Исследование цитоскелетных механизмов взаимодействия дофамина с живыми клетками

• Автор: Шубина, Виктория Сергеевна
• Шифр специальности: 03.00.02, 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 148 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Анатомическая структура дофаминсргичсской системы мозга и ее функции .

1.2. Локализация и функции дофамина в других тканях организма

1.3. Роль катехоламинов в эмбриогенезе

1. Биосинтез и метаболизм катехоламинов.

1.4.1. Биосинтез катехоламинов

1.4.2. Метаболизм катехоламинов.

1.5. Дофаминовые рецепторы

1.5.1. Классификация дофаминовых рецепторов.
1.5.2. Структура дофаминовых рецепторов.
1.5.3. Фармакологические свойства дофаминовых рецепторов
1.5.4. Трансдукция сигнала дофаминовыми рецепторами.
1.6. Дофаминовые транспортеры.
1.6.1. Регуляция транспорта дофамина
1.6.2. Роль дофаминовых транспортеров при наркотической зависимости.
1.7. Пространственновременное распределение дофамина.
1.8. Нсклассическос влияние катехоламинов на клетку.
1.8.1. асинуклеин и арпептид как внутриклеточные мишени действия катехоламинов.
1.8.2. Десенсибилизация рецепторов нейротрансмиттерами
1.8.3. Диффузия дофамина через мембраны в условиях нормы и патологии
И. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования.
2.2. Физиологические эксперименты.
2.3. Электронномикроскопическое исследование маутнсровских нейронов
2.4. Морфометрическое исследование контактов МН.
2.5. Изучение взаимодействии Гактина с дофамином и дигидрониримидинтионом i vi.
2.6. Негативное контрастирование
2.7. Изучение взаимодействия дофамина с модельными фосфолипидными мембранами.
2.8. Эксперименты с липосомами, захватившими в свою полость Гактин.
2.9. Культивирование клеток ВНК и оценка их выживаемости
2 Морфологические исследовании клеток ВНК
2 Цитохимическая визуализации ДА внутри клеток ВНК.
III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Исследование ультраструктуры маутнеровских нейронов
3.1.1. Морфофункциональные эффекты аппликации дофамина на МН и влияние на них блокады ДА рецепторов
3.1.2. Морфофункциональные изменения МН под влиянием дигидропиримидинтиона.
3.2. Исследования взаимодействия дофамина с Гактином и модельными мембранами
3.2.1. Влияние дофамина на состояние актина.
3.2.2. Изучение взаимодействия дофамина с искусственными фосфолипидными мембранами.
3.3. Влияние ДА па выживаемость и ультраструктуру клеток 1ШК
3.3.1. Влияние дофамина на выживаемость клеток ВНК.
3.3.2. Действие дофамина на ультраструктуру клеток ВНК
3.3.3. Цитохимическое исследование накопления дофамина внутри клеток ВНК.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Рядом авторов получены свидетельства того, что легкие и мезентерические органы существенно влияют на общую продукцию и метаболизм дофамина в организме i . Большая часть дофамина в плазме крови находится в связанном виде в виде конъюгатов и является результатом его синтеза из ДОФА i . i . Рис. Источники дофамина в организме. i . i, , . Обозначения арилсульфатаза СОМТ катехоламинОметилтрансвераза дофамин сульфат дигидроксифенилаланин 3,4дигидроксифенилуксусная кислота декарбоксилаза ароматических аминокислот V гомованилиновая кислота МАО моноаминоксидаза 3МТ 3метокситирамин 3 3метокситирозин сульфат норадреналин фенолсульфотрансфераза ТН тирозингидроксилаза тирозин. Таким образом, в литературе появляются данные, свидетельствующие о том, что существует третья периферическая катехолергическая система, где дофамин синтезируется из ДОФА и действует как аутокринныйпаракринный гормон, который, по всей видимости, инактивируется в результате связывания и образования конъюгатов i . Катехоламины в целом, и дофамин в частности, так же играют важную роль в регуляции иммунного гомеостаза организма Репина, . Тесная связь иммунной и нейроэндокринной систем находит свое подтверждение в ряде исследовательских работ , , vi, i, viv, , , . Она оказывается возможной благодаря наличию соответствующих рецепторов для цигокинов которые вырабатываются клетками иммунной системы на плазматической мембране нервных клеток и дофаминовых и адреналиновых рецепторов на мембранах иммунекомпетентных клеток i, viv, , , . , , . Роль катехоламинов в эмбриогенезе. На сегодняшний момент существует представление, согласно которому классические нейротратрансмиттеры, в частности катехоламины КА, помимо участия в нейрональной передаче сигнала и функционирования в качестве гормонов, активны и в период раннего донервного эмбриогенеза Бузников, . Получены свидетельства того, что КА играют регуляторную роль в процессах дробления, морфогенеза, а также дифференцировки в ранний период эмбрионального развития животных Бузников, Безуглов, ii, , . В частности, дофамин был идентифицирован в ооцигах разных групп позвоночных и беспозвоночных Бузников, . Повышенное количество данного моноамина по сравнению с другими донервными нейротрансмиттерами обнаружено в клетках дробящихся зародышей иглокожих и амфибий Бузников, Безуглов, ii, , . Как было установлено рядом авторов, изменения уровня КА у зародышей морских ежей происходят в соответствии с синтетической и метаболической активностью соответствующих ферментов ii, , . М i, , . Рядом авторов было выдвинуто предположение, согласно которому КА модулируют метаморфоз брюхоногих моллюсков i i i . Авторами также было показано, что повышенный уровень КА, наблюдаемый в данный период времени, сам по себе не является достаточным фактором, обеспечивающим протекание нормального метаморфоза. Таким образом, на сегодняшний момент получены свидетельства того, что катехоламины выполняют многочисленные донервные функции, а также выдвинуто предположение, согласно которому эндогенные моноамины в определенных случаях действуют на . Бузи и ков, Безуглов, . Биосинтез и метаболизм катехоламинов. Как уже упоминалось, дофамин по химической структуре относится к биогенным аминам, а именно к катехоламинам производные пирокатехина и является предшественником норадреналина и адреналина, которые также выполняют нейромедиаторные, модуляторные и гормональные функции. Тирозин дигидроксифенилаланин ДОФА дигидроксифенилэтиламин дофамин норадреналии адреналин рис. Из всех ферментов синтеза катехоламинов тирозингидроксилаза обладает самой высокой субстратной специфичностью и является ферментом, лимитирущим скорость всего процесса.