Увеличение разрешающей способности фотометрического метода регистрации агглютинации эритроцитов человека in vitro

• Автор: Дворецкий, Константин Николаевич
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 137 с. : ил.

Введение.

1. Агрегация эритроцитов

1.1. Основные понятия.

1.2. Механизмы агрегации эритроцитов

1.3. Физические и биологические параметры влияющие на агрегацию

1.3.1 Внутренние факторы крови

1.3.2 Внешние факторы действующие на кровь

1.4. Механизмы агглютинации эритроцитов.

1.4.1 Силы взаимодействия между реагентами иммунологических реакций

1.5. Экспериментальные методы.

1.5.1 Микроскопические методы.

1.5.2 Седиментационные методы.
1.5.3 Центрифугационные методы
1.5.4 Вискозиметрические методы.
1.5.5 Оптические и ультразвуковые методы
1.6 Основные результаты и выводы
2. Изучения агрегации эритроцитов i vi методом упругого светорассеяния
2.1. Оптические свойства крови
2.2. Классификация методов аппроксимирующих упругое рассеяние света форменными элементами крови
2.3. Нефелометрические измерения
2.3.1. Нефелометрические измерения суспензий латекса.
2.3.2. Нефелометрические измерения суспензий эритроцитов человека i
2.3.3. Нефелометрические измерения процесса агрегации эритроцитов
человека i vi.
2.4. Выводы.
3. Усиление агрегации эритроцитов i vi с помощью ультразвука
3.1. Оптимизация условий регистрации и пробоподготовки экспериментов
по регистрации агрегации эритроцитов человека i vi
3.1.1. Выбор источника и приемника излучения
3.1.2. Выбор реакционного сосуда
3.1.3. Анализ возможных оптических схем.
3.2 Подбор оптимальных параметров пробоподготовки экспериментов по регистрации агрегации эритроцитов человека i vi.
3.2.1 Регистрация процессов агглютинации эритроцитов
фотометрическим способом без усиления внешними сдвиговыми силами
3.2.2 Выбор внешней сдвиговой силы для усиления агглютинационных
процессов.
3.2.3 Оптимизация пробоподготовки и методики проведения регистрации агглютинационных процессов усиленных УЗ с помощью фотометрического метода.
3.3 Основные результаты и выводы
Глава 4. Интерпретация экспериментальных данных.
4.1 Построение теоретической модели.
4.1.1. Движение клеток крови в поле стоячей УЗ волны
4.1.2. Кинетика комплексообразования в процессе агрегации и агглютинации эритроцитов челоека i vi
4.1.3. Оценка седиментационых процессов за время инкубации реакционной среды после окончания воздействия на нее ультразвука
4.1.4. Оценка величины отклика фотоприемника при фотометрическом методе наблюдения за агглютинационными процессами
4.2. Сопоставление теоретических и экспериментальных результатов
4.3. Основные результаты и выводы
Заключение.
Литература


Ii ii i i i. , . Международная конференция Проблемы и перспективы прецизионной механики и управления в машиностроении. Саратов, Россия. ii i i i i i ii i i. , . ii i i i i ii i ii ii II. , . ii i i i i ii i ii ii III. , . По материалам диссертации опубликовано работ 4 статьи в журналах, 3 статьи в межвузовских научных сборниках, 3 статьи в сборниках трудов научных конференций и 4 тезисов докладов в отечественных и зарубежных изданиях. Диссертация состоит из введения, основной части, содержащей 4 главы, заключения и списка цитируемой литературы. Первая глава посвящена описанию процесса агрегации эритроцитов i vi, включающему описание механизмов спонтанной агрегации и индуцированной агглютинации эритроцитов i vi, физических и биологических параметров влияющих на эти процессы. Кратко рассмотрены основные методы регистрации агрегационных процессов эритроцитов i vi. Вторая глава посвящена изучению агрегации эритроцитов i vi методом упругого светорассеяния. Рассмотрены оптические свойства объекта исследования клеток крови человека. Коротко рассмотрены основные методы аппроксимирующие упругое рассеяние света форменными элементами крови. Представлено описание гониофотометрической установки, использовавшийся для измерения индикатрис однократного и многократного рассеяния исследуемых объектов. Дано описание нефелометрических измерений тестовых объектов частиц латекса. Проведенные нефелометрические исследования тестовых частиц латекса с размерами 0, и 1, мкм, показали, что чувствительности гониофотометрической установки достаточно для регистрации процессов агглютинации эритроцитов человека i vi. Также дано описание нефелометрических измерений разбавленных суспензий клеток крови и их агрегатов. Исследована зависимость индикатрисы рассеянного света от количества форменных элементов крови в единице объема в широком диапазоне концентраций 0, 3,1 от цельной крови. Сравнение индикатрис рассеянного света от сильно разбавленных суспензий агрегированных и неагрегированных эритроцитов показало, что на всем угловом диапазоне различие между регистрируемыми оптическими сигналами не превышает 0. Показана возможность качественного восстановления распределения частиц по размерам с помощью нефелометрических измерений разбавленных суспензий клеток крови и их агрегатов. Третья глава посвящена усилению агрегации эритроцитов i vi с помощью поля стоячей ультразвуковой волны. Проведен подбор оптимальных параметров регистрации и пробоподготовки экспериментов по регистрация агрегации эритроцитов человека i vi. Выполнен анализ нескольких возможных оптических схем для фотометрических и нефелометрических измерений агрегации эритроцитов человека. Показано, что разрешающая способность метода отличие регистрируемых сигналов от спонтанной и индуцированной реакций агглютинации эритроцитов может достигать, в лучших случаях, нескольких порядков. Проведен анализ методики пробоподготовки, включающий в себя подбор оптимального времени воздействия ультразвукового поля на реакционную смесь и выбор оптимального разведения исходных реагентов реакции агглютинации. В четвертой главе построена теоретическая модель, позволяющая моделировать экспериментально регистрируемые величины отклика фотоприемника при регистрации процессов агглютинации эритроцитов i vi фотометрическими и нефелометрическими методами с учетом воздействия на реакционную смесь поля стоячей ультразвуковой волны. УЗ воздействия. Полученные теоретические данные хорошо совпадают с имеющимися экспериментальными данными, что говорит об адекватности построенного модельного приближения. В заключении кратко перечислены основные результаты и выводы работы.