Штаммовый состав вирусов, поражающих овощные культуры на юге Дальнего Востока России

• Автор: Чернявская, Надежда Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 126 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Глава 1. Штаммовос разнообразие вирусов, поражающих овощные культуры семейств СисигЬйассас и 8о1апасеае литературный обзор
1.1. Вирус мозаики арбуза 1 рода Ро1уу1ги семейства Ро1уу1г1с1ас вредоносный для растений семейства СисигЬпасеае

1.1.1. Характеристика вирусов рода Рщуупив

1.1.2. История открытия и распространение вируса мозаики арбуза 1

1.1.3. Биологические свойства вируса мозаики арбуза 1

1.2. Штаммы вируса огуречной мозаики рола Сиситоупив семейства Вгототс1ае, распространенные на растениях семейств СисигЬНасеае и 8о1алассас

1.2.1. Общая характеристика вируса огуречной мозаики

1.2.2. Биологические свойства штаммов вируса огуречной мозаики

1.2.3. Антигенные свойства кансидного белка вируса огуречной мозаики

1.2.4. Классификация штаммов вируса огуречной мозаики
1.3. Штаммы вируса табачной мозаики рода ТоЬатопи5, поражающие растения семейства 8о1апасеас
1.3.1. Общая характеристика вируса табачной мозаики и некоторых его штаммов
1.3.2. Биологические особенности штаммов вируса табачной мозаики
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Вирусные изоляты, выявленные на овощных культурах семейств СисигЬйасеае и 8о1апасеае
2.2. Идентификация штаммов вирусов методом биологического тестирования
2.2.1. Изучение экспериментального круга растенийхозяев и симптомов заболевания
2.2.2. Механическая инокуляция
2.2.3. Изучение роли тлей в передаче вирусной инфекции
2.2.4. Определение физических свойств штаммов вирусов
2.2.5. Изучение вирусных включений методом световой микроскопии
2.2.6. Электронная микроскопия вирусных частиц
2.3. Выделение очищенных препаратов вирусных изолятов
2.3.1. Получение очищенного препарата ВОМ изолят из огурца
2.3.2. Методика выделения очищенного препарата ВТМ изолят
из томата
2.4. Схема иммунизации животных
2.5. Реакция двойной иммунодиффузии
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Выявление экспериментального круга растенийхозяев, проведение сравнительного анализа симптомов и изучение физических свойств изолятов вируса мозаики арбуза 1
3.1.1. Изолят из кабачка
3.1.2. Изолят из тыквы
3.1.3. Определение антигенного родства изолятов вируса мозаики арбуза 1
3.2. Изучение изолятов вируса огуречной мозаики
3.2.1. Характеристика биологических свойств изолятов
3.2.1.1. Изолят ВОМ из перца
3.2.1.2. Изолят ВОМ из баклажана
3.2.1.3. Изолят ВОМ, выявленный на томате
3.2.1.4. Изолят ВОМ, обнаруженный на огурце
3.2.2. Характеристика очищенного препарата изолята ВОМ из огурца и специфической моноштаммовой антисыворотки
3.2.3. Изучение антигенного родства изолятов ВОМ методом РДД
3.3. Исследование свойств изолятов вируса табачной мозаики и определение групповой принадлежности штаммов внутри вида
3.3.1. Изолят ВТМ из томата
3.3.2. Изолят ВТМ из баклажана
3.3.3. Корейский изолят ВТМ
3.3.4. Характеристика очищенного препарата изолята ВТМ из томата и специфической моноштаммовой антисыворотки
3.3.5. Изучение антигенных взаимоотношений штаммов ВТМ методом РДД
Глава 4. Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы


Капсид потивирусов состоит из мономеров белка с молекулярной массой мм кД Краев, . Был проведен анализ аминокислотных последовательностей капсидных белков потивирусов. Он показал, что степень гомологии последовательностей белков разных вирусов рода vi в среднем составляет от до . При этом главные различия обнаруживаются в длине и последовательности их концов, в то время как Стерминальные части молекул сходны , , V . Иотивирусный геном представлен одноцепочечной несегментированной молекулой РНК. Мм РНК составляет 3,,5 МД. Длина молекулы около 0 нуклеотидов. На 5конце содержится ковалентно связанный белок V с мм кД, на Зконце располагается полиадениловая последовательность. РНК потивирусов содержит одну открытую рамку считывания i . Анализ процесса трансляции РНК вируса гравировки табака и вируса крапчатости перца позволил составить генетическую карту потивирусов , i, а. Кодирующая емкость потивирусного генома составляет 8 белков. В молекуле РНК гены, кодирующие вирусные белки, от 5конца к Зконцу располагаются в следующем порядке V белок Р1 хелперный компонент белок РЗ белок цитоплазматических цилиндрических включений белок 6К белок ядерных включений i белок ядерных включений i капсидный белок . Белок Р1, или добавочный фактор репликации вирусного генома, является ферментом протеиназой, которая участвует в расщеплении образующегося в результате трансляции РНК полипротеина на функциональные белки V, i, . Хелперный компонент потивирусов имеет мм кД vi . На Сконце молекулы находится протеолитический домен, ответственный за освобождение его собственного Сконца из полипротеина, то есть выполняет функцию протеиназы . Поэтому данный белок в настоящее время называется хелперный компонент протсиназа НС. Вместе с тем, имеются сообщения о точечных мутациях в Сконцсвой области, приводящие к снижению эффективности передачи тлями i . То есть векторной передачей потивирусов управляют несколько сайтов НС. Кроме того, данный фактор вовлечен в процесс репликации вируса и влияет на его накопление в клетке и экспрессию симптомов . В клетках зараженных растений потивирусы, как правило, образуют включения. Они могут располагаться в цитоплазме в виде цилиндрических или аморфных образований и состоят из мономеров вирусного неструктурного белка. Аморфные включения состоят из неструктурного вирусного белка с мм кД i . Обнаружено, что ген, кодирующий данный белок, находится вблизи 5конца. Иммунохимические исследования показали связь данного продукта с фактором переноса. НСРго i . Мм белка РЗ варьирует у разных потивирусов от до кД i . Белок РЗ выполняет несколько функций. Он участвует в процессе репликации вирусной РНК i . Данный белок обнаружен в составе цилиндрических включений потивирусов, а также в мембранной фракции зараженных клеток i, , i . Мм белка цилиндрических включений составляет кД i, , . Исследование вируса шарки сливы показало, что данный белок обладает активностью РНКхеликазы и АТФазы i . Белок 6К мембраносвязанный белок мм 6 кД участвует в репликации вируса в качестве фермента протеиназы i, i, . Ядерные включения образованы двумя неструктурными вирусспецифическими белками i и i мм и кД , i, а, б. Белок i малый белок ядерных включений выполняет функцию фермента протеиназы, участвуя в расщеплении полипротеина на отдельные белки i, i, . Он состоит из белка V и протеиназы. Большой белок ядерных включений i является Независимой РНКполимеразой i . Таким образом, вирусы рода vi обладают рядом общих свойств, обусловленных особенностями их генома. Как было сказано выше, на Дальнем Востоке России идентифицировано потивирусов, которые поражают многие сельскохозяйственные культуры. В последние годы в регионе на овощные культурах сем. ВМА1 рода vi семейства vii. Остановимся подробнее на исследованиях данного вируса, описанных в литературе. ВМА i vi был описан еще в г. М. Уолкер , цит. Первые исследования, посвященные этому патогену растений сем. Северной Америке. К. Андерсон , изучил заболевания тыквы, дыни, огурца и арбуза во Флориде и описал 2 штамма вируса типичный и желтый.