Изучение механизма эндоцитоза у растительных клеток и на модельных системах

• Автор: Ковтун, Галина Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 211 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение и постановка задан исследования .

Обзор литературы

Глава I. МЕХАНИЗШ МАКРО И МИКР0ЭНД0ЦИТА У ЖИВОТНЫХ КЛЕТОК .

История открытия и расцространения эндоцитоза Типы эндоцитоза и его основные фазы

Факторы, влияющие на первую стадию эндоцитоза

Индукторы эндоцитоза

Факторы, влияющие на адсорбцию индукторов на плазматической мембране во время эндоцитоза .

Участие сократительных белков в эндоцитозе . .

Участие сократительных белков в перераспределении рецепторов на поверхности мембраны

Участие сократительных белков в образовании

инвагинаций и вакуолей.
Влияние ионов кальция на эндоцитоз
Зависимость макроэндоцитоза от энергии зз
Микроэндоцитоз .
Дальнейшая судьба плазматической мембраны, поглощенной эндоцитозом.
Глава 2. ПРОБЛЕМА ЭНДОЦИТОЗА У РАСТЕНИЙ
Попытка регистрации эндоцитоза у растительных
объектов
Вероятные механизмы эндоцитоза, наблюдаемого у
корневых клеток.
Поглощение ионов .
Поглощение макромолекул.
Дальнейшая метаболизация материала, поглощенного растительными клетками, в том числе пиноци
Глава 3. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ
Замечания к методической части работы
Растительные объекты и методы их исследования . .
Объекты
Методы электронной микроскопии корневых
клеток редиса
Техника модельных экспериментов объекты, их
получение и методы исследования
Липиды.
Липосомы.
Протеиноидные микросферы . .
Световая микроскопия липосом и протеиноид
ных микросфер .
Измерение и расчет радиоактивности испытуемых соединений
Инфракрасная спектроскопия липидов .
Ультрафиолетовая спектроскопия липидов Статистическая обработка экспериментальных
Результаты
Глава 4. Изучение эндоцитоза у растительных клеток . Ультраструктурные доказательства эццоцитозного типа поглощения веществ у растительных клеток . . Локализация маркера уранилацетата в корневых клетках редиса.
Количественный учет эццоцитозных структур
Диагностика эндоцитоза с помощью микроденситометрии
мембран.
Ультраструктура растительных клеток, находящихся в
состоянии индуцированного эццоцитоза .
Эндоцитозная и секреторная активность клеток различных зон корня.
Влияние 2,4динитрофенола иумеркаптоэтанола на поглощение солей уранила клетками корня редиса .
Влияние на эвдоцитоз уранила 2,4динитрофенола . Воздействие на эндоцитозное поглощение уранилацетата
меркаптоэтанола
Обсуждение
Доказательства эндоцитоза у растительных клеток . . . 0 Изучение отдельных сторон механизма эндоцитоза у растительных клеток
Участие метаболической энергии и роль неметаболических
процессов в эндоцитозе у растений .
Механизм инвагинирования и везикуляции мембраны на стадиях эццоцитоза, не зависимых от метаболической энергии, у растений
Глава 5. ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМА ЭНЕРГОНЕЗАВИСИМОГО ЭЦЦОЦИТОЗА
НА МОДЕЛЬНЫХ СИСТЕМАХ
Липосомы
Влияние амфотерных и анионных соединений
на поведение липосом .
Влияние положительно заряженных соединений
Лантан, калий и натрий
Металлы переменной валентности
Воздействие радиоактивных соединений на липосомы . . 5 Влияние липооксиданта хлорида железа на липосомы из некоторых индивидуальных липидов .
Влияние метаболических ингибиторов на эндо
цитозоподобную реакцию липосом .
Влияние липооксиданта и индуктора эндоцитоза уранилацетата на химическое строение липидов липосом
Протеиноидные микросферы
Влияние некоторых иццукторов эццоцитоза липооксидантов на морфологию протеиноидных
микросфер
Обсуждение.
Липосомы модель для изучения эндоцитоза
Схема молекулярных перестроек в липидной бислойной мембране, индуцирующих ее инвагинирование
Выводы.
Глава 6. ОБЩЕЕ ОБСУЖДЕНИЕ
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА


В главах Результаты и Обсуждение термином энергозависимый эндоцитоз или эндоцитоз, не зависимый от метаболической энергии, мы называем не отдельный тип эццоцитоза, как принято в классификации эндоцитоза у животных объектов, а лишь те стадии эццоцитоза, когда инвагинирование и везикуляция мембраны может происходить без участия энергии метаболизма. Энергозависимый эндоцитоз эндоцитоз, зависимый от метаболической энергии клетки. В клетках животных это макроэндоцитоз. Жидкофазный несорбционный эндоцитоз процесс, при котором иццуктор сорбируется слабо, и концентрация поглощаемого индуктора в эндосоме примерно равна его концентрации в окружающем растворе. Адсорбционный эццоцитоэ. В данном случае адсорбция индуктора ярко выражена. Концентрация иццуктора, поглощаемого эндоцитозом, в несколько сот раз выше, чем в свободной форме. Адсорбционноконцентрационный или рецепторсвязанный эццоцитоз процесс связывания индукторов с высоко специфичными рецепторами с последующей их кластеризацией и локализацией в окаймленных инвагинациях. Такая классификация эццоцитоза отражает характеристику отдельных его сторон. Таким образом, один и тот же тип эццоцитоза может быть охарактеризован одновременно несколькими терминами. Например, макроэндоцитоз может быть энергозависимым и адсорбционным. Большинство исследователей делят эццоцитоз на фагоцитоз, макропиноцитоз и микропиноцитоз. Считается, что принципиальных
различий между фагоцитозом и макропиноцитозом нет. Эти два способа поглощения, в отличие от микропиноцитоза, протекают с участием сократительных структур и затратами метаболической энергии. Альтернативой этому общепринятому мнению является выдвинутое недавно предположение о преобладающем участии в фагоцитозе частиц сил адгезии Берестовский, . Однако, этот тезис нуждается в экспериментальной проверке. Сам процесс эндоцитоза. Индукторы эндоцитоза. Прежде всего, процесс адсорбции зависит от свойств самих молекулиндукторов. Поэтому сначала рассмотрим их природу. Наиболее подробно вопросы индукции эндоцитоза изучались у амеб ЧепменАндресен ,I7 а,б. Было выявлено, что вызывать эндоцитоз могут те вещества, которыенезависимо от своего химического состава, способны достаточно прочно связываться с мунозным слоем мембраны, а так как этот слой и сама мембрана заряжены отрицательно, то агентыиндукторы, соответственно, должны обладать положительным зарядом. Действительно, хорошими индукторами эндоцитоза являются коллоидные растворы тяжелых металлов тория, железа, золота, серебра, лантана, и др. Саляева, Романенко, . Фосфолипиды могут взаимодействовать с карбоксилами и фосфа
тами глвкокаликса мембраны благодаря своим положительно заряженным аминогруппам, холиновым остаткам. Твердые частицы, несущие на себе фиксированный положительный заряд, также способны адсорбироваться на поверхности клеток и фагоцитироваться. Это могут быть частицы индийских чернил, окиси плутония, туши, кварца, саки, кармина и др. Саляев, Романенко, . Однако, индукторы могут связываться с мембраной не только за счет электростатического, но и гидрофобного взаимодействия i, vi, . Так, эндоцитоз фагоцитоз у амеб и полиморфноядерных лейкоцитов индуцируется водонерастворимыми полистироловыми частицами латексами, жирными кислотами, природными и искусственными фосфолипидами в виде суспензий липосом. В последнем случае наблюдается не только эндоцитоз, но и слияние липосомных везикул с плазмомембраной клеток i, , . I9. Индукторы эндоцитоза обнаружены и среди биологически активных соединений см. Саляева, Романенко, , , ii, . Индуцируют ЭНДОЦИТОЗ И лектины iIi, . Как видно, большинство индукторов эндоцитоза представляют собой либо истинные растворы низкомолекулярных веществ, либо коллоидные растворы белков, других органических полимеров, а также металлов. Эндоцитироваться могут также и некоторые простейшие и их цисты . У клеток иммунного аппарата организма усиление эндоцитоза вызывают различные антигены, к которым, в частности, относятся патогенные и непатогенные бактерии, плазмодиипаразиты, вирусы, поврежденные и целые чужеродные эритроциты или эритроциты, принадлежащие тому же организму.