Исследование NMDA-рецепторов лимфоцитов человека

• Автор: Давыдова, Ольга Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. Взаимосвязь иммунной и нервной систем

1.1. Взаимная регуляция иммунной и нервной систем.

1.1.1. Нервная регуляция иммунной системы.

1.1.2. Иммунная регуляция нервной системы.

1.1.3. Нейровоспаление.

I.2 Глутамат в иммунной системе

II. Распространение и Функции глутаматных рецепторов в организме.

.1. Глутаматные рецепторы в мозге

.1.1. Классификация глутаматныхрецепторов
.1.2. Взаимодействие глутаматных рецепторов разных классов.
.1.3. Экзайтотксичность.
.2. Глутаматные рецепторы в периферических тканях и органах.
Н.З. Глутаматные рецепторы при неопластических процессах.
II.4. Глутаматные рецепторы лимфоцитов.
III. М1РАрецептор структура и функции
III.1. Структура цпт субъединичный состав и лигандная
специфичность
Ш.2.Регуляция функционирования рецепторов
1.2.1. Десенсибилизация
1.2.2. Фосфорилирование
1.2.3. Встраивание в мембрану и формирование функционально активного рецепторного комплекса.
IV. Механизмы клеточной активации
1У.1. Общие представления о механизмах клеточной активации
1У.2. АФК и их участие в механизмах сигнальной трансдукции.
1У.2.1. АФК источники их образования в организме, система антиоксидантной
защиты.
1У.2.2. Биологическая роль АФК и участие в сигнальной трансдукции
1У.З. Активация лимфоцитов.
1У.3.1 Роль кальция в активации лимфоцитов.
1У.3.2. Участие АФК в активации лимфоцитов.
IV.4. рецептор и механизмы внутриклеточной сигнализации.
Цель и задачи исследования.
Научная новизна и практическая ценность работы.
Положения, выносимые на защиту.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
I. Материалы и методы исследования.
1.1. Получение клеточных препаратов
1.1.1. Получение ткани мозжечка крыс и выделение гранулярных клеток
1.1.2. Отбор крови.
1.1.3 Выделение лимфоцитов.
1.1.4. Первичная культура периферических лимфоцитов.
1.2. Определение уровня свободных радикалов хемилюминесцентным методом
1.3. Проточная цитометрия.
1.3.1. Принцип метода проточной цитометрии
1.3.2.Определение внутриклеточного уровня АФК.
1.3.3.0пределение доли мертвых клеток.
1.3.4.0пределение доли апоптотических клеток.
1.3.5.Иммунофенотипирование . .
1.3.6.0пределение экспрессии 1 субъединицы
1.4. Определение экспрессии гена 11.
1.4.1. Дизайн праймеров для полимеразной цепной реакции
1.4.2. Выделение РНК и обратная транскрипция.
1.4.3. Полимеразная цепная реакция.
1.5. Статистическая обработка данных
II. Результаты исследования и их обсуждение
I1. Влияние на хемилюмннесценцию суспензии лимфоцитов периферической крови человека.
.2. Исследование действия на функциональное состояние лимфоцитов методом проточной цитометрии
.3. Определение экспрессии мРНК к 1 субъединице рецепторного комплекса.
.4. Определение экспрессии субъединицы 1 рецепторного комплекса на поверхности лимфоцитов
.4Л. Окраска клеток поликлональными антителами аЬ к 11субъединице
.4.2. Окраска клеток моноклональными антителами 0X2 к 1субъединице
.4.3. Изменение экспрессии 1 в результате инкубации клеток с
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
БЛАГОДАРНОСТИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В связи с вышесказанным, изучение способов воздействия глутаминовой кислоты на клетки иммунной системы представляется весьма актуальной проблемой как для теоретической, так и для практической медицины. Глава I. I. Обнаружение непосредственной взаимосвязи между нервной и иммунной системами стало одним из выдающихся открытий в современной биологии. Предпосылками для такого заключения стали материалы многолетних клинических наблюдений, а также непосредственных экспериментов на определенных модельных системах. В результате многочисленных исследований было четко продемонстрировано наличие выраженных взаимосвязей между нервной системой и иммунитетом. Согласно сложившимся на сегодняшний день представлениям, следует рассматривать нервную, эндокринную и иммунную систему как единое целое, работа которого обеспечивается множественными регуляторными механизмами. Известно, что некоторые изменения гормонального статуса влекут за собой изменения в иммунной системе, например, дефицит гормона роста приводит к снижению продукции антител, функции Тклеток и клеточной активности, пролактин оказывает стимулирующее действие на иммунную систему и т. Другим интригующим примером такого рода взаимодействий является наличие корреляции между эмоциональным состоянием человека и его иммунным статусом. В частности, считается доказанной связь между стрессом и снижением ряда иммунных показателей клинические исследования показали, что выраженная депрессия протекает на фоне изменения числа и процентного соотношения различных популяций иммунокомпетентных клеток и их функционального состояния Т. В., . Логично предположить, что взаимосвязь между иммунной и нейроэндокринной системами обусловлена специальными регуляторными механизмами, необходимыми для поддержания гомеостаза организма. Это может быть прослежено на примере различных патологических состояний, когда вследствие сбоя в работе одной из систем наблюдаются изменения в функционировании другой. Так, известно, что воспалительные процессы в ЦНС играют негативную роль в патогенезе многих неврологических заболеваний. СПИДе, болезни Альцгеймера, при эпилепсии и рассеянном склерозе. С другой стороны, при многих неврологических заболеваниях наблюдаются существенные отклонения от нормы в иммунном статусе пациентов Крыжановский Г. Н. и др. Согласно современным представлениям, в нервной регуляции функций иммунной системы участвуют многие отделы мозга. Существуют данные о том, что изменения иммунного ответа возникают при экспериментальном воздействии практически на любой отдел ЦНС. Тем не менее, ключевым отделом центрального аппарата нервной регуляции иммунной системы считается гипоталамус, как высший центр регуляции висцеральных функций, а другие отделы ЦНС участвуют в регуляции иммунной системы за счет наличия структурных и функциональных связей с гипоталамусом Крыжановский Г. Н. и др. Существенным звеном в концепции нервной регуляции иммунной системы является иннервация органов иммунной системы нейротрансмиттерными и пептидергическими волокнами, а также тот факт, что иммунокомпетентные клетки вступают в непосредственный контакт с терминалями нервных волокон и обладают соответствующими рецепторами для нейрорегуляторов. С каждым днем накапливается все больше данных о молекулярных механизмах, обеспечивающих регуляцию иммунной системы нейротрансмиттерами и гормонами. Различные клетки иммунной системы несут рецепторы ко многим нейрорегуляторным факторам ацетилхолину М. ii . i . V. , , дофамину vi . . . vi . . ii . ii . . ., . ., ii . . . . . . . П i . . . . . . i . . . Естественно предположить, что клетки иммунной системы не случайным образом экспрессируют рецепторные белки, а обладают способностью сложным образом реагировать на сигналы, подаваемые нервной системой, выполняя таким образом функции, необходимые для поддержания нормального гомеостаза.