Определение влияния гидроксиламингидрохлорида на состав и свойства антигенов Shigella dysenteriae 1

• Автор: Захарова, Наталия Евгеньевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 121 с.

Оглавление

Список сокращений

Введение

Обзор литературы

Глава 1. Химические свойства и применение гидроксиламмна и его производных

Глава 2. Мсполыованнс солянокислого гнлроксиламина лля получения вакцинных препаратов

2.1. Гилрокенлампновые вакцины историческая справка

2.2. Особенности получения пироксиламниовых препаратов и их характеристика

Глава 3. Антигенные и иммуногенные свойства .9. йузепипае 1

3.1. Антигенный состав .9. йумепае 1

3.2. Иммунный ответ к 5. учеШегше 1

3.3. Вакцины против 5. ЦуьеШегше 1
Собственные исследования
Глава 4. Материалы и методы исследований
4.1. Штаммы 5. ЛузеШЫае 1
4.2. Условия культивирования штаммов уепепас I
4.3. Методы выделения бактериальных антигенов
4.4. Получение гипернммунных сывороток
4.5. Методы химического и физикохимического анализа
4.6. Методы иммунохимического анализа
4.7. Методы оценки биологических свойств препаратов
4.8. Методы статистической обработкн результатов исследования
Глава 5. Изучение влиянии гидроксиламингидрохлорнда на состав и свойства антигенных препаратов, полученных из целых микробных клеток
5. i.ii 1
5.1. Характеристика химического сосава гнлроксиламниовых препаратов, полученных из целых микробных клеток
5.2. Антигенный состав и Оспскнфическая актнвноегь шдрокенламнновых препаратов, полученных ит целых микробных клет ок
5.3. Фнтикохимнческая характеристика гндрокенламнновых препаратов. по.зученных ит ттелых микробных клеток
5.4. Характеристика токсических и протектнвных свойств гндрокенламнновых препаратов, выделенных из целых микробных клеток
Глава 6. Изучение влияния птдроксмламныгнлрохлорида на свойства антигенных препаратов 5. ухеегае 1, полученных с помощью ультразвуковой дезинтеграции
6.1. Характеристика химического состава дстинтегратов, подвергшихся воздействию гндроксиламннгидрохлорида
6.2. Иммунохммнческая характеристика антигенных препаратов, полученных с помощью ультразвуковой дезинтеграции
6.3. Молекулярновесовое распределение дезигтегратов и препаратов, полученных из них с помощью гидроксиламингидрохлорнда
6.4. Опенка токсических и иммуногенных свойств дезннтегратов н препаратов, полученных ит них с помощью гидроксиламингидрохлорнда
Глава 7. Изучение влиания гидроксилами н ндрохлорыда на структуру липолнсахарндов 5. уаепегае 1
7.1. Влияние гидроксил амишидрохлорида на жирнокисло гнь состав лииополнсахарида .V. ухепегае 1
7.2. Иммунохимическая характеристика лииополнсахарида до и после обрабокн гидроксила мши ядро хлоридом
. Характеристика молекулярновесового распределения лнпоиолнсахарндов уеШегае 1
7.4. Оценка токсических и пммуногсиных свойсгв препаратов лииополнсахарида
Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы


Тем не менее, ни одна из существующих вакцин не является достаточно эффективной . Известно, что для получения эффективных вакцинных препаратов большое значение имеет выбор штамма, условий его культивирования и метода извлечения антигенов. ГГ, предложенный в г. Снняшипым Н. И. и ЛобачевоЙ Л. А. . Применение этого реагента позволило получить эффективные вакцины из ряда условнопатогенных микроорганизмов, характеризующихся высокой иммуноген но стъю и слабой токсичностью протейная вакцина , поллкомпонентаая вакцина ВП4, содержащая в своем составе антигены i i. ГГ из трех ссроваров ixi ,. Эффективность антигенных препаратов, полученных с помощью ГГ, доказана и для других фамогрнцательных бактерий ii . В связи с вышеизложенным, представляется актуальным получение препаратов, из бактерий . Изучение условий получения препарата, отличающегося высокой иммуногснностью и слабой токсичностью, позволило бы в дальнейшем использовать полученные данные для разработки высокоэффективной вакцины против . Несмотря на большое количество работ вопрос о влиянии ГГ на бактериальные клетки изучен недостаточно. Изучались, главным образом, различия в химическом составе и свойствах гидроксиламиновых препаратов ГАП. Никогда ранее не изучали влияние состава питательной среды на свойства препаратов, роль клеточных ферментов в процессе гидроксиламнновой экстракции, а также качественные и количественные особенности влияния ГГ на цельную микробную клетку и отдельные антигенные препараты, в частности, липополнсахарнд ЛГ1С. В настоящем исследовании решение этих вопросов проводили на модели бактерий i 1. Целью исследования было определение влияния гидроксиламитнлрохлопнла на состав и свойства различных антигенных препаратов БМяеНа ЛумШепае 1. Изучить влияние ГГ на состав и свойства антигенных препаратов, полученных из целых микробных клеток 5. Определить влияние протеолигичсских ферментов в процессе экстракции антигенов с помощью ГГ из клеток 5. Определить роль компонентов питательной среды в составе антигенных препаратов, получаемых с помощью гидроксиламинпщрохлорнда. Изучить влияние 1Т на состав и свойства антигенов, полученных с помощью ультразвуковой дезинтефации из . Изучить влияние ГТ на состав и свойства липополисахаридов 5. Впервые охарактеризованы по химическим, иммунохимическим. Установлено, что гилроксиламиновые препараты из . ЛПС. Выявлено, что процесс получения антигенов из целых клеток 6. ГГ сочетается с действием эндогенных ферментов. Показано, что общепринятый способ получения ГАП при условии добавления ГГ в культуру, содержащую питательную среду, ведет к контаминации антигенных препаратов компонентами субстрата. Впервые показано, что взаимодействие ГТ с комплексом растворимых антигенов лриводит к деструкции части антигенов со снижением их и. Действие ГТ на ЛПС 3. Шепае I сопровождается снижением токсичности и еммуногенности, чго связано с частичным удалением жирнокислотных компонентов. Покачано, что экстракция ГГ целых микробных клеток при С приводит к получению малотоксичных и высокоиммуногенных ГАП из б. Разработан иммуносорбеиг для определения антител к ЛПС 5. ИФА. Состав и свойства препаратов, полученных из целых микробных клеток 5. ГГ зависят от штамма, среды культивирования, температурного режима экстракции и действия эндогенных ферментов. ГАП. СС из бактерий сунешегае 1 шт. Й среде обладает высокой иммупогенностыо и слабой токсичностью. Действие ГГ на растворимые антигены 5. Препараты, полуденные воздействием ГГ при С на дезинтеграт X суемегае 1 шт. ГГ в процессе взаимодействия с ЛПС 5. Препараты ЛПС 6. ГГ при С обладают умеренной токсичностью и средней иммуногенностыо. Диссертация изложена на 1 страницах, иллюстрирована таблицей и рисунками. Указатель цитированной литературы включает 9 источник, из них на русском языке. Материалы диссертационной работы доложены на двух конференциях молодых ученых НИИВС им. И.И. Мечкикова Москва, , гг. Московского отделения Всероссийскою научнопрактического общества микробиологов, эпидемиологов и паразитологов Москва г. По теме диссертации опубликовано три работы в центральной печати.