Прямые низкомолекулярные антикоагулянты естественного происхождения : Природа и механизм действия

• Автор: Русакова, Ольга Александровна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Тюмень
• Количество страниц: 339 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

1. Ощая характеристика работы .

2. Превращение фибриногена в фибрин и прямые ингибиторы этого процесса Обзор литературы

2.1. Структура фибриногена, его активация тромбином и самосборка фибрина

2.2. Гепарин и гепариноиды

2.3. Гирудин и гирудиноиды

2.4. Пептидные ингибиторы самосборки фибрина

3. Материалы и методы исследований

4. Результаты исследований .

4.1. Физиологические пептидные ингибиторы животного происхождения .

4.1.1. Механизм ограничения аутополимеризации мономерного фибрина

4.1.2. Торможение пептидным ингибитором животного происхождения реакции тромбина с фибриногеном
4.1.3. Влияние инъекций пептидного ингибитора самосборки фибрина животного происхождения на состояние плазмокоагуляции лабораторных животных
4.2. Пептидные ингибиторы растительного происхождения
4.2.1. Антикоагулянтная активность экстрактов из некоторых растений флоры Сибири
4.2.2. Очистка и природа антикоагулянтов из экстрактов нонеи темной, окопника лекарственного, медуницы мягчайшей и кривоцвета полевого
4.2.3. Количественное определение антикоагулянтов во фракциях экстрактов нонеи темной, окопника лекарственно
го, медуницы мягчайшей и кривоцвета полевого
4.2.4. Механизм ограничения свертывания крови антикоагулянтами растительного происхождения
4.2.5. Влияние экстракта из нонеи темной на гемокоагуляцию лабораторных животных.
4.2.5.1. Противосвертывающее действие экстракта в опытах на животных
4.2.5.2. Защитное действие экстракта из нонеи темной
при экспериментальной тромбопластинемии.
42.5.3. Сопоставление характера противосвертывающего эффекта экстракта из нонеи темной и гепарина
4.2.6. Токсикологическая характеристика экстракта из нонеи темной
4.3. Пептидные ингибиторы коагуляционного превращения фибриногена, получаемые из сапропеля
4.3.1. Разработка способа получения фракции сапропеля
с антикоагулянтной активностью
4.3.2. Разработка приемов очистки ингибиторов из сапропеля
4.3.3. Природа носителей антикоагулянтной активности.
4.3.4. Механизм ограничения плазмокоагуляции ингибиторами из сапропеля.
4.3.5. Гемокоагуляционные изменения при внутривенном введении экстракта из сапропеля лабораторным животным .
5. Обсуждение результатов и заключение .
6. Выводы
7. Указатель литературы
1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В полимеризации фибрина ведущую роль играют электростатические взаимодействия, возникающие после отщепления фибринопептида А Роий е. ВепаЫс Михаловская Л. И. и соавт. Возможность их осуществления подтверждается исследованием первичной структуры фибриногена. Так, в начальном участке ацепи, который относится к Ефрагменту, имеются кластеры отрицательных зарядов АаАспГлуАсп и А аАспГлу. В сегменте ацепи, относящемся к Эфрагменту, имеются кластеры положительных зарядов Аа3ЛизАргЛиз и 8ЛизАрг. Триада положительных зарядов присутствует в начальном сегменте 3цепи домена Е, расположенном в непосредственной близости к активному центру Е2. Это ЛизЛизАрг, которой может соответствовать кластер отрицательных зарядов в отрезке 3цепи, включенной в Офрагмент 2 ЮГлуЦисГлуГлу и 3ГлуМетГлуАсп Луговской Э. В. и соавт. Э.В. Луговской Э. В., . Участие отстатков лизина подтверждено тем, что модификация 8аминогрупп лизина в молекуле фибриногена существенно изменяет его свойства высвобождение фибринопептида А происходит нормально, но фибриноген перестает свертываться ОзЬаИг, . Роль электростатических взаимодействий в формировании фибрина подтверждается и тем, что при возникновении мономерного фибрина его молекула приобретает более выраженный общий положительный заряд по сравнению с фибриногеном. При отщеплении фибринопептидов А и В 1 моль фибринмономера содержит на отрицательных зарядов меньше, чем 1 моль фибриногена Розенфельд М. А. и соавт. i е. Высвобождение фибринопептидов В сопровождается возникновением системы водородных и гидрофобных взаимодействий , , . Кластеры неполярных аминокислот присутствуют в домене Е в близости от комплементарного центра. Это ВрАлаАлаАла, ЛейГлиВалЛей и АлаЛейЛей. Этим кластерам в 3цепи, принадлежащей фрагменту, могут соответствовать гидрофобные кластеры 2ГриТриТир, 6ГирТирТри и 5ВалВалТри. Характер влияния нейтральных солей па полимеризацию фибрина позволяет предположить, что среди этих кластеров имеются неполярные остатки, которые, будучи ориентированы в растворитель, участвуют в гидрофобных межмолскулярных взаимодействиях, обеспечивающих полимеризацию фибрина i е. Vi е. Роль гидрофобных взаимодействий подтверждается тем, что самосборка ведет к увеличению объема системы, в которой протекает процесс, а давление оказывает деполимеризующее действие е. Об этом же свидетельсвует зависимость скорости самосборки от температуры е. Луговской Э. В., Луговской Э. В., Белицер В. А., . Водородные связи возникают за счет остатков триптофана в молекуле мономерного фибрина , iii, , обеспечивая связь между концевым дисульфидным узлом структурный участок домена Е и СООНконцевым участком домена ii е. Модификация остатков триптофана из в молекуле мономерного фибрина замедляет полимеризацию, а модификация 6 из остатка триптофана в фрагменте лишает его способности тормозить самосборку i е. Ii е. Не исключено участие в образовании водородных связей остатки тирозина, фенольные гидроксилы которых образуют водородные связи, определяющие оптимальную взаимоориентацию фибринмономеров. Блокада фенольного гидроксила тирозина изменяет физические свойства сгустка ii е. Другие виды межмолекулярных взаимодействий изучены недостаточно. Имеются сведения, что в полимеризации участвуют дисульфидиые связи по завершении полимеризации число свободных 1 Iгрупп в фибрине на ниже, чем в фибриногене Миронов Г. П., Молчанова Л. В., . По крайней мере 2 из дисульфидных связей имеют непосредственное отношение к полимеризации после их разрыва исчезает, а при реоксидации постанавливается способность к полимеризации Хоменко А. К., , . е. концевых аминогрупп, а акцепторами протонированные имидоэфиры, происходящие из боковых амидных групп, связанных с углеводной частью фибрина е. , , , , . В формировании волокон фибрина участвуют остатки гистидина их окисление в позиции Вр снижает скорость свертывания фибриногена i е.