Влияние салициловой кислоты на некоторые морфофизиологические показатели и белковый состав каллусов гречихи татарской

• Автор: Галеева, Екатерина Инсафовна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 116 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Каллусные культуры. Дедифференциация клеток

1.2. Гетерогенность каллусных культур.

1.3. Дифференциация клеток.

1.4. Белки как маркеры морфогенетических процессов.

1.5. Факторы, определяющие морфогенез i vi .

1.6. Содержание и метаболизм СК в растениях.

1.7. СК как участник сигнальных систем.

1.7.1. Активные формы кислорода

1.7.2. Участие СК в реакции сверхчувствительности и апоптозе.
1.7.3. Роль СК как вторичного мессенджера
1.7.4. Индукция защитных белков
1.7.5. СК и дыхание
1.8. Некоторые другие физиологические эффекты СК.
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследований
2.2. Методы исследований.
2.2.1. Получение каллусных культур.
2.2.2. Условия культивирования.
2.2.3. Определение прироста биомассы.
2.2.4. Приготовление препаратов для цитогенетического анализа
2.2.5. Определение митотической активности и количества хромосомных аберраций.
2.2.6. Определение содержания перекиси водорода
2.2.7. Выделение белков
2.2.8. Электрофоретическое разделение белков.
2.2.9. Другие измерения
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Инициация каллусов гречихи на средах с агаром и фитогелем
3.2. Изменение содержания растворимых белков в каллусах гречихи
в течение пассажа
3.3. Полипептидиый состав каллусов гречихи с различным
морфогенным потенциалом
3.4. Полнпептидный состав эксплантов
3.5. Влияние СК на ростовые процессы каллусов гречихи.
3.6. Действие СК на содержание и полипептидиый спектр растворимых
белков каллусов гречихи
3.7. Влияние СК на ростовые процессы каллусов гречихи в первые дни
культивирования
3.8. Влияние СК на содержание перекиси водорода
в каллусах гречихи.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Через 6 ч после индукции дедифференциации разрыхляется клеточная стенка, увеличивается число свободных полисом, возрастает число элементов аппарата Гольджи и ЭПР, увеличивается размер и число ядрышек и начинается экспрессия генов белков, присущих каллусным клеткам Бутенко, Муромцев и др. На примере сердцевинной паренхимы табака показано, что с началом делений в клетках появлялись одни белки, не характерные для исходной ткани, в то время как другие белки, наоборот, исчезали. Примечательно, что один из новобразованных белков оказался идентичным белку, обнаруженному в меристеме целого растения табака, что, вероятно, свидетельствует о дерепрессии структурного гена Бутенко, Володарский, . В каллусе, полученном из листовых эксплантов сахарного тростника, отмечено образование белков, ранее не присутствовавших в экспланте, в то время как синтез белков прекращался , . При культивировании i vi каллусные клетки, как правило, сохраняют ряд характерных свойств вида, а также некоторые свойства органа и ткани, из которых они произошли Бутенко, Мишарин и др. Однако существование вне организма, отсутствие координирующих связей, характерных для растения, а также условия культивирования сказываются на морфологии, физиологии, биохимии и генетике клеток в культуре. Возникающая неоднородность клеток определяет гетерогенность каллусных культур. Сложность структурной организации является характерным признаком каллусных культур, представленных различными типами клеток. Обычно в каллусах выделяют меристему и паренхиму, соотношение между которыми может меняться в процессе культивирования, что было показано на культурах женьшеня Данилина и др. Часто в культурах выделяют еще запасающую ткань, представляющую собой скопление клеток, заполненных крахмальными гранулами и жировыми включениями, а также трахеидные элементы Бутенко, . В культуре Vii по морфологическим признакам было выделено несколько типов клеток Фролова, . Наблюдаемое разнообразие исследователь рассматривала как результат перехода каллусных клеток от одного дифференцированного состояния клетки меристематического типа с основной функцией деления к другому типу дифференциации клетки паренхимного типа, запасающие питательные вещества. Растительные клетки в культуре подвергается значительным генетическим изменениям на самых различных уровнях. Данное явление получило название сомаклональной изменчивости. Наиболее часто в культурах i vi наблюдаются мутации геномного уровня полиплоидия и анэуплоидия. При длительном культивировании в клетках чаще всего происходит полиплоидизация, анэуплоидия встречается гораздо реже. Например, в культурах Vii Фролова, Шамина, , i Внучкова, , i i Кунах, и многих других выявлена полиплоидия. Юрковой и сотрудниками при анализе длительно культивируемых более одного года каллусов твердой и мягкой пшеницы был обнаружен высокий уровень анэуплоидии до ,4 клеток. Повышение числа анэуплоидных и полиплоидных клеток при увеличении продолжительности культивирования было выявлено в каллусной культуре кукурузы , , и ячменя i, . В результате клеточной селекции в длительно пассируемых культурах образуется относительно стабильная по признаку плоидности клеточная популяция, причем наиболее приспособленные к условиям культивирования клетки образуют модальный класс плоидности, которых в одной культуре может быть несколько Шамина, Кунах, . В культурах наблюдается повышенное число хромосомных аберраций. Обнаружено, что каллусы, полученные из проростков кукурузы, имели много хромосомных аномалий, таких как разрывы или слипание хромосом, асинхронность деления, отставание хромосом . В каллусе мягкой пшеницы также были обнаружены такие структурные изменения хромосом как делеции и транслокации , , . Сомаклональная изменчивость в культурах i vi может затрагивать также и генный уровень, проявляющийся, например, в модификации ДНК метилирование и изменении активности генов iv . , , .