регулируется. Наряду с регуляцией пассивного транспорта осуществляется также трансмембранный перенос веществ против термодинамического градиента. Другими словами, транспорт, происходящий с затратой метаболической энергии, также вовлечен в гомеостатирование цитоплазмы. Благодаря этому цитоплазматические концентрации ионов и поддерживаются в узком диапазоне необходимых значений. Это создает благоприятную среду для функционирования клеточных биополимеров при широкой вариабельности внешних условий. Для наземных галофитов и морских одноклеточных микроводорослей, к которым относится i ii, важное значение имеет регуляция цитоплазматических концентраций 1. В ряде исследований Балнокин и Медведев, , , Алешина и Балнокин, показано, что биополимеры цитоплазмы галотолерантных водорослей, как и биополимеры цитоплазмы растенийгликофитов, обладаю . Активность митохондриальных ферментов и функция хлоропластов i vi подавлялись одинаково низкими концентрациями , независимо от того, были ли эти органеллы выделены из галотолерантных водорослей или неустойчивого к соли растения vi. В то же время i viv различающиеся по солеустойчивости организмы проявляли специфическое отношение к соли. Экстремально газотолерантный организм .