Биологическое обоснование использования энтомопатогенных гифомицетов для подавления численности вредных саранчовых

• Автор: Левченко, Максим Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Санкт-Петербург, Пушкин
• Количество страниц: 148 с. : ил.

Содержание
Введение.

Энтомопатогенные гифомицеты возбудители микозов саранчовых

Обзор литературы.

Видовой состав возбудителей и распространенность.

Жизненный цикл.

Факторы патогенности микромицетов

Ферментативная активность

Токсины

Культивирование

Препаративные формы

Применение энтомопатогенных гифомицетов для подавления численности саранчовых.
Место, материалы и методы исследований.
Место проведения исследований
Объекты исследований
Патогены.
Тестнасекомые.
Методика исследований
Культивирование грибов, микроспоридий и бактерий.
Изучение продуктивности при поверхностном и глубинном культивировании
Определение скорости прорастания конидий в капле воды
Определение жизнеспособности конидий.
Определение токсигенности энтомопатогенных грибов
Разведение и сбор тестнасекомых.
Лабораторная оценка биологической активности.
Оценка биологической активности в полевых условиях.
Обработка полученных данных
Влияние биологических свойств энтомопатогенных гифомицетов на их
вирулентность в отношении саранчовых.
Изоляция и первичный скрининг штаммов микромицетов по признаку
вирулентности к саранчовым.
Оценка биологической активности изучаемых штаммов на насекомых
из других систематических групп
Морфокультуральные свойства изучаемых штаммов мюскардиновых
грибов.
Продуктивность грибов при поверхностном и глубинном культивировании
Динамика прорастания конидий.
3.4. Влияние пассирования на биологическую активность гриба
М.апзорае.
3.5. Влияние сублетальных доз гриба М. апзорае на его активность
3.6. Оценка инсектицидной активности экзотоксинов гриба М апзорае.
3.7. Зависимость смертности личинок перелетной саранчи от концентрации
инокулюма
4. Влияние популяции хозяина на биологическую активность энтомопа
тогенных грибов
Ф 4.1. Чувствительность различных видов саранчовых к гифомицетам
4.2. Восприимчивость стадной и нестадной фаз перелетной саранчи к эн
томопатогенным грибам.
4.3. Влияние пола хозяина на биологическую активность мюскардиновых
грибов
4.4. Возрастная чувствительность личинок перелетной саранчи к микозу
5. Активность смешенных инфекций в отношении личинок перелетной
саранчи.
5.1. Микроспоридиальногрибная инфекция.
5.2. Бактериальногрибная инфекция
6. Оценка биологической эффективности знтомопатоенньх грибов в отношении перелетной саранчи в полевых условиях
Выводы
Практические рекомендации.
Заключение.
Список литературы


Инфицирование насекомых грибами можно условно разделить на следующие этапы 1 адгезия 2 развитие гриба на поверхности кутикулы 3 проникновение и развитие гриба в кутикуле и 4 вторжение в полость тела и колонизация внутренних органов насекомого Борисов и др. Адгезия грибных конидий на кутикуле происходит за счет гидрофобных взаимодействий между липидными компонентами эпикутикулы и клеточной оболочки, а также за счет неровностей и выростов складки, щетинки, и др. Например, при поражении личинок комаров рода x энтомопатогенным грибом ii ii споры гриба фиксируются на гидрофобной поверхности сифона и затем инвазируют ткань последнего Гештовт, . Этому способствует гидрофобная поверхность спор . Последующие этапы заражения наиболее полно были изучены Р. Захарук , при заражении личинок щелкунов i ii, i i, i ii и С. ii ii. Типичная непроросшая конидия возбудителя имеет круглое, расположенное в центре, ядро. В начале или незадолго до прорастания ядро становится вытянутым и перемещается из центра споры к полюсу прорастания, где начинает делиться. Через некоторое время у одного из полюсов появляется ростковая трубка. Иногда она может появиться из середины споры, или может наблюдаться биполярное прорастание. Оставшееся в конидии ядро со временем разрушается , . Ростковая трубка внедряется вертикально в хитиновый покров насекомого и проникает в полость тела. Эта фаза развития гриба начинается через часов после разбухания спор и может продолжаться несколько дней. В месте соприкосновения с покровами ростковая трубка, разрастаясь, образует аппрессориальную клетку, которая отделяется от ростковой трубки септой. Закончив свое формирование, аппрессориалыгая клетка начинает делиться. Дочерние клетки отделяются от материнской септами. Аппрессориальные клетки покрыты слизеподобным веществом, которое и обеспечивает плотное сцепление этих структур с эпикутикулой. Аппрессории, развивающиеся из разных ростковых трубок, могут сформировать так называемую инфекционную подушку. Она обычно содержит от 2 до и более аппрессорий , , Борисов и др. Перед началом внедрения гриба в кутикулу наблюдается образование полостей в эпикутикуле под аппрессорием. В образовавшиеся полости переливается эндоплазма аппрессориальных клеток и образуется проникающая трубочка. Расширение поровых канальцев, исчезновение воскового слоя и отсутствие видимого механического повреждения эпикутикулы определено действием гидролитических ферментов гриба в процессе инфицирования. Кроме того, наличие многочисленных митохондрий и диктиосом в аппрессориальных клетках может предполагать высокий уровень метаболизма и экскреторной активности Гештовт, . После этого из проникающей платы начинают развиваться отростки, растущие латерально иили вниз. Тонкие латеральные гифы дают затем начало гифальным телам первого ГТ1 и второго ГТ2 порядка. Тип ГТ1 имеет неправильную форму, электронноплотную эндоплазму и тонкую клеточную стенку. Другой тип ГТ2 имеет более правильную форму, обычно она овальная или несколько вытянутая с менее плотной цитоплазмой и с более толстой клеточной стенкой, чем у га. Оба этих типа встречаются в виде слоев, наложенных друг на друга, цепочек или беспорядочно разбросаны среди ламелл прокутикулы. Образование гифальных тел происходит путем почкования или гифальных тел, или латеральных гиф. В результате ультраструктурного изучения было выявлено, что ГТ1 появляются раньше и даюг начало ГТ2. Первоначально развитие гриба происходит в верней части прокутикулы. В ламинизированной части прокутикулы развитие гриба происходит следующим образом ГТ2 продуцирует короткую вертикальную гифу, достигающую пространства между двумя смежными ламеллами и дающую начало новому ГТ2. В нижележащих слоях прокутикулы вертикальная гифа имеет тенденцию к удлинению и продуцированию нескольких гифальных тел Борисов и др. По данным световой микроскопии, в местах внедрения гриба в гиподерму наблюдается лизис клеток этой ткани. Проникшие за пределы этой ткани гифы увеличиваются в размере и начинают делиться.