Оптимизация технологии культивирования вирусов парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и хламидий при разработке ассоциированной вакцины

• Автор: Каримуллина, Ильсияр Габделгазизовна
• Шифр специальности: 03.00.07, 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 132 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ Стр.

Введение.

1.Обзор литературы

1.1. Этиологическая структура респираторных заболеваний телят

1.2. Технология культивирования вирусов ПГ3, ИРТ и хламидий для изготовления средств специфической профилактики респираторных инфекций крупного рогатого скота.

1.3. Специфические меры борьбы и профилактики респираторных заболеваний телят.

Собственные исследования

2. Материалы и методы исследований.

2.1.Штаммы микроорганизмов.

2.2. Культуры клеток

2.3. Питательные среды и растворы.

2.4. Куриные эмбрионы.
2.5. Подопытные животные .
2.6. Аппаратура для культивирования.
2.7. Клиникоэпизоотологические исследования респираторных заболеваний телят.
2.8. Серологические исследования
2.9.Изучение биологических свойств вирусов парагриппа3, инфекционного ринотрахеита и хламидий и оптимизация параметров их культивирования.
2 Изготовление лабораторных образцов ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота.
2 Оценка антигенной активности ассоциированной инактивирован
ной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза на кроликах.
2 Изучение антигенных и иммуногенных свойств ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза на телятах
2 Статистическая обработка результатов исследований
3. Результаты исследований.
3.1. Клиникоэпизоотологические исследования и серологическиймониторинг ПГ3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота в неблагополучных хозяйствах.
3.2. Изучение и оптимизация параметров культивирования вирусов
ПГ3, ИРТ и хламидий крупного рогатого скота.
3.2.1. Изучение культурально морфологических и биологических свойств производственных и эпизоотических штаммов вирусов
ПГ 3, ИРТ и хламидий
3.2.2. Изучение чувствительности различных линий культур клеток
к вирусам ПГ3 и ИРТ крупного рогатого скота.
3.2.3. Изучение факторов, влияющих на накопление вирусов в культурах клеток и хламидий в куриных эмбрионах
3.3. Изготовление экспериментальных образцов ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота и изучение их антигенной активности на кроликах
3.4. Контроль качества экспериментальных серий ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины, против ПГ3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота
3.5. Оценка иммуногенной активности ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота на телятах
4. Обсуждение результатов исследований.
5. Выводы
6. Практические предложения
7. Список литературы
8. Приложения.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВД вирусная диарея
ВНИВИ Всероссийский научно исследовательский ветеринарный институт
ВСЖ вируссодержащая культуральная жидкость
ГЛА гидролизат лактоальбумин
ГОА гидроокись алюминия
ИРТ инфекционный ринотрахеит
КРС крупный рогатый скот
КЭ куриные эмбрионы
МДВК перевиваемая линия культуры клеток почки телят
МДСК перевиваемая линия культуры клеток почки собаки
МПА мясопептонный агар
МПБ мясопептонный бульон
МППБ мясопептонный печночный бульон
ПГ 3 парагрипп
ППЭС перевиваемая линия культуры клеток почки эмбриона свиньи ПЭГ полиэтиленгликоль
ПЯЭК перевиваемая линия культуры клеток языка эмбриона коровы
РВН реакция вируснейтрализации
РГА реакция гемагглютинации
РНГА реакция непрямой гемагглютинации
РСК реакция связывания комплемента
РТГА реакция торможения гемагглютинации
РК перевиваемая линия культуры клеток почки свиньи
ТЫ перевиваемая линия культуры клеток трахеи эмбриона коровы
ТЦЦ тканевая цитопатогенная доза
ФСБ фосфатносолевой буфер
ЦПД цитопатогенное действие
ЭЛД эмбриональная летальная доза для куриных эмбрионов
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Многие исследователи считают, что основная роль в развитии респираторных заболеваний принадлежит вирусам и,, прежде всего, вирусам парагриппа3, инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, которые регистрируются во многих регионах нашей страныСюрин В. Н., Фомина Н. В., Гаффаров Х. З., Закутский Н. И., Шипицын А. Г., Высокопоясный А. И., . В подавляющем большинстве случаев респираторные заболевания у телят протекают как смешанные инфекции. В связи с этим диагностика, а также проведение специфических и организационнохозяйственных мероприятий должна быть комплексной. Для специфической профилактики вирусных инфекций применяются, живые и инактивированные вакцины. В последние годы в связи с тем, что живые вакцины из аттенуированных штаммов вызывают персистенцию и являются потенциально опасными в плане возможной реверсии вирусов в организме привитых животных, усилия зарубежных и отечественных ученых направлены на разработку безопасных и эффективных инактивированных препаратов для специфической защиты от этих инфекций Закутский Н. И и сотр. Равилов А. З., Гаффаров Х. З., Гумеров В. Г., . Несмотря на достижения в развитии клеточной биотехнологии Катингер X. Шейрер У. Курносов А. Н. и сотр. Широко распространенный способ пристеночного выращивания клеток в матрасах ввиду малой производительности и большой трудоемкости мало пригоден для промышленного использования Сергеев В. А.,. В этом отношении наиболее универсальным является роллерный способ получения клеток в круговом монослое, однако он требует тщательной отработки режимов культивирования для конкретных клеточных линий, чтобы обеспечить максимальную реализацию их ростового потенциала Тарасов В. Н.,. Закутский Н. ПГ3, ИРТ и хламидий для. Изготовить экспериментальные образцы инактивированной ассоциированной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота и изучить их антигенность на лабораторных животных. Изучить иммуногенность ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза в остром опыте на телятах. Проведены клиникоэпизоотологические исследования и серологический мониторинг респираторных инфекций крупного рогатого скота в и хозяйствах Поволжья и Урала. Впервые по результатам изучения биологических свойств отобраны производственные и эпизоотические штаммы вирусов ПГ3, ИРТ и хламидий для конструирования ассоциированной инактивированной вакцины. На основании изучения параметров культивирования этих возбудителей предложены оптимальные условия крупномасштабной технологии их выращивания. Проведена оценка антигенной и иммуногенной активности ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота на кроликах и телятах. ГГ3 и ИРТ на культурах клеток МДВК и ТИ. ПГЗ, ИРТ и хламидий для изготовления ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины против вышеуказанных возбудителей. ПГЗ, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота в остром опыте на телятах. Технические условия на. ПГЗ, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота, утвержденные директором ВНИВИ декабря г. Временное наставление по применению вакцины, утвержденного начальником Главного управления ветеринарии кабинета Министров республики Татарстан января г. Основные положения диссертации доложены на отчетных научных конференциях Всероссийского научноисследовательского ветеринарного института Казань, г. Республиканской научнопроизводственной конференции Актуальные проблемы животноводства и ветеринарии Казань, гмеждународной конференции Инфекционные и инвазионные болезни Казань, г. Всероссийской научнопрактической конференции Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов, посвященной летию института Щелково, г. Втором съезде ветеринарных врачей республики Татарстан Казань, г. Международной научнопрактической конференции Актуальные проблемы ветеринарной медицины Ульяновск, г. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ. Список литературы включает 8 работ отечественных и иностранных авторов. Диссертация иллюстрирована таблицами, 6 рисунками. В приложении представлены документы, подтверждающие результаты отдельных этапов работы, их научную и практическую ценность.