Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Enterobacter и конструирование на их основе биопрепарата

• Автор: Пожарникова, Елена Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.07, 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Ульяновск
• Количество страниц: 169 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Характеристика бактерий рода .

1.1.1. Таксономическая характеристика бактерий рода .

1.1.2. Морфология и культуральные свойства.

1.1.3. Резервуар и распространение инфекции

1.1.4. Лабораторная идентификация бактерий рода .

1.1.5. Устойчивость к факторам внешней среды.

1.2. Бактериофаги и их применение в диагностической практике.

1.2.1. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой.
1.2.2. Фагоидентификация бактерий и фаготипирование
1.2.3. Реакция нарастания титра фага.
II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы и методы
2.1.1. Материалы.
2.1.2. Методы
2.2. Поиск бактерий рода и их бактериофагов.
2.2.1. Выделение бактерий рода из объектов окружающей
2.2.2. Выделение бактериофагов бактерий рода
2.2.3. Характеристика биологических свойств выделенных фагов.
2.3. Разработка технологических параметров изготовления и контроля
индикаторных энтеробактерных бактериофагов.
2.4. Разработка схемы исследования материала с целью выделения
и ускоренной идентификации бактерий рода
2.5. Разработка оптимальных условий постановки реакции
нарастания титра фага.
2.5.1. Определение количественного показателя реакции нарастания титра фага, имеющего диагностическое значение
2.5.2. Установление оптимального времени, постановки РИФ.
2.5.3. Использование РНФ для обнаружения бактерий рода во внешней среде
2.5.3.1. Исследование с помощью РНФ водопроводной воды, контаминированной бактериями рода .
2.5.3.2. Исследование с помощью РНФ комбикорма, контаминированного бактериями рода
2.5.3.3. Исследование с помощью РНФ фекалий, контаминированных бактериями рода
2.5.3.4. Исследование с помощью РНФ мяса,
контаминированного бактериями рода
2.5.3.5. Исследование фекалий от больных диареей телят с помощью
2.6. Изучение эффективности сконструированного фагового
биопрепарата
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ЛИТЕРАТУРНЫХ
ИСТОЧНИКОВ
ПРИЛОЖЕНИЯ .
СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ГОБ грамотрицательные бактерии
ДНК дезоксирибонуклеиновая кислота
КОЕ колонии образующая единица
МПА мясопептонный агар
МПБ мясопептонный бульон
ОКИ острые кишечные инфекции
РНФ реакция нарастания титра фага
УПБ условнопатогенные бактерии
ЦНС центральная нервная система
м.к.мл количество микробных клеток в 1 мл
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Род входит в состав семейства асеае, 5ой группы грамотрицательных факультативных анаэробов, относящихся к I отделу грамотрицательные микроорганизмы царства . Название было утверждено в году на заседании Подкомитета по i и в дальнейшем на заседании Юридической комиссии того же подкомитета в году Беркли с соавт. Е. . . . Е. , . . . .i . . . . . .ii . .vi . . .iv . .i . .ii . . iii . .vi . На протяжении последних лет систематика рода претерпевала существенные изменения табл. Указанный факт особенно значим для штаммов, условно отнесенных в группу . Блохина, Соколова, Леванова, . Бактерии группы . Покровский, Поздсев, , что было осуществлено в году. Согласно современной классификации род имеет видов . ., . .iv, . .ii, . .ii, . .. Эпизоотологическое и эпидемиологическое значение имеют виды . . Покровский, Поздеев, Джапаридзе, Голиджашвили, Капанадзе, , i, , , , . Энтеробактеры прямые, подвижные грамотринательные палочки с перетрихиально расположенными жгутиками. Исключение составляет единственный неподвижный вид . Диаметр бактерий составляет 0,6 1 мкм, длина 1,23 мкм. Некоторые штаммы имеют капсулу. В мазках располагаются одиночно, реже короткими цепочками. Бактерии этого рода хорошо растут на обычных и селективнодифференальных для энтеробактерий средах. На плотных питательных средах образуют слизистые и неслизистые колонии среднего размера, напоминающие колонии эшерихий и клебсиелл. На лактозосодержащих дифференциальнодиагностических средах Эндо, Плоскирева, МакКонки образуют красные лактозоположительные варианты колонии с металлическим блеском или без него, малиновые или розоватые колонии штаммы замедленноразлагающие лактозу и. Эндо или с желтоватым на среде Плоскирева не разлагающие лактозу. В жидких питательных средах образуют помутнение с осадком, иногда пристеночное кольцо. На висмутсульфит агаре через часов инкубации образуют темнозеленые или коричневые колонии без окрашивания участка среды под колонией Покровский, Поздесв, . . на агаре Дригальского формируют колонии лактозоположительные, или отрицательные круглые, 23 мм в диаметре, слегка радужные или плоские с неровными краями. На среде Гектона колонии имеют сходный диаметр и желтоваторозовый цвет. На метиленовосинем агаре колонии розоватые, слизистые, выпуклые, 3 4 мм в диаметре , i, . Характерными для энтеробактеров свойствами являются неспособность образовывать сероводород и индол, не имеют фенилаланиндезаминазы, утилизируют цитрат, слабоактивны при гидролизе мочевины, большинство штаммов замедленно разжижают желатин, имеют отрицательную реакцию с метиловым красным и положительную ФогесПроскауэра, ферментируют глюкозу с образованием кислоты и газа, обычно манит, лактозу, сахарозу, встречаются штаммы, не ферментирующие их последних два углевода или с замедленноположительной реакцией вариабельно инозит, салицин, адонитол. Представители рода образуют кислоту из глюкозы, мальтозы, трегалозы, арабинозы, ксилозы, маннозы, маннитола, целлобиозы реакция положительна для всех видов. Ферментативная характеристика видов рода представлена в таблице 2. . быстро образуют кислоту и газ из целлобиозы, медленно кислоту при ферментации глицерина. Хотя лактоза ферментируется медленно, Вгалактозидазный тест всегда положителен. Бактерии этого вида утилизируют малонат, ферментируют адонитол, положительны в тесте на адениндегидролазу и орнитиндекарбоксилазу, но отрицательны на лизиндекарбоксилазу. Большинство штаммов разжижают желатин медленно. Беркли с соавт. Тест Е. Е. . i 1 i 2 i . .i 3 1 I с . .ii . Дсорбитола . Д шшыспродсгашкпы для срока инк6ации часов. Тесты проводили при температуре С.