Изучение биохимических и биологических свойств ППД туберкулина для млекопитающих и его стандартизация

• Автор: Мясоедов, Юрий Михайлович
• Шифр специальности: 03.00.04, 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Курск
• Количество страниц: 129 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика микобактерий туберкулеза

1.2. Реакции иммунного ответа при туберкулезной инфекции

1.3. Биохимический состав туберкулина очищенного

ППД для млекопитающих

1.4. Биологические свойства туберкулина очищенного

ППД для млекопитающих н его стандартизация

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

ф 2.1. Экспериментальные животные

2.2. Туберкулиновые препараты .
2.3. Приготовление микобактериальных антигенов. Схемы иммунизации морских свинок. Оценка интенсивности
развития иммунного ответа
2.4. Биохимические исследования
2.5. Биологические исследования
2.6. Математическая обработка результатов эксперимента
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Изучение биохимических и иммунобиологических свойств
ППД туберкулина для млекопитающих
3.2. Сравнительное изучение способов сенсибилизации
морских свинок микобактериями для определения биологической активности ППД туберкулина для млекопитающих
3.3. Подбор эталонной серии и стандартизация ППД туберкулина
для млекопитающих
3.4. Оценка эффективности использования различных вариантов
ф постановки кожной реакции ГЗТ при определении биологической
активности туберкулина очищенного ППД для млекопитающих
4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ПРИЛОЖЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АТК альттуберкулин Коха
ВОЗ Всемирная организация здравоохранения
ВМФ высокомолекулярная фракция
ВТО Всемирная торговая организация
ГЗТ гиперчувствительность замедленного типа
ГМКСФ гранулоцитарно макрофагальный колониестимулирующий фактор ГОСТ Государственный стандарт Да дальтон
ДНК дезоксирибонуклеиновая кислота
ЕФ Европейская фармакопея
ИЛ интерлейкин
ИНФ интерферон
ИФА иммуноферментный анализ
К ДА килодальтон
очищенный комплекс из атипичных микобактерий
КБ концентрат белка
МИФ макрофагингибирующий фактор
МХФ макрофагальный хемотаксический фактор
МЭБ Международное эпизоотическое бюро
Международная единица
НТД нормативно техническая документация
НОММ номинальная отсекаемая молекулярная масса
ОБТК отдел биологического и технологического контроля
ПГ простагландин
ППД сухой очищенный туберкулин ii i iviv
ПЦР полимеразная цепная реакция
РНК рибонуклеиновая кислота
РБТЛ реакция бласттрансформации лимфоцитов
ТРФ тромбоцитарный ростовой фактор
ТЕ туберкулиновая единица ТхТхелпер
ТХУ трихлоруксусная кислота ФНО фактор некроза опухоли
ФГУ ВГНКИ Федеральное государственное учреждение Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов Всероссийский государственный научноконтрольный институт
МНС iiii x главный комплекс гистосовместимости
0 оксид азота
I Ii i Международная Единица
Ii интерферон
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В связи с предстоящим вхождением России в ВТО и необходимостью гармонизации требований к ветеринарным препаратам с учетом международной нормативной документации, актуальным является проведение стандартизации туберкулина очищенного ППД для млекопитающих относительно Первого Международного стандарта vi. Цель и задачи исследований. Целыо работы было изучение биохимических и биологических свойств туберкулина очищенного ППД для млекопитающих, а также сравнительное изучение методов контроля качества туберкулина очищенного ППД для млекопитающих и его стандартизация. Провести изучение биохимического состава и иммунобиологических характеристик фракций туберкулина очищенного ППД для млекопитающих, полученных по промышленной технологии, с использованием метода мембранного фракционирования и без применения мембранной технологии. Изучить эффективность различных методов сенсибилизации морских свинок живыми и инактивированными микобактериями туберкулеза бычьего вида и определить способ сенсибилизации морских свинок термоинактивированными микобактериями для достижения оптимального уровня кожной реакции ГЗТ при определении биологической активности ППД туберкулина для млекопитающих. Провести сравнительные исследования по подбору эталонной серии туберкулина очищенного ППД для млекопитающих и установить эквивалент ее биологической активности относительно Первого Международного стандарта vi I ii Vi, . Оценить эффективность использования различных вариантов постановки кожной реакции ГЗТ на лабораторных животных и больном туберкулезом крупном рогатом скоте при определении биологической активности туберкулина очищенного ППД для млекопитающих. Научная новизна работы. Впервые проведен сравнительный анализ чувствительности разных методов сенсибилизации морских свинок при определении биологической активности ППД туберкулина I ii Vi, . Впервые выявлена статистическая закономерность увеличения вариации кожной реакции ГЗТ при снижении дозы туберкулина как у крупного рогатого скота больного туберкулезом доза vi 0 vi , так и у морских свинок, сенсибилизированных микобактериями туберкулеза бычьего вида доза vi , 2 vi , . Практическая значимость работы и пути ее реализации. По результатам исследования для проведения контроля биологической активности производственных серий утверждена эталонная серия туберкулина очищенного ППД для млекопитающих ЗА письмо ВГНКИ 41. В соответствии с международными требованиями проведено определение биологической активности эталонной серии туберкулина очищенного ППД для млекопитающих относительно Первого международного стандарта vi. Результаты исследований включены в нормативнотехническую документацию по контролю туберкулина очищенного ППД для млекопитающих СТО . Основные положения, выносимые на защиту. Результаты изучения биохимических и иммунобиологических характеристик фракций туберкулина очищенного ППД для млекопитающих, полученных с использованием мембранной технологии. Результаты сравнительных исследований эффективности различных методов сенсибилизации морских свинок микобактериями туберкулеза при определении величины биологической активности ППД туберкулина для млекопитающих. Результаты исследования по подбору эталонной серии туберкулина очищенного ППД для млекопитающих и стандартизация эталонной серии туберкулина очищенного ППД для млекопитающих относительно Первого Международного эталона vi. Результаты оценки эффективности применения различных вариантов постановки кожной реакции ГЗТ при определении величины биологической активности туберкулина очищенного ППД для млекопитающих. Апробация результатов работы. Основные положения диссертации доложены на заседании кафедры биотехнологии, фармакологии и ветеринарносанитарной экспертизы КГСХА им. И.И. Иванова конференции молодых ученых КГСХА им. И.И. Актуальн проблеми ветеринарно медицини в умовах сучасного ведення тваринництва , Феодосия международной научнопрактической конференции Ветеринарная биотехнология настоящее и будущее , Щелково. По материалам диссертации опубликовано 5 научных статей.