Активность нейтральных протеаз в тканях животных при зимней спячке и гипотермии

• Автор: Абасова, Миясат Магомедрасуловна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Махачкала
• Количество страниц: 158 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Особенность метаболических процессов при гипотермии и зимней спячке

1.2. Протеолиз белков в клетке

1.3. Структура и функции нейтральных прогеаз ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. 1. Объект исследования

2. 2. Постановка эксперимента

2.3. Условия гибернации

2.4. Условия искусственной гипотермии

2. 5. Обработка биологического материала

2.5.1. Получение сыворотки
2.5.2. Приг отовление гомогенатов тканей
2.6. Методы биохимического анализа
2.6.1. Определение уровня свободных аминокислот в мозге и глутамата в крови животных
2.6.2. Определение активности Са зависимых нейтральных протеаз
2.6.3. Определение активности глицилглициндипептидазы
2.6.4. Определение автолигической активности нейтральных протеаз
2.6.5. Определение общей активности нейтральных протеаз
2.6.6. Определение белка по методу Лоури
2.7. Статистическая обработка результатов исследования ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВА1ШЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Автол итическая активность нейтральных протеаз
3.2. Изменение содержания гаммааминомаслянной кислоты и глутамата в тканях сусликов в динамике зимней спячки и
в ходе самосщревания после индуцированною пробуждения
3.3. Изменение содержания гаммааминомаслянной кислоты и
з
глутамата в тканях сусликов, находящихся в условиях
глубокой гипотермии и после самосогревания
3.4. Изменение содержания гаммааминомаслянной кислоты и
глутамата в тканях крыс, находящихся в условиях
глубокой гипотермии и после самосоревания
3.5. Активность глицилглициидипептидазы в мозгу сусликов в динамике зимней спячки и в ходе самосогревания после
индуцированного пробуждения
3.6. Активность глицилглициндипептидазы в мозгу сусликов при глубокой гипотермии и после самосогревания
3.7. Активность глицилглициндипептидазы в мозгу крыс при гипотермии
и после самосогревания
3.8. Активность Са2зависимых нейтральных протеаз в мозге, сердце и сыворотке крови сусликов в динамике зимней спячки и
в ходе самосогревания после индуцированного пробуждения
3.9. Активность Са2зависимых нейтральных протеаз в мозге и
сердце сусликов при глубокой гипотермии и после самосогревания
3 Активность Са зависимых нейтральных протеаз в тканях
крыс при гипотермии и после самосогревания
3 Общая активность нейтральных протеаз в мозге,
сердце и сыворотке крови сусликов в динамике зимней спячки и в ходе самосогревания после индуцированного пробуждения
3 Общая активность нейтральных протеаз в мозге и
сердце сусликов при глубокой гипотермии и после самосогревания
3 Общая активность нейтральных протеаз в тканях
крыс при гипотермии и после самосогревания
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Также, краткосрочная гипотермия способствует повышению пммунореактивных клеток в паравентрикулярном V и аркуатном ядрах гипоталамуса. Однако, на этом фоне снижается чувствительность иммунореактивных компонентов к нейропептиду в дорсомедиальном, паравентрикулярном и аркуатном ядрах гипоталамуса, также как и транскрипции в V и . При этом была обнаружена солокализация и . В результате . . . в ядрах гипоталамуса при гипотермии i связана с ролью данного пептида в регуляции пищевого поведения, а является отражением его участия в термогенезе. Нужно отметить, что в условиях гипотермии в ишемизированном мозге происходит ускорение процесса экспрессии ранних генов и , что связывают с сокращением времени, требуемого для нормализации механизмов. Кшпаг сЛ а1. Ферментативный гидролиз белков и пептидов протеолнз играет важную роль в регуляции обмена веществ в организме Гомазков, . С протеолизом связаны такие фундаментальные процессы жизнедеятельности, как внутриклеточный распад белков и регуляция их кругооборота, пищеварение, оплодотворение, морфогенез, защитные реакции, адаптационные перестройки обмена. Нарушение протеолиза и сто регуляции лежит в основе развития многих патологических состояний Веремеенко и др. Различают 2 типа протеолиза тотальный, приводящий к полному расщеплению белковых молекул до отдельных аминокислот, и частичный, или ограниченный протсолиз, при котором избирательно гидролизуется одна или несколько пептидных связей в молекуле белка. Протеолнз первого типа происходит в результате согласованного действия различных протеолитпческих ферментов, тогда как реакции ограниченного протеолиза катализируются отдельными специфическими протеазами Соловьева и др. Полный протеолнз осуществляется при внутриклеточном распаде белков под влиянием тканевых протеаз часто называемых катепсинами. Он протекает во многих случаях внутри лизосом клеточных органелл, содержащих набор гидролитических ферментов. Путем полного протеолиза происходит удаление из организма аномальных белков, образующихся в результате мутаций и ошибок биосинтеза. Ограниченный протеолнз белковых молекул имеет первостепенное значение для регуляции обмена веществ в организме Мосолов, . Реакции ограниченного протеолиза участвуют в процессе образования и инактивации практически всех ферментов, гормонов и других биологически активных белков и пептидов и, следовательно, в контроле активности основных биорегуляторов Ригипо ег а , i, . Примером роли ограниченного протеолиза в биогенезе гормонов может служить специфический гидролиз ряда пептидных связей в молекуле пропиомеланокортина, в результате которого из этого полифункционалыюго биосинтетического предшественника образуются АКТГ, Рлипотропин, эндорфины, меланостимулирующие гормоны, из проинсулина инсулин, из проглюкагона глюкагон. Таким же образом из своих неактивных предшественников образуются факторы роста и другие регуляторные пептиды. Основным молекулярным механизмом образования, инактивации и модификации различных пейропептидов, также является ограниченный протеолиз, который, тем самым, играет существенную роль в реализации таких нейрофизиологических процессов как память, боль, поведенческие реакции и другие Веремеенко и др. В организме различные белки имеют разную продолжительность жизни, которая как и скорость их кругооборота определяется как скоростью их биосинтеза, так и их протеолиза. Скорость протеолиза белков зависит от ряда факторов, в частности от их взаимодействия с другими веществами субстратами, коферментами, аллостерическими эффекторами, а также от химических модификаций, которым белок может подвергаться в клетке гликолизирования, фосфорилирования и др. , , . При переходе организма из одного физиологического состояния в другое например, на определенных стадиях эмбриогенеза, а также при голодании и некоторых стрессорных реакциях наблюдается резкое усиление протеолиза тканевых белков. Локальное усиление протеолиза белков межклеточного матрикса коллагена, фибронектпна, ламинина, протеогликанов и др.