Поиск в ядах змей соединений, активных в отношении никотиновых рецепторов ацетилхолина и потенциал-активируемых кальциевых каналов

• Автор: Горбачева, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 102 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. НИКОТИНОВЫЕ РЕЦЕПТОРЫ АЦЕТИЛХОЛИНА

1.1.1. Рецепторы нейротрансмиттеров.

1.1.2. Классификация рецепторов.

1.1.3. Строение.

. , , а. Состав

1

1 б. Структура.

в. Участок связывания ацетилхолина.

1.1.4. Функциональные свойства.
1.1.5. Фармакологические свойства
а. Агонисты
б. Антагонисты.
1.1.6. Рецепторы нейронов моллюсков
а. пАСЫ нейронов Аруяа саогпса
б. пАСМСя нейронов Ьутпаеа
1.1.7. АСйсвязывающий белок АСЫЗР.
1.2. ПОТЕНЩАЛАКТИВИРУЕМЫЕ Са2КАНАЛЫ.
1.2.1. Различные типы Са2 тока но физиологическим и фармакологическим свойствам
1.2.2. Структура и некоторые молекулярные свойства потенциал
ах ги вирум ых Са каналов.
1.2.3. Разнообразие потенцналактивируемых Са каналов
1.2.4. Потенциалактивируемые Са2каналы нейронов
Ьутпаеа яспа.
1.3 ЯДЫ ЗМЕЙ ИСТОЧИК АКТИВНЫХ АГЕНТОВ ДЛЯ
ИССЛЕДОВАНИЯ РЕЦЕПТОРОВ И КАНАЛОВ
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Объект.
2.2. Изолирование нейрона.
2.3. Внутриклеточная перфузия.
2.4. Изготовление пипетки.
2.5. Конструкция камеры и система протоков
2.6. Растворы.
2.7. Апликация агонистов и возбуждение тока через Са2каналы.
2.8. Регистрация трансмембранного тока
2.9. Электрофизиологическая установка.
2 Обработка результатов.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ПО ХАРАКТЕРИСТИКЕ ОБЪЕКТА.
3.1. ИОННЫЙ МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ АЦЕТИЛХОЛИНА
3.1.1. Участие Ыа.
3.1.2. Участие К
3.1.3. Участие СГ
3.2. СРАВНЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ ЛЦЕТИЛХОЛИНЛ И АГОНИСТОВ
3.2.1. Лцетилхолин.
3.2.2. Холин.
3.2.3. Цитизин.
3.2.4. Проверка аддитивности действия ацетилхолина и цитизина
3.2.5. Диметилфсиилпиперазин.
3.2.6. Суберилдихолин
3.3. ДЕЙСТВИЕ аКОНОТОКСИНА 1М1 НА ТОК, ВЫЗВАННЫЙ РАЗЛИЧНЫМИ АГОНИСТАМИ
3.3.1. аКонотоксин 1ш1 против ацетилхолина
3.3.2. аКонотоксин 1т1 против цитизина
3.3.3. аКонотоксин 1т1 против диметилфенилпиперазина
3.3.4. аКонотоксин 1ш1 против суберилдихолипа.
3.4. ДЕЙСТВИЕ ДРУГИХ аКОНОТОКСИНОВ И АНТАГ ОНИСТОВ.
3.4.1. Действие аконотоксина МП.
3.4.2. Действие аконотоксина Ус 1.1.
3.4.3. Действие аконотоксина ПКА.
3.4.4 Действие аконотоксина 1ш
3.4.5. Действие стрихнина
3.4.6. Действие аконотоксинов АКЛДРгЧА и АЬДКРп1А.
3.4.7. Проверка аддитивности действия 1т1 и АЦРп1А
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ПО ХАРАКТЕРИСТИКЕ ОБЪЕКТА
5. ПОИСК В ЯДАХ ЗМЕЙ БЛОКАТОРОВ пАСЬКз И Са2КАНАЛОВ.
5.1. ДЕЙСТВИЕ ЦЕЛЬНЫХ ЯДОВ
5.2. ДЕЙСТВИЕ ФРАКЦИЙ ЯДА АФРИКАНСКОЙ ГАДЮКИ В.апешт
5.3. ДЕЙСТВИЕ ФРАКЦИЙ ДРУГИХ ЯДОВ ЗМЕЙ
6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ПО ПОИСКУ В ЯДАХ ЗМЕЙ БЛОКАТОРОВ пАСЫСч И Са2КАНАЛОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА


Образование комплекса с нейротрансмиттером приводит к изменению конформации рецептора, в результате чего открывается ионный канал, происходит резкое повышение проницаемости мембраны для ионов Катц, . Поюк ионов по электрохимическому градиенту вызывает изменение мембранного потенциала в сторону де или гииерполяризации генерацию возбуждающих ВПСП или тормозных ТПСП синаптических потенциалов. В соответствии со знаком ПСП облегчается или подавляется возбуждение ностсинаптической клетки. Рецепторы классифицируют по природному медиатору рецепторы ацетилхолина , которые распространены в центральной и периферической нервной системе, в гладких и скелетных мышцах, в сердце, во внутренних органах позвоночных, а также в нервной системе беспозвоночных, глутамата в нервной системе позвоночных и мышцах ракоообразных, пуринов в сетчатке, в сердце, в гладкой мускулатуре и ЦНС, катехоламинов в гладкой мускулатуре, в сердце, в ЦНС, рецепторы серотонина, дофамина, глицина, гаммааминомасляной кислоты, в нервной системе . , , i Viii . ii, . По способу передачи сигнала выделяют три супсрссмсйства рецепторов . Рецепторы гормонов лигандуправлясмые мембранные ферменты, обладающие собственной тирозинкиназной активностью рецепторы фактора роста, рецепторы инсулина. Ионотропные рецепторы или лигандуправляемые ионные каналы олигомерные белки, которые осуществляют передачу сигнала за счет конформационного изменения при связывании трансмиттера ионный канал является структурной частью рецептора. Субъединицы ионотропных рецепторов, окружающие ионный канал в виде розетки, существуют в виде множества подтипов, кодируемых родственными генами. К нонотропным рецепторам относятся глутаматные ДМРА, каипатные, подтипы, пуринергические управляемые и рецепторы семейства которые управляются ацетилхолином , уаминомаслянной кислотой , глицином , или серотонином 5НТ. Рецепторы суперсемейства называются в соответствии с нейротрансмиттером , , , , I. Все представители этого суперссмейства состоят из пяти субъединиц, каждая субъединица имеет в концевом домеис петлю из аминокислотных остатков, образованную дисульфидиой связью между двумя остатками цистеина так в 82 нумерация а. , i . , i , i . , ii . широко распространены в ЦНС позвоночных, в вегетативной нервной системе и скелетных мышцах, где они осуществляют быструю синаптическую передачу возбуждения. Кроме того, они локализованы в прссинаптнческой мембране во многих областях мозга, где участвуют в модуляции секреции медиатора из нервного окончания . Альцгеймера, болезнь Паркинсона, шизофрения. Кроме того, обнаружены в эпителии и эндотелии, где они принимают участие в пролиферации, обуславливая злокачественный рост клеток в клетках иммунной системы, где они также влияют на пролиферацию и продукцию антител и т. Скок , i . Состав. V представляет собой олигомер с молекулярной массой примерно 5 кДа, состоящий из пяти отдельных субъединиц, собранных кольцом вокруг ионного канала Рис. i . , i . Всего к настоящему времени идентифицированы и клонированы гены субъединиц . Существует два типа мышечный и нейрональный. В состав мышечного типа электрические органы ската и угря, скелетные мышцы позвоночных входят две а Ша субъединицы, и по одной субъединице р , у и б . С возрастом у субъединица мышечного рецептора заменяется на е. Изза этого свойства эмбрионального и взрослого рецептора отличаются дссснситизация и кинетика работы канала i . В отличие от мышечного , нейрональные рецепторы содержат подтипы только а 2 и р 24 субъединицы, их различные комбинации из двух а и трех р дают разнообразие рецепторов , i , i . В последнее время выяснилось, что нейрональный рецептор может быть построен больше, чем из одного подтипа а и больше, чем одного подтипа р. Кроме того, пять а 7, 8 или 9 могут образовать функциональные гомопентамеры.