Аденилатциклаза печени крыс рвннего онтогенеза при действии ионизирующей радиации

• Автор: Ушакова, Татьяна Евгеньевна
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 122 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. Актуальность темы

2. Цель и задачи исследования.

3. Научная новизна работы

4. Теоретическая и практическая ценность работы .

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. СТРОЕНИЕ И СВОЙСТВА АДЕНИЛАТЦИКЛАЗЫ Ац . . . .

1.1. Локализация аденилатциклазной системы в клетке .

1.2. Каталитическая единица Ац комплекса С . . . .

1.3. Рецепторная единица Ад комплекса и II

1.4. Регуляторная единица Ац комплекса белок . .
1.5. Регуляция Ац липидами
1.6. Роль цитоплазматических факторов в регуляции Ац .
1.7. К механизму гормональной регуляции Ац
Глава 2. РАЗВИТИЕ Ац КОМПЛЕКСА
Глава 3. ВЛИЯНИЕ И0НЙЗИРУЩЕГ0 ИЗЛУЧЕНИЯ НА Ац СИСТЕМУ . .
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Условия облучения
2. Выделение мембранной фракции печени крысы
3. Выделение плазматических мембран .
4. Выделение митохондрий
5. Выделение цитоплазматических факторов
6. Определение активности Ац
7. Определение активности цАМФ фосфодиэстеразы цАМФ ФДЭ.
8. Определение активности 12АТФазы .
9. Определение активности 5нуклеотидазы.
. Определение адренергических рецепторов
. Определение белка .
. Определение концентрации растворов 2 и СаС .
. Радиометрические измерения
. Статистическая обработка результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Глава I. АКТИВНОСТЬ АДЕНИЛАТЦИКЛАЗЫ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ
В ОНТОГЕНЕЗЕ.
1.1. Исследование активности Ац печени крысы в норме .
1.2. Исследование Ац печени крысы при действии ионизирующего излучения
Глава 2. ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА АКТИВАЦИИ Ац ПЕЧЕНИ ПЛОДА
КРЫСЫ ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ .
2.1. Непрямое действие облучения на активность
Ац печени плода крысы .
2.2. Вклад митохондриальной фракции в радиационном изменении активности Ац
2.3. Вклад цитоплазматических факторов в радиационном изменении активности Ац
Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ПОВРЕЖДАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ВЫСОКИХ ДОЗ
ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА АКТИВНОСТЬ Ац ПЛАЗМАТИЧЕСКИХ МЕМБРАН ПЕЧЕНИ КРЫСЫ РАННЕГО ОНТОГЕНЕЗА . .
3.1. Состояние Ац комплекса при облучении изолированных плазматических мембран в высоких дозах
3.2. К вопросу о возможных механизмах угнетения гормонстимулированной активности Ац при действии высоких доз ионизирующего излучения в условиях i vi . .
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Было найдено, что нарушение гормональной регуляции Ац развивающейся ткани выражено более сильно по сравнению со взрослым организмом и объясняется повреждением всех компонентов Ац комплекса в отличие от зрелой ткани. Теоретическая и практическая ценность работы. Настоящее исследование представляет интерес для радиационной мембранологии и выяснения молекулярных механизмов действия ионизирующего излучения на процессы развития организма. Работа может иметь значение при решении задач экспериментальной и медицинской эмбриологии. Глава I. Аденилатциклаза АТФпирофосфатлиаза циклизующая, КФ 4. Л впервые описана в году . i . . i . Фермент осуществляет каталитическое превращение АТФ в аденозинЗбмонофосфат цАМФ. Наличие циклофосфатного кольца в молекуле создает структурную особенность данного нуклеотида и определяет его физиологическую активность. К настоящему времени сложилось представление о цАМФ как об одном из ключевых внутриклеточных регулирующих агентов, участвующих в важнейших процессах жизнедеятельности. Многочисленными исследованиями, проведенными в самых разных лабораториях, показано, что цАМФ является универсальным клеточным посредником гормонального действия. Важная роль цАМФ в проведении гормонального сигнала объясняется тем, что обширный ряд биологически активных веществ пептидные гормоны, нейротрансмиттеры, простатландины группы Е, катехоламины и токсины способны взаимодействовать с ферментом синтеза цАМФ аденилатциклазой. Таким образом, тонкая регуляция аденилатциклазы перечисленными агентами позволяет контролировать цАМФзависимые процессы в клетке. В связи с этим важно выяснение структуры и свойств данного фермента. I.I. Локализация аденилатциклазной системы в клетке. Аденилатцяклаза обнаружена практически во всех клетках живого организма . Фермент встроен В плазматическую мембрану i , , что позволяет воспринимать внешнюю информацию, трансформировать и передавать ее внутрь клетки. Сложная трансмембранная система аденилатциклазы представляет собой олигомерный белковый комплекс, состоящий, по крайней мере, из трех субъединиц рецепторной , способной избирательно связывать определенные гормоны, медиаторы и биологически активные вещества , , ii , i, I каталитической с , ответственной за превращение АТФ в цАМФ, и регуляторной гуанилнуклеотидсвязующего белка и белка, влияние которой распространяется на активность как рецепторной, так и каталитической субъединиц и связывающей всю систему в единое функциональное целое , i , . . i , i , , ii , . Компоненты аденилатциклазного комплекса являются отдельными белками, находящимися под разным генетическим контролем . ii , i , , i , . Исследованиями, проведенными во многих лабораториях, показано, что рецепторная единица локализована на внешней стороне плазматической мембраны, а каталитическая на внутренней, направленной в сторону цитозоля i . . ii , i , , vii , . , , , . Результаты самых последних исследований позволяют считать, что рецепторная единица, граничащая с внешней стороной мембраны, пронизывает ее, являясь трансмембранным образованием , , . Предполагается, что гуанилнуклеотидсвязывающий регуляторный компонент ориентирован в цитозоль . . i , iv , , . Каталитическая единица Ац комплекса с . Каталитическая единица представляет собой термолабильную белковую молекулу, чувствительную к протеазам и сульфгидрильным агентам . , i , . Роль каталитической единицы в функционировании Ац заключается в ферментативном превращении АТФ в цАМФ . АТФ , . В осуществлении каталитической реакции важную роль играет присутствие регуляторной единицы. Известно, что в мембранах, лишенных регуляторного компонента, каталитическая единица существует как АТФ Мп2зависимый фермент .