Изучение блокирующего действия Тамм-Хорсфалл протеина на колонизацию мочевыводящих путей уропатогенными штаммами E. coli

• Автор: Ружанская, Анна Владиславовна
• Шифр специальности: 03.00.07, 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 98 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ii i как условнопатогенный микроорганизм

1.1.1. Типы адгезипов Е. i

1.1.1.1. Маннозочувствительные фимбрии или фимбрии 1 типа Е. i

1.1.1.2. Маннозоустойчивые фимбрии Е. i

1.2. Общая характеристика ТаммХорсфалл протеина

1.2.1. Структура ТаммХорсфалл протеина

1.2.1.1 .Аминокислотный состав ТаммХорсфалл протеина

1.2.1.2. Углеводный состав ТаммХорсфалл протеина

1.2.2. Способы идентификации н выделения ТаммХорсфалл протеина

1.3. Роль ТаммХорсфалл протеина в развитии
восходящей уроинфекции
1.3.1. Взаимодействие Е. i, несущих Рфимбрии с ТаммХорсфалл протеином
1.3.2. Взаимодействие Е. i, несущих фимбрии 1 типа
с ТаммХорсфалл протеином
1.3.3. Взаимодействие Е. i, несущих фимбрии
с ТаммХорсфалл протеином
1.3.4. Взаимодействие Е. i, несущих адгезин 5Х
с ТаммХорсфалл протеином
1.4. Биологическая роль ТХП
1.4.1. Исследование ТаммХорсфалл протеина на мышиных моделях
1.5. Патологическое значение ТаммХорсфалл протеина
1.5.1. Количественное содержание ТаммХорсфалл протеина
в норме и при патологии
1.5.1.1. Экскреция ТаммХорсфалл протеина при
трансплантации почки
1.5.2 Антитслопродукция к ТаммХорсфалл протеину
1.5.2.1. Возрастная зависимость антителообразован и я к ТаммХорсфалл протеину
1.5.2.2. Антителопродукция к ТаммХорсфалл протеину
при патологиях
1.5.3. Феномен ТаммХорсфалл протеина при
трансплантации почки
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.1.1. Штаммы микроорганизмов
2.1.2. Клинический материал
2.1.3. Среды, антибиотики и реактивы, используемые в работе
2.1.3.1. Среды
2.1.3.2. Антибиотики
2.1.3.3. Реактивы
2.1.3.4. Экспериментальные животные
2.1.3.5. Оборудование
2.2. Методы исследования .
2.2.1. Выделение ТаммХорсфалл протеина
2.2.2. Получение иммунных сывороток
2.2.3.Получение антигенного эритроцитарного диагностикума
2.2.4. Исследование бактериальной адгезии
2.2.4.1. Исследование адгезии . i в реакции агглютинации дрожжей
2.2.4.2. Реакция нейтрализации агглютинации дрожжей
2.2.4.3. а,б Реакция торможения агглютинации дрожжей
2.2.4.4. Исследование агглютинации эритроцитов барана
2.2.4.5. реакция нейтрализации эритроцитов барана
2.2.4.6. Реакция торможения агглютинации эритроцитов барана
2.2А.1. исследование агглютинации эритроцитов морской свинки
2.2.4 Реакция нейтрализации эритроцитов морской свинки
2.2.9. Реакция торможения агглютинации
эритроцитов морской свинки
2.2.5. Методы постановки серологических и
иммунохимических реакций
2.2.5.1. Реакция агглютинации с иммунной сывороткой
2.2.5.2. Реакция торможения ТаммХорсфалл протеина агглютинации иммунной сыворотки
2.2.5.3. Определение концентрации ТХП в образцах мочи
по реакции нейтрализации антител
2.2.5.4. Реакция нейтрализации антител нативной мочой
2.2.5.5. Реакция преципитации в геле
2.2.5.6. Иммуноэлектофорез
2.2.6. Математическая и статистическая обработка данных
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Адгезия . i на эпителиальные клетки
мочевыводящего тракта и роль ТХП как протективного фактора
3.1.1. Изучение адгезинов музейных штаммов . i в сравнении с клиническими изолятами. Блокирующее действие
ТХП на адгезию . сой к клеткаммишеням
3.2. Тестсистема для определения ТаммХорсфалл протеина
3.2.1. Тестирование иммунной сыворотки в РИД
3.2.2. Исследование активности сывороток
3.2.3. Исследование активности антигенного
эритроцитарного диагностикума
3.3. Исследование продукции аутоантител к ТаммХорсфалл протеину
и влияние их на изменение уровня ТХП в моче
3.3.1. Исследование антителопродукции к ТаммХорсфалл протеину у доноров и реципиентов почечного трансплантата
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Список публикаций по материалам диссертации Список литературы
СОКРАЩЕННЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В РАБОТЕ
А АТ аутоантитела
АТТП аллотрансплантация трупной почки ГАЕ гемагглютинирующая единица ИМГ инфекция мочевых путей МЧ маннозочувствительная адгезия
МУ маннозоустойчивая адгезия
РАТИ родственная аллотрансплаитация почки РГА реакция гемагглютинации РНАТ реакция нейтрализации антител РИД реакция иммунодиффузии РС рсференс сыворотка
РТПГА реакция торможения прямой гемагглютинации
САЧ сывороточный альбумин человека
ТХП ТаммХорсфалл протеин
ЭБ эритроциты барана
ФСБ фосфатносолевой буфер
ХГП хронический гломерулонефрит
ХИН хроническая почечная недостаточность
ОР гликозилфосфатидилинозитол
ВВЕДЕНИЕ


Глава 1. Типы адгезипов Е. Маннозочувствительные фимбрии или фимбрии 1 типа Е. Маннозоустойчивые фимбрии Е. Взаимодействие Е. Взаимодействие Е. Взаимодействие Е. Взаимодействие Е. Глава 2. Методы исследования . Исследование адгезии . А.1. Глава 3. Адгезия . Изучение адгезинов музейных штаммов . ТХП на адгезию . В настоящее время трансплантация почек вошла в широкую медицинскую практику. Одним из наиболее частых послеоперационных осложнений является развитие восходящей уроинфекции. Одним из физиологических барьеров на пути восходящей уроинфекции является ТаммХорсфалл протеин ТХП. Этот белок был обнаружен в моче здорового человека в г. В норме он выявляется исключительно в почках, но при этом не является непосредственным структурным элементом органа, а активно секретируется эпителиальными клетками восходящего отдела петли Генле, выделяясь с мочой в количестве от до 4 мкгмл 5. Несмотря па значительный исследовательски й интерес, физиологическая функция этого белка полностью не расшифрована. В v и соавт. ТаммХорсфалл протеина с фимбриями 1 типа ii i . ТХП обладает способностью взаимодействовать с i доменом фимбрий 1 типа кишечной палочки, препятствуя тем самым адгезии Е. Основой успешной колонизации слизистой мочевого тракта является соответствие фенотипа адгезина рецепторам, локализованным на клеткахмишенях. В этой связи актуальным является определение фенотипов адгезинов, характерных для уропатогенных вариантов Е. ТХП на клетках мишенях.