Продукты фотоокисления фурокумаринов и механизмы их мембранотоксического и иммуносупрессорного действия

• Автор: Кягова, Алла Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 196 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Фотофизнческие и фотохимические свойства фурокумаринов

1.1. Строение и фотофизнческие свойства фурокумаринов

1.2. Фотохимические реакции фурокумаринов ГЛАВА 2. Выявление удельного вклада реакций типа IV в фотосенсиби

лизированное императорином повреждение мембран эритроцитов

2.1. Темновая и фотогемолитическая активность гидропероксидов императорина I и II

2.1.1. Темновой гемолиз

2.1.2. Фотогемолиз, сенсибилизированный гидропероксидами иператорина

2.2. Темновая и фотогемолитическая активность алкоголя императорина

2.3. Фотогемолиз, сенсибилизированный императорином удельный вклад реакций типа IV
ГЛАВА 3. Физикохимические закономерности образования продуктов
фотоокисления фурокумаринов, вызывающих супрессию Т
клеточного иммунного ответа i viv
3.1. Изучение влияния химической структуры фурокумарина на образование продуктов фотоокисления, вызывающих супрессию реакции гиперчувствительности замедленного типа ГЗТ
у мышей
3.2. Влияние интенсивности действующего излучения и концентрации псоралена при облучении на образование продуктов фотоокисления, обладающих иммуносупрессорным или мембранотоксическим действием
3.3. Физикохимические свойства фотопродуктов псоралена, вызывающих супрессию реакцию ГЗТ i viv
3.4. Роль гидропсроксигрупп в продуктах фотоокисления аллоимераторина и императорина в индукции супрессии Тклеточного иммунного ответа i viv
ГЛАВА 4. Механизмы иммуносупрессорного действия продуктов фотоокисления фурокумаринов на реакции гиперчувствительности замедленного типа
4.1. Современные представления о механизмах развития реакций гиперчувствительности замедленного типа
4.2. Ослабление функций эффекторов ГЗТ и индукция клеток с супрессорными свойствами под действием продуктов фотоокисления псоралена
4.3. Механизмы иммуносупрессорного действия продуктов фотоокисления фурокумаринов на реакцию контактной чувствительности
4.3.1. Выявление способности продуктов фотоокисления псоралена, 8метокси псоралена и аллоимператорина модулировать реакцию контактной чувствительности к 2,4динитрофторбензолу
4.3.2. Угнетение пролиферативной активности антигенспсцифических Т лимфоцитов при действии гидропероксида аллоимператорина i viv
4.3.3. Исследование влияния i vi гидропероксида аллоимператорина на пролиферативный ответ Т лимфоцитов
4.3.4. Индукция супрессорной активности иммунекомпетентных клеток при действии гидропероксида аллоимператорина i viv
4.4. Оценка влияния продуктов фотоокисления псоралена на гуморальный иммунный ответ
ГЛАВА 5. Перспективы клинического применения продуктов фотоокисления фурокумаринов
5.1. Ингибирование роста привитой Тклеточной лимфомы 4 у мышей продуктами фотоокисления псоралена
5.2. Терапия экземы препаратом фотоокисленного псоралена
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Биологическими субстратами для фотодинамических реакций могут служить белки, липиды и ДНК. В фотохимических реакфциях Типа с субстратом взаимодействуют свободные радикалы ФК, а также генерируемые ФК кислородные радикалы супероксиданионрадикал Ог и гидроксильный радикал ОН. Реакции могут протекать путем образования комплексов с переносом заряда КПЗ между триплетными электронновозбужденными состояниями ФК 3ФК и другими молекулами в основном состоянии. При низких температурах фотогенерация свободных радикалов ФК осуществляется по двухфотонному механизму i . V V . Поглощение молекулой ФК первого фотона приводит к образованию триплетного электронновозбужденного состояния 3ФК. Поглощение 3ФК второго фотона приводит к образованию сольватированного электрона и катионрадикала ФК i . V V . При комнатной температуре двухфотонная генерация свободных радикалов ФК при использовании обычных, низкоинтенсивных источников света практически невозможна изза малого времени жизни 3ФК, которое составляет несколько микросекунд . Поэтому для генерации свободных радикалов ФК по двухфотонному механизму нужны очень высокие интенсивности , . Способность ФК генерировать супероксиданионрадикал была показана i vi спектрофотометрически с помощью реакции химической трансформации нитросинего тетразолия i , . Супероксид анионрадикал обладает низкой реакционной способностью, но является предшественником высокотоксичного для клеток гидроксильного радикала i . I., , образование которого было доказано методом спиновых ловушек . Известно, что 3ФК являются хорошими акцепторами электронов. Методом лазерного импульсного фотолиза показано, что основным механизмом дезактивации 3ФК в присутствии таких доноров электронов, как тимин, тирозин и триптофан, является тушение с переносом заряда . V. . Предполагается, что сенсибилизированное 8МОП фотоокисление ДОФА в дофахром происходит в результате образования КПЗ между ДОФАН2 и триплетом 8МОП , . Присутствует сообщение, что реакции с образованием КПЗ ответственны за сенсибилизированное ФК окисление глутатиона i vi i М. V. . Показано, что окисление липидов и атокоферола, индукция ПУВАэритемы, могут происходить в ходе реакций типа I М. М.А. М. . V, . Присутствуют сообщения, что реакции типа I могут приводить к окислительным модификациям ДНК i . Эффект ингибирования ионолом антирадикальным агентом фотогемолиза, сенсибилизированного псораленом i I. V. . ФК и супероксида в индукции фурокумаринового гемолиза. Данные, указывающие на возможный вклад реакций типа I в индукцию иммуносупрессорных и терапевтических эффектов ПУВАтерапии или фотофереза, в литературе не представлены. Фотохимические реакции типа II протекают с участием синглетного кислорода . В ходе реакций этого типа сначала происходит перенос энергии электронновозбужденного триплетного состояния сенсибилизатора 3ФК на молекулярный кислород с образованием электронновозбужденного синглетного кислорода . Затем, взаимодействует с субстратом, окисляя его схема 2. Впервые вывод о возможности генерации ФК синглетного кислорода сделан в работе . I., . Авторы показали, что в кислородных условиях фотосенсибилизированная 8МОП инактивация лизоцима ускорялась в по сравнению с Н, как известно, в 2 время жизни гораздо выше, чем в Н. Позднее эффекты ускорения в были обнаружены для разных ФК при фотоокислении других субстратов библиографию см. Кроме того, было показано, что фотоокислительные реакции ФК ингибируются тушителями 2 азидом натрия i , i , iv . V , iv . V . Однако, химические методы обнаружения не очень специфичны и могут осложняться реакциями ловушек с другими фотопродукгами ФК. Например, азид натрия помимо способности тушить , способен ингибировать темновые реакции типа Фентона, а именно, повреждение ДНК, вызванное воздействием смеси трехвалентного хрома и перекиси водорода Т. С. . Т.С. Ь. Кроме того, азид натрия как нуклеофильный агент очень эффективно разрушает некоторые перекиси, например, диоксетаны Ере В. Используя прямой метод регистрации люминесценции при X нм v . Красновский и др.