Маннан-связывающие лектины из морского червя Serpula vermicularis и GlcNAc/GalNAc-специфический лектин из колониальной асцидии Didemnum ternatanum

Маннан-связывающие лектины из морского червя Serpula vermicularis и GlcNAc/GalNAc-специфический лектин из колониальной асцидии Didemnum ternatanum

Автор: Ли Вэй

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2004

Место защиты: Владивосток

Количество страниц: 111 с. ил.

Артикул: 2622326

Автор: Ли Вэй

Стоимость: 250 руб.

Маннан-связывающие лектины из морского червя Serpula vermicularis и GlcNAc/GalNAc-специфический лектин из колониальной асцидии Didemnum ternatanum  Маннан-связывающие лектины из морского червя Serpula vermicularis и GlcNAc/GalNAc-специфический лектин из колониальной асцидии Didemnum ternatanum 

1. Введение
2. Литературный обзор
2.1. Введение
2.2. Лектины морских беспозвоночных
2.2.1. Происхождение, локализация и биосинтез лсктииов
2.2.2. Функции лектинов в организме
2.3. Углеводная специфичность лектинов
2.3.1. Моносахариды
2.3.1.1. СаМАсОсЫАс специфичные лектины
2.3.2. Олигосахариды и полисахариды
2.3.2.1. Маннансвязывающие белки
2.3.3. Углеводсодержащие гетерополимеры
2.3.3.1. Гепаринсвязывающис лектины
2.4. Строение углеводсвязывающих сайтов лектинов
2.5. Биологическая активность лектинов
2.6. Заключение
3. Материалы и методы
3.1. Материалы
3.2. Выделение лектинов
3.2.1. Выделение ОТЬА
3.2.1.1. Получение аффинного сорбента
3.2.1.2. Приготовление экстракта асцидии ОШетпит егпШапит
3.2.1.3. Гельфильтрация ШЪА на Берйабех в
3.2.1.4. Аффинная хроматография
3.2.2. Выделение и очистка лектинов из Зегри1а ii
3.2.2.1. Получение перекрестносшитого сорбента ОуаВЭМ
3.2.2.2. Приготовление экстракта Бегри1а ii
3.2.2.3. Аффинная хроматография
3.2.2.4. Хроматография на ОЕАЕТоуореаг1
3.2.2.5. Гельфильтрация на БерЬабех
3.3. Определение молекулярной массы и гомогенности лектинов.
3.3.1. ЗОБэлектрофорез
3.3.2. Гельпроникающая хроматография.
3.3.3. Вестернблоттинг.
3.4. Твердофазный анализ взаимодействия лектинов
с гликоконъюгатами и сахарами.
3.4.1. Конъюгаты лектинов с пероксидазой из хрена ПХ
3.4.2. Взаимодействие лектинов с гликопротеинами
3.4.3. Ингибирование связывания лектинов со
специфическими гликопротеинами
3.5. Исследование физикохимических свойств лектинов
3.5.1. Эффект на взаимодействие лектинов со специфическими лигандами
3.5.2. Температурная зависимость взаимодействия лектинов с их лигандами
3.5.3. Эффект дивалентных катионов на активность лектинов.
3.6. Определение биологической активности лектинов
3.6.1. Определение цитотоксичности
3.6.2. Ингибирование репликации ВИЧ1 Шв
3.6.3. Ингибирование пектинами межклеточного слияния ингибирование синцитисобразования
4. Результаты и обсуждение
4.1. Выделение ИТЬА
4.2. Свойства ИТЬА
4.3. Выделение и очистка лектинов из Бегри1а гегпйаЛагм
4.4. Свойства лектинов из 5егргл1а Vегтки1аг
4.5. Биологическая активность лектинов
4.5.1. Цитотоксическая активность
4.5.2. АнтиВИЧ активность лектинов
4.6. Заключение
5. Выводы Благодарности Литература
.
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ


Изучение пектинов из морских беспозвоночных впервые в мире было предпринято в начале века Ногути Хидэ, который первым опубликовал сообщение об их способности агглютинировать эритроциты. Многие лектины из морских беспозвоночных обладают различной биологической активностью. Так лектин из морской губки i токсичен по отношению к опухолевым клеткам и клеткам X i . Лектин из морской губки i способен ингибировать прикрепление ВИЧ к клетке хозяина Тклеткам человека . Нтимидина, изменяет морфологию опухолевых клеток Белогорцева и др. Одинцова и др. Настоящая работа посвящена выделению, характеристике и изучению углеводной специфичности лектинов из двух видов морских беспозвоночных морского червя vii и колониальной асцидии i . Целью данного исследования является выяснение биологической активности этих лектинов, в частности, как эффекторов процесса инвазии ВИЧ. Охарактеризованные лектины могут быть использованы как полезные инструменты для исследования заболеваний иммунной системы и нарушений процессов гликозилирования при различных патологиях. Углеводсвязывающие белки лектины были открыты более 0 лет тому назад i, . Однако, только в последние годы они оказались в центре внимания клеточных биологов, поскольку научные открытия последних лет показали, что углеводбелковое взаимодействие является важным механизмом передачи биологической информации на уровне клетки, то есть передачи информации при взаимодействии клеток друг с другом и межклеточным матриксом. Через углеводзависимые взаимодействия осуществляются такие важные биологические процессы как оплодотворение, проникновение патогена в клетки хозяина, миграция лейкоцитов к месту воспаления, а также процессы малигнизации и метастазирования. В настоящее время в различных областях биологических и медицинских исследований, в частности для решения проблем в области мембранологии и гликобиологии, широко используются и изучаются лектины. Лектины это общее название белков, обладающих свойством обратимо и избирательно связывать углеводы, не вызывая их химического превращения. Термин лектины от латинского выбирать, предложенный У. Бойдом, подчеркивает избирательность их взаимодействия с углеводами. В х годах его начали применять для обозначения углеводсвязывающих белков растительного и животного происхождения. Позже появились сообщения, что лектины широко распространены в биологическом мире, начиная с вирусов и кончая млекопитающими i, . Одним из главных свойств лсктинов является их избирательное взаимодействие с углеводами. Углеводы, выступая в качестве гаптенов, блокируют сайты связывания лектинов. Изучение специфичности взаимодействия лектинов с углеводами проводилось на сходном принципе блокирования активных антител гаптеном. Одна из первых классификаций лектинов, которая сохранилась и сейчас, основывается на том, что специфичность взаимодействия лектина с углеводом зависит от положения гидроксилов при 3м и 4м атомах углерода, а так же Эили Ьформы пиранозного цикла углеводов. В наше время лектины по специфичности подразделяют на четыре типа, первые два из которых наиболее широко представлены в природе 1 Стип лектины 2 Бтип лектины 3 Ртип лектины 4 и другие. Стип лектинов называется так потому, что для их связывающей активности необходимы ионы кальция. К Бтипу относятся лектины способные связывать Ргалактозиды, отсюда их второе название гапектины. Ртип лектинов является специфичным для гликопротеинов, содержащих остатки маннозо6фосфата. Среди других групп следует отметить пентраксины, характеризующиеся пентамерной субъединичной структурой и 1тип лектинов имеющих сходство с иммуноглобулинами. Различные лектины способны реагировать с редко встречающимися в обычной практике углеводами и их производными, содержащими 1 и Оацетильную группу, сиаловыми и уроновыми кислотами, дигалактозидами, пентозами, фосфорилированными и сульфатированными углеводами. Аминокислотный состав лектинов, особенно из эволюционно отдаленных организмов, существенно различается. Поэтому говорить об одном характерном типе аминокислотного состава для лектинов не представляется возможным.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

04.07.2017

Лето - пора делать собственную диссертацию!

Здравствуйте! Дорогие коллеги, предлагаем Вам объединить отдых и научные исследования. К примеру Вы можете приобрести на нашем сайте 15 ...

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.226, запросов: 143