Изменение активности детоксицирующих ферментов и антиоксидантного статуса личинок Galleria mellonella L. при микроспоридиозе

• Автор: Лозинская, Яна Леонидовна
• Шифр специальности: 03.00.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 129 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Особенности микроспоридиозов насекомых.

1.1.1. Жизненный цикл микроспоридий.

1.1.2. Взаимоотношения мнкросиоридий и насекомых на клеточном уровне

1.1.3. Взаимоотношения микроспоридий и насекомых на организменном уровне

1.1.4. Взаимоотношения мнкроспоридий и насекомых на популяционном уровне

1.1.5. Защитные реакции насекомых при ми крое пори диозе

1.2. Детоксицирующие ферменты в организме насекомых.

1.2.1. Микросоматьные монооксигеназы

1.2.2. Неспецифическне эстеразы насекомых.
1.2.3. Глутатнон8трапсферазы
1.2.4. Факторы, влияющие на активность детоксицирующих ферментов
1.2.5. Изменение активности детоксицирующих ферментов при патогенезе
1.3. Генерация активированных кислородных метаболитов у насекомых
1.3.1. Методы регистрации продукции АКМ.
1.4. Антиоксидантная система насекомых
1.4.1. Ферментативные антиоксиданты.
1.4.2. Неферментативные антиоксиданты.
1.5. Генерация АКМ и активность антиоксидантов у насекомых при
патогенезе.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Насекомые
2.2. Микроспоридии
2.3. Приборы и реактивы
2.4. Заражение насекомых микроспорщдаями.
2.5. Исследование зараженных тканей насекомых
2.6. Отбор гемолимфы и приготовление гомогенатов внутренних органов
2.7. Определение активности и спектра неспецифических эстераз, активности глутатионБтрансферазы.
2.8. Определение продукции активированных кислородных метаболитов
2.9. Определение активности супероксиддисмутазы и концентрации тиолсодержащих соединений
2 Определение белка
2 Статистическая обработка экспериментальных данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Мнкроспоридиоз личинок большой пчелиной огневки i вызываемый Vii i.
3.2. Влияние микроспоридиоза на спектр и активность неспецифнческнх эстераз
3.2.1. Изменение активности и спектра эстераз гемолимфы .
3.2.2. Изменение активности и спектра эстераз жирового тела
.
3.2.3. Изменение активности и спектра эстераз среднего кишечника личинок .
3.2.4. Типирование неспецифических эстераз.
3.3. Влияние микроспоридиоза на активность глутатионБтрансфераз
3.4. Генерация активированных кислородных метаболитов при
мнкроспорндиозс
3.4.1. Влияние микроспоридиоза на фенолоксидазную активность.
3.4.2. Влияние микроспоридиоза на восстановление нитросинсго
тетразолия в гемоцитах 7. теопеа.
3.4.3. Окисление СРН гемолимфой . теопеа при микроспоридиозе.
3.5. Активность антиоксидантов в тканях личинок О. теИопеИа при микроспоридиозе.
3.5.1. Влияние микроспоридиоза на активность супероксидцисмутазы
3.5.2. Изменение концентрации тиолсодержащнх соединений в
гемолимфе С. теИопеИа при микроспоридиозе.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ .
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Целью настоящей работы явилось изучение влияния микроспоридиоза на функционирование детоксицирующих ферментов и изменение антиоксидантного статуса личинок i . Провести экспериментальное заражение личинок . V. i и выяснить особенности течения микроспоридиоза. Исследовать влияние микроспоридиоза на изменение спектра и активности неспецифических эстераз, активности глутатионтрансфераз. Изучить влияние микроспоридиоза на генерацию активированных кислородных метаболитов у насекомых. Изучить влияние микроспориднй на активность ферментативных и неферментативных антиоксидантов. Научная новизна. Впервые получены данные о влиянии микроспоридии Vii i на спектр и активность неспецифических эстераз, глутатионЯтрансфераз в различных тканях . Впервые изучено изменение активности ферментативных и неферментативных антиоксидантов у насекомых при микроспоридиозе. Установлено, что микроспоридиоз является одним из существенных факторов, влияющих на антиоксидантную систему, а также на спектр и активность детоксицирующих ферментов. Практическая значимость. Результаты, полученные в ходе исследований, могут использоваться при разработке критериев оценки состояния организма насекомого, что может послужить основой для проведения мониторинга природных популяций и разработки интегрированных методов защиты растений. Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на Всероссийской конференции Беспозвоночные животные Южного Зауралья и сопредельных территории Курган, март , на конференции Паразиты в природных комплексах и рисковые ситуации Новосибирск, июнь , на VI Европейском энтомологическом конгрессе Чехия, август , на Международном симпозиуме Сохранение и защита горных лесов От, октябрь , на XII съезде Русского Энтомологического общества СанктПетербург, ав1уст , на VII Европейском энтомологическом конгрессе Греция, октябрь , на отчетных сессиях ИСиЭЖ СО РАН апрель, , , на заседаниях микробиологического общества апрель, , . Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, 2 работы находятся в печати. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 9 страницах машинописного текста состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована рисунками и 2 таблицами. Список литературы включает 7 работ, из них 4 на иностранных языках. Благодарности. Автор выражает глубокую благодарность к. .В. Глупову за мудрое руководство научной работой, к. И.А. Слепневой ИХКиГ СО РАН, Новосибирск за помощь в выполнении исследований, связанных с ЭПРспектроскописй, к. Ю.Я. Соколовой ВНИИЗР, С. Петербург и Ю. С. Токареву СПбГАУ за помощь в проведении гистопатологических исследований, д. М.П. Мошкину и к. .А. Бахвалову ИСиЭЖ СО РАН за обсуждение рукописи и ценные критические замечания. ГЛАВА 1. Микроспоридии тип облигатных внутриклеточных паразитов животных. В настоящее время эти одноклеточные паразиты считаются древнейшими среди эукариот, филогенетически родственными грибам Карпов, i, . Мнкроспоридии не имеют митохондрий, типичного комплекса Гольджн, кинетосом, лизосом и гранул с запасными питательными веществами. Для них характерны рибосомы, обладающие прокариотными чертами строения. Размер генома этих паразитов наименьший среди известных для эукариот. В конце своего развития микроспоридии образуют одноклеточные споры со свойственным только этим организмам комплексом органелл аппаратом экструзии, предназначенным для прямого введения зародыша в клетку хозяина Соколова, Исси, . Этот признак послужил основанием для выделения микроспоридий в самостоятельный тип , . Наибольшее число видов микроспоридий паразитирует у членистоногих, главным образом, у насекомых и ракообразных. У некоторых насекомых выявлено по два, три и более видов микроспоридий Соколова, Исси, . Многие виды проявляют высокий уровень патогенности по отношению к хозяевам, что является обоснованием для их использования в биологическом контроле над численностью популяций насекомых Гробов и др. , , , x, .