Исследование особенностей элементарного механохимического процесса и его регуляции в мышце

• Автор: Сонькин, Борис Яковлевич
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 128 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
Введение .

Глава I. Обзор литературы.

11. Предполагаемый кинетический механизм меха

нохиыического цикла мостика

12. Регуляция работы ыиозиновых мостиков в сократительной системе мышцы

Глава 2. Методики

Глава 3. Исследование элементарного механохимичес

кого процесса в мышце с помощью ванадата

аналога неорганического фосфата .

31. Взаимодействие ванадата с сократительной системой в активном, релаксированном и ригорном состояниях .
32. Обсуждение результатов .
Глава 4. Исследование некоторых аспектов кальциевой
регуляции механохимического процесса в
мышце .
41. Исследование роли структурной подвижности актина в механизме кальциевой регуляции с
помощью фаллотоксинов .
411. Изучение действия фаллотоксинов на механику сокращения волокон при разных
степенях активации
412. Исследование влияния фаллотоксинов на
конформацию актина в теневых волокнах
413. Исследование влияния фаллоидина на
белковый состав миофибрилл
414. Исследование взаимодействия волокон с
флуоресцентными аналогами фаллоидина
42. Исследование механизма кальциевой
активации с помощью ванадата
43. Обсуждение результатов .
Заключение .
БыводыIII
Список цитируемой литературы


Кроме того, оба воздействия приводят к резкому изменению зависимости релаксационных свойств волокон от степени активации. В рамках представлений о двух способах активации С эти данные интерпретированы как ингибирование 1ого способа регуляции, который у контрольных волокон возникает при малых степенях активации. Предполагается, что этот эффект ванадата обусловлен его более сильным диссоциирующим действием на мостики, включенные Iым способом. Такой механизм может служить объяснением известного факта повышения константы скорости запаздывающего натяжения под влиянием ванадата ЗД, поскольку включенные 1ым способом мостики имели относительно малую величину этой константы. Показано, что ванадат смещает стационарную кривую силарСа в область более низких значений рСа. Обнаружено Са в присутствии ванадата наблюдается развитие переходных натяжений, значительно превышающих стационарные значения. Такая кинетика развития силы привела к предположению, что не все мостики могут последовательно активироваться при низких степенях активации. Исчезновение 1ого способа включения мостиков под влиянием фаллоидина рассматривается как указание на необходимость большей структурной подвижности актина для этого типа регуляции. Исследование свойств волокон с выключенным 1ым типом регуляции показало, что представление о двух способах включения мостиков недостаточно для объяснения изменений кинетических свойств волокон в ходе Саактивации. ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. II. Предполагаемый кинетический механизм ыеханохимического цикла мостика. В исследовании кинетической схемы гидролиза АТФ в растворах мышечных белков протеолитические фрагменты миозина и актин достигнуты большие успехи. Прогресс в этой области был достигнут в значительной степени путем изучения нестационарной кинетики реакций оптическими методами. Эти данные остаются основным источником сведений о кинетике АТФазной реакции в мышце, поскольку такие методы анализа системы не удается применять в структурированных системах. Однако схему гидролиза АТФ мышечными белками пока нельзя считать окончательно установленной. Первой схемой, которая позволила просто сопоставить разные стадии гидролиза АТФ с разными механическими стадиями мостика, была схема Лимна и Тейлора . Проведенное ими исследование кинетики диссоциации актосубфрагментаI и гидролиза АТФ показали, что константа скорости диссоциации более Iс, в то время как для гидролиза она не превышает 0 Iс и равна константе скорости этой стадии для субфрагментаI. Для описания кинетики АТФазной реакции была предложена следующая схема. М миозин, А актин, Т АТФ, Д АДФ, Фннеорганический фосфат, Пр продукты реакцииАДФ и Фн, связанные с белком. При 0, 0,1 М КСе, рН8,0, С кЯЮ6 Г1 с1 нЮО 0 с1 . с1 к Юб М1с1 к5 с1 кб а 3 Ю5 М1с1 Ку ю с . Л . ЯК актиновой нити под прямымуглом, а затем происходит конформадионная перестройка комплекса, связанная с поворотом мостика что приводит к развитию силы. ЛчТ. Я . АТФазы, проведенныхь нескольких лабораториях,было установлено, чтоэта схема является,более сложной. Результэты исследований, проведенных к году были критически рассмотрены и обобщены Тейлором С9. Суммированные результаты были, представлены жвиле . АМ. АТФазноы цикле актосубфрагмента1 при 0 мМ КС Н7,0 ,С. Величины для радиальных шагов константы ассоциации М1 для миозиновых интермедиатов с актином. Величины других констант ассоциации или диссоциации определены для направления по часовой стрелке. Часть этих величин установлена экспериментально, другие, отмеченные знаком К е т , где дб изменение стандартной энергии в каждом переходе. АТФ 3 М , АДф Ю5 М , Од Ю3 М , что по оценкам примерно соответствует условиям в мышце. В этом случае константы равновесия для всех переходов на миозиновом и актомиозиновом циклах становятся безразмерными. Соответствующие им изменения стандартной свободной энергии в оригинальной литературе ЬаБи е. А эф АТ Кэф.