Разработка питательных сред для индикации санитарно-показательных микроорганизмов

• Автор: Полосенко, Ольга Вадимовна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Оболенск
• Количество страниц: 141 с.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.2. МАТЕРИАЛЫ

2.3. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.4. МЕТОДЫ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТОВ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА 3. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

3.1 ОСНОВНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К КАЧЕСТВУ РАЗРАБА ТЫВАЕМЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД. ПРОТОТИПЫ И СУЩЕСТВУЮЩИЕ АНАЛОГИ
3.1.1. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ . I И КОЛИФОРМНЫХ БАКТЕРИЙ ПО ПРИЗНАКУ ФЕРМЕНТАЦИИ ЛАКТОЗЫ СРЕДА ЭЙКМАНА С ЛАКТОЗОЙ
3.1.2. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ Е. I И КОЛИФОРМНЫХ БАКТЕРИЙ ПО ПРИЗНАКУ ФЕРМЕНТАЦИИ ГЛЮКОЗЫ СРЕДА ЭЙКМАНА С ГЛЮКОЗОЙ
3.1.3. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ БАК ТЕРИЙ ГРУППЫ КИШЕЧНОЙ ПАЛОЧКИ СРЕДА КЕССЛЕРАГРМ

3.1.4. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И ИДЕН ТИФИКАЦИИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ БУЛБОН

3.1.5. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ ЖЕЛЕЗОГЛЮКОЗОЛАКТОЗНЫЙ АГАР
С МОЧЕВИНОЙ
3.1.6. ФЛЮОРОГЕННЫЙ СЕЛЕКТИВНЫЙ БУЛЬОН ФСБ
3.2. ВЫБОР БЕЛКОВОЙ ОСНОВЫ
3.3. ВЫБОР ШТАММОВ
3.3.1. ТЕСТШТАММЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ СРЕД ЭЙКМАНА С ЛАКТОЗОЙ И ГЛЮКОЗОЙ
3.3.2. ТЕСТШТАММЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ СРЕДЫ КЕССЛЕ РАГРМ
3.3.3. ТЕСТШТАММЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ЗОББУЛЬОНА
3.3.4. ТЕСТШТАММЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ЖЕЛЕЗО
ГЛЮКОЗОЛАКТОЗНОГО АГАРА С МОЧЕВИНОЙ
3.3.5. ТЕСТШТАММЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ФЛЮОРОГЕН НОГО СЕЛЕКТИВНОГО БУЛЬОНА ФСБ
3.4. ОПТИМИЗАЦИЯ КАЧЕСТВЕННОГО И КОЛИЧЕСТ ВЕННОГО СОСТАВА ПО СОВОКУПНОСТИ ФИЗИКОХИМИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ, ХАРАКТЕРНЫХ ДЛЯ АНАЛОГИЧНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
3.4.1 .СРЕДА ЭЙКМАНА С ЛАКТОЗОЙ ГЛЮКОЗОЙ
3.4.2. СРЕДА КЕССЛЕРАГРМ
3.4.3 БОББУЛЬОН
3.4.4. ЖЕЛЕЗОГЛКЖОЗОЛАКТОЗНЫЙ АГАР С МОЧЕ ВИНОЙ
3.4.5. ФЛЮОРОГЕННЫЙ СЕЛЕКТИВНЫЙ БУЛЬОН ФСБ
3.5.ИЗУЧЕНИЕ РОСТОВЫХ И ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИХ СВОЙСТВ РАЗРАБОТАННЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД НА РАСШИРЕННОМ НАБОРЕ МУЗЕЙНЫХ ТЕСТШТАММОВ
3.5.1. СРЕДА ЭЙКМАНА С ЛАКТОЗОЙ ГЛЮКОЗОЙ
3.5.2. СРЕДА КЕССЛЕРАГРМ .
3.5.3. БОББУЛЬОН
3.5.4. ЖЕЛЕЗОГЛЮКОЗОЛАКТОЗНЫЙ АГАР С МОЧЕ 6 ВИНОЙ
3.5.5. ФЛЮОРОГЕННЫЙ СЕЛЕКТИВНЫЙ БУЛЬОН ФСБ
3.6. ОБОСНОВАНИЕ СРОКОВ ГОДНОСТИ РАЗРАБАТЫ 1 ВАЕМЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
3.7. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЭКСПРЕСС АНАЛИЗАТОРА 8 БАК ТРАК ДЛЯ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА РАЗРАБАТЫВАЕМЫХ СРЕД ЭЙКМАНА С ЛАКТОЗОЙ И ГЛЮКОЗОЙ
3.8. ПРИМЕНЕНИЕ РАДИАЦИОННОГО МЕТОДА СТЕРИ 1 ЛИЗАЦИИ И ИНДИВИДУАЛЬНОЙ УПАКОВКИ ДЛЯ СРЕД ЭЙКМАНА С ЛАКТОЗОЙ И ГЛЮКОЗОЙ
3.9. ИСПЫТАНИЕ ОБРАЗЦОВ РАЗРАБОТАННЫХ ПИТА 2 ТЕЛЬНЫХ СРЕД В БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЯХ
ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ 1 з
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


Научноэкспериментальная разработка прописей бактериологических питательных сред, оценка качества и усовершенствование методов их применения для индикации возбудителей кишечных инфекций. Обоснование разработки составов питательных сред для дифференциации колибактерий по признакам ферментации глюкозы и лактозы, образования сероводорода, гидролиза мочевины. Оценка диагностической ценности новых питательных сред с препаратами сравнения в лабораторных условиях. Обоснование разработки состава флюорогенного селективного бульона ФСБ для определения колиформных бактерий и Е. И с использованием гидролизата желатина в качестве белковой основы. Определение алгоритма использования питательных сред Эйкмана с лактозой и глюкозой в одноразовой индивидуальной упаковке, простерилизованных уоблучением, для оценки наличия бактерий группы кишечной палочки в модельных исследованиях водных объектов. Определение возможности использования прибора Бак Трак для экспрессисследования показателей качества разработанных накопительных питательных сред. Изучение биологических свойств питательных сред на широком наборе музейных штаммов и клиническом материале для определения их диагностической ценности. Впервые на основе экспериментальных данных о характере роста возбудителей кишечных инфекций разработана промышленная технология производства усовершенствованных питательных сред Эйкмана с лактозой глюкозой, КесслераГРМ, бульона, железоглюкозолактозного агара с мочевиной с использованием отечественных белковых основ панкреатического гидролизата рыбной муки, пептонов, гидролизата желатина. Разработаны и экспериментально обоснованы требования к основным показателям качества питательных сред при их серийных выпусках, доказана их высокая диагностическая ценность, стандартизованы методы контроля и сформулированы требования к чувствительности, ингибирующим и дифференцирующим свойствам, определены области их применения в лабораторной практике. Впервые предложена современная методология контроля водоисточников с использованием сухих расфасованных, готовых к употреблению, стерильных сред Эйкмана для применения в полевых условиях. Для стерилизации сред Эйкмана адаптирован, метод радиационной стерилизации уоблучением с целью упрощения их использования. Разработана питательная среда нового поколения флюорогенный селективный бульон ФСБ. Получены новые данные о ее преимуществе по чувствительности, скорости роста, интенсивности свечения. Впервые обосновано использование железоглюкозолактозного агара с мочевиной для проведения первичной идентификации представителей родов ii и Vii по отношению к углеводам и мочевине. Разработаны и внедрены в производство в ФГУН ГНЦ ПМБ питательные среды Эйкмана с лактозой и глюкозой, среда КесслераГРМ, бульон, железоглюкозолактозный агар с мочевиной. Внедрение в производство и в практику здравоохранения разработанных и усовершенствованных стандартных сухих питательных сред для дифференциации энтеробактерий с по гг выпущено около тонн повысило стабильность микробиологических исследований, а также эффективность эпидемиологического мониторинга объектов внешней среды почвы, воды, пищевых продуктов и др. Предполагаемый промышленный выпуск и внедрение в практику здравоохранения флюорогенного бульона ФСБ существенно сократит время исследования по сравнению с классическим методом, обеспечивая высокую точность результатов в условиях чрезвычайных ситуаций и сложной эпидобстановки. Применение готовых расфасованных сред Эйкмана с лактозой глюкозой в одноразовой индивидуальной упаковке, простери лизованных уизлучением, позволяет получать быстрые и надежные результаты в стационарных и передвижных лабораториях. По результатам проведенных исследований разработаны методические рекомендации Обнаружение колиформных бактерий и . Эйкмана с лактозой. ВНЕДРЕНИЕ Разработаны, утверждены исогласованы ТУ, регламенты производства, инструкции по применению, а также зарегистрированы в установленном порядке и разрешены к применению питательные среды Эйкмана с лактозой глюкозой, КесслераГРМ, бульона регисграционные удостоверения ФСР 1, ФСР 9, ФСР 6, ФСР 5.