Симбиотические взаимоотношения лактобацилл и микроорганизмов желудочно-кишечного тракта

• Автор: Червинец, Юлия Вячеславовна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 263 с. : 101 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Пробиотики

1.1.1 .Понятие пробиотиков

1.1.2.Понятие бактсриоцинов и микроцинов

1.1.3.Характеристика антагонистически активных штаммов лактобацилл

1.1.3.1.Частота встречаемости бактерициипродуцирующих

штаммов лактобацилл.

1.1.3.2.Спектр антагонистической активности бактерицинпродуцирующих штаммов лактоба

1.1.3.3.Физикохимические характеристики бактериоцинов, синтезируемых лактобациллами.

1.1.3.4.Генетический контроль синтеза бактериоцинов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВНИЯ
2.1. Характеристика исследуемого материала
2.2. Выделение чистой культуры лактобацилл
2.3. Идентификация лактобацилл
2.4. Праймеры и постановка. ПЦР для видовой идентификации лактобацилл.
2.5. Изучение антагонизма микроорганизмов методом перпендикулярных штрихов
2.6. Определение антагонистической способности микроорганизмов продукция бактсриоцинов.
2.7. Определение антагонистической способности лактобацилл продукция микроцинов
2.8. Определение антимикробной активности супернатантов, содержащих бактсриоцинолодобные вещества
2.9. Совместное культивирование на поверхности твердой питательной среды
2 Определение чувствительност лактобацилл к желчи.
2 Определение чувствительности лактобацилл к соляной кислоте.
2 Определение кислотопродуцирующей способности лактобацилл
2 Определение признаков патогенности
21. Определение лецитиназной активности
22. Определение казеинолитической активности.
23 Определение желатиназной активности.
24. Определение нуклеазной активности
25. Определение каталазной активности
26. Определение гемолитической активности
27. Определение антилизоцимной активности
2 Определения адгезивной способности микроорганизмов.
2 Определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным
препаратам качественная
2. Определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам количественная
2 Определения чувствительности латобацилл к химиопрепаратам и хитозану
2 Статистическая обработка материала.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Выделение и идентификация лактобацилл.
3.2. Антагонистическая активность лактобацилл
3.2.1. Бактериоцинная и микроцинная активность.
3.2.2. Антагонистическая активность прогретой культуры.
3.2.3. Межмикробный антагонизм.
3.3. Чувствительность лактобацилл к антимикробным препаратам
3.4. Чувствительность лактобацилл к химиопрепаратам и хитозану
3.5. Ферменты патогенности и адгезивная способность лакгобацилл
3.6. Чувствительность лактобацилл к соляной кислоте и желчи
3.8. Кислотопродуцирующая способность лакгобацилл
3.9. Характеристика рупп сравнения
ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


А. А, С7, С, подавляющих репликацию ДНК микроцин В, , ингибирующих транспорт лейцина и пролина микроцины 0, , изменяющих мембранный потенциал клетки микроцин Е2, нарушающих процессы деления клетки микроцин или проницаемость бактериальной цитоплазматической мембраны, путем образования пор Хмель И. А., , Бондаренко В. М., . В связи с этим актуальной является селекция штаммов лактобацилл, синтезирующих микроцины с широким спектром антагонистической активности. Целью настоящей работы явилось выделение, идентификация и изучение высокоантагонистически активных штаммов лактобацилл, продуцирующих бактериоциноподобные вещества с широким спектром антимикробного действия, перспективные для создания новых пробиотических препаратов. рРНК. Определить спектр антимикробной активности, адгезивную и кислотообразующую способность бактерицинпродуцирующих штаммов лактобацилл. Разработать комплексные подходы оценки безвредности потенциальных пробиотических штаммов лактобацилл по выявлению признаков, ассоциированных с наличием ферментов патогенности, определяемых в системе i vi. Определить чувствительность бактерицинпродуцирующих штаммов лактобацилл к желчи, соляной кислоте и антимикробным препаратам и характер взаимных отношений между выделенными и производственными пробиотическими штаммами бактерий различных таксономических групп. Выделены высокоантагонистические бактериоциногенные штаммы лактобацилл, подавляющие различные виды грамположительных и грамотрицательных патогенных и условно патогенных бактерий и грибов рода i. Обоснована необходимость комплексного изучения апатогенности изолятов, критериями отбора которых являются отсутствие гемолитической, протеолитической желатиназной и казеинолитической, лецитиназной, гиалуронидазной, антилизоцимной, ДНКной и РНКной активности, определяемых i vi. Получена коллекция бесплазмидных высокоантагонистических бактериоциногенных штаммов лактобацилл, устойчивых к физиологической концентрации соляной кислоты и желчи, обладающих чувствительностью к ряду одних и резистентностью к ряду других химиотерапевтических препаратов, антибиотиков и хитозаиу. Показана совместимость выделенных высокоантагонистических штаммов лактобацилл с бактериями производственных штаммов . 3, . Т, . , . i . Впервые выявлена ростстимулируюшая активность 0,6 соляной кислоты в отношении антагонистически активных штаммов лактобацилл и энтерококков. Установлено, что бактериоциногенные штаммы лактобациллы, выделенные из фекалий здоровых детей, обладают высокой антагонистической активностью в отношении патогенной и условно патогенной микрофлоры, не обладают признаками патогенности и могут быть использованы для разработки на их основе новых препаратов пробиотиков. Показано, что антагонистически активные бесплазмидные штаммы лактобацилл обладают резистентностью к широкому спектру антимикробных препаратов, что открывает возможность их использования в комплексной терапии заболеваний, осложненных дисбактериозом кишечника. Показано, что антагонистически активные штаммы лактобацилл не оказывают ингибирующего влияния на нормальную микрофлору кишечника и могут быть использованы совместно с другими препаратами пробиотиками, содержащими лактобациллы, бифидобактерии и энтерококки. Выделенные высокоантагонистические бактериоциногенные апатогенные, резистентные к соляной кислоте и желчи штаммы лактобацилл, подавляющие патогенную и условно патогенную микрофлору, могут быть использованы в качестве основы для создания новых эффективных препаратов пробиотиков. Штаммы лактобацилл с широким спектром антимикробной активности, обладающие высокой чувствительностью к ряду антибиотиков и биологически совместимые с известными пробиотическими штаммами бактерий различных таксономических групп, могут быть использованы для конструирования производственных консорциумов для комплексной терапии различных заболеваний ЖКГ. По материалам диссертации было составлено пособие Дисбактериозы кишечника и их коррекция.