Совершенствование лабораторной диагностики заболеваний, вызванных Haemophilus influenzae типа b, на основе иммуноферментного анализа

• Автор: Спирихина, Любовь Вячеславовна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 149 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение.

Обзор л итературы.

Глава 1. iинфекция как проблема для здравоохранения.

1.1. Микробиологическая характеристика i

i типа антигенная структура, факторы патогенности

1.2. Методы лабораторной диагностики заболеваний,

вызванных .i типа

1.3. Эпидемиология инвазивных форм ГЬинфекции

1.4. Состояние проблемы iинфекции в России на

современном этапе.

Собственные исследования.
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Материалы.
2.1.1. Штаммы i i,
использованные в работе
2.1.2. Антигенные препараты.
2.1.3. Кроличьи антнсывороткн.
2.1.4. Характеристика обследованных
контингентов.
2.2. Методы
2.2.1. Методы выделения и культивирования
штаммов .i.
2.2.2. Методы изучения штаммов
2.2.3. Методы выделения и изучения антженных
препаратов .i типа .
2.2.4. Схема получения антисывороток
2.2.5. Серологические и иммунохимические
методы исследования
2.2.6. Методы лабораторного обследования больных с заболеваниями органов дыхания
2.2.7. Статистические методы
Глава 3. Подбор штаммовпродуцентов и характеристика
антигенных препаратов НлпПиепгае типа Ь
3.1. Характеристика штаммов НЛпАиепгае.
3.2. Характеристика антигенных препаратов Ь.
Глава 4. Определение естественного уровня антител к
НлпАиешсае типа Ь среди здрового населения
Глава 5. Разработка иммуноферментных тестсистем для
диагностики заболеваний, вызванных НлпАиепгае типа Ь.
5.1. Параметры тестсистемы ИФА для выявления капсульного полисахаридного антигена НлпАиепгае
типа Ь
5.2. Параметры тестсистемы ИФА для определения
антител к НлпАиепгае типа Ь.
5.3. Критерии оценки положительного результата
в ИФА.
Глава 6. Клиническая апробация разработанных
тестсистем ИФА.
6.1. Определение диагностических параметров
тестсистем ИФА.
6.2. Результаты тестирования биологических субстра
тов больных с инфекциями органов дыхания на антиген НлпПиепгае типа Ь.
6.3. Уровень и динамика антиШЬ антител в сыворотках крови больных с заболеваниями
органов дыхания.
Обсуждение результатов.
Выводы.
Список использованной литературы


В тех странах, где проводились целенаправленные исследования по проблеме iинфекции, на национальном уровне были согласованы критерии определения случая iзаболевання, которые в зависимости от страны имели свои различия. i или выявление iаитигснов в биологических жидкостях больного . На территории России диагностика iинфекции на национальном уровне практически отсутствует, так как нет коммсррсских отечественных тестсистем ИФА, позволяющих подтвердить iэтиологию. Кроме этого, до настоящего времени не разработаны критерии определения случая iзаболевания. Учитывая международный опыт, работа по определению критериев случая iзаболевання потребует совершенствования лабораторных методов диагностики этой инфекции. ИФА в практике здравоохранения поможет более детально определить роль i как этиологического агента в структуре различных заболеваний, особенно не имеющих манифестных проявлении. Установление этиологии заболевания облегчает тактику врача в выборе этиотропнон терапии, что оказывает благоприятное влияние на исход болезни. Таким образом, социальноэкономическая значимость инфекции, вызванных . .i типа Ь. ИФА. Установлена диагностическая ценность иммуноферментного анализа для выявления капсульного антигена Н. Впервые определены оптимальные сроки проведения иммуно ферментного анализа и диагностическая информативность различных биологических субстратов кровь, моча, бронхиальный секрет при исследовании их на капсульный антиген . Впервые проведено ограниченное сероэпидемиологичсскос исследование по определению уровня антител к . Показано, что фоновый уровень антиi антител зависел от возраста и территории проживания обследованных контингентов. С помощью сэндвичварнанта иммуноферментного анализа можно выявлять капсульный антиген . При этом оптимальными сроками для выявления антигена с сыворотке крови являются первые 4 дня болезни, а в моче начиная с дня заболевания. .i типа в парных сыворотках крови с помощью иммуноферментного анализа. Разработанные иммуноферментные тестсистемы могут быть использованы как для подтверждения этиологии заболевания, так и для слежения за скрыто протекающим эпидемическим процессом гемофильнон инфекции в рамках эпидемиологического надзора за менингококковой инфекцией и гнойными бактериальными менингитами. Информационное письмо Минздрава РФ О профилактике гемофильной инфекции за 9 от . Приложение 3 Методические указания по микробиологической диагностике менингококковой инфекции и бактериальных менингитов к Приказу М3 РФ О мерах по усилению эпидемиологического надзора и профилактики менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов за 5 от . .i типа при гнойных бактериальных менингитах и респираторных заболеваниях переданы для утверждения в Минздрав РФ. Обзор литературы ГЛАВА 1. Микробиологическая характеристика . Ь антигенная структура, факторы патогенности. i i гсмофильная палочка относится к роду i, семейства . Она является 1рамотрицательной бактерией, которая характеризуется выраженным полиморфизмом при микроскопии имеет вид палочек с закругленными концами, круглую форму или нитеобразные формы с шаровидными вздутиями . Этот возбудитель принадлежит к группе мезофилов с температурой культивирования 3 8С, растет в атмосфере, содержащей 5 СОг , , 7, 6. При культивировании на плотных питательных средах требует присутствия факторов роста X протопорфирин составная часть гемоглобина и V никотинамидадениндинуклеотид, содержащегося в дрожжах и стафилококках. По росту на плотных питательных средах различают три формы колоний . форма капсульная, форма бескапсульная, Мформа является переходной, нестабильной. При этом форма колоний зависит от количества капсульного вещества синтезируемого клеткой, на которое в свою очередь влияют условия культивирования микроба . В зависимости от формы колоний . форма содержит 4 нг, форма нг и Мформа нг в пересчете на клетку .