Сравнительная оценка биологической дозиметрии на основе анализа стабильных и нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови человека

• Автор: Шепель, Наталья Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Место защиты: Б.м.
• Количество страниц: 119 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о биодозиметрии

1.2 Биологическая дозиметрия по частоте нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах периферической крови человека

1.2.1 Спонтанный уровень аберраций хромосом в лимфоцитах периферической крови

1.2.2 Сравнение выходов аберраций хромосом в лимфоцитах при облучении i vi и i viv

1.2.3 Элиминация хромосомных аберраций после облучения i viv

1.3 Другие методы биологической дозиметрии

1.3.1 ЭПРспектроскопия эмали зубов

1.3.2 Гематологический метод

1.4 Калибровочные кривые
1.5 Практическое применение биодозиметрии в аварийных ситуациях
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Характеристики обследованных групп
2.2Типы аберраций хромосом
2.3 Методика культивирования лимфоцитов крови и приготовление препаратов для анализа нестабильных аберраций хромосом
2.4 Метод флуоресцентной i i гибридизации клеток I
2.5 Критерии учета и анализ аберраций
2.6 Метод
2.7 Статистическая обработка результатов.
Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Исследование нестабильных и стабильных аберраций i vi.
3.1.1 Результаты анализа нестабильных аберраций хромосом
3.1.2 Оценка калибровочной зависимости для метода
3.1.3 Результаты анализа аберраций хромосом методом I.
3.2 Исследование частоты нестабильных и стабильных аберраций хромосом у лиц с ОЛБ с целью последующей оценки индивидуальных доз.
3.2.1 Анализ выхода нестабильных аберраций в исследуемой группе лиц.
3.2.2 Анализ стабильных аберраций хромосом методом I у обследованных лиц.
3.2.3 Оценка индивидуальных доз у обследованных лиц.
3.2.4. Анализ соотношения степени тяжести ОЛБ и цитогенетических нарушений у обследованных лиц.
4.2 Повышенный уровень радиационных маркеров как индикатор радиационного воздействия
4.3 Роль цитогенетического метода биодозиметрии в уточнении диагноза острой лучевой болезни
4.4 Перспективы и проблемы использования стабильных аберраций транслокаций для ретроспективной биологической дозиметрии
Глава 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1 Спонтанный уровень хромосомных аберраций
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Целыо данной работы является сравнительная оценка использования стабильных и нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах крови лиц, подвергшихся аварийному облучению, для определения поглощенных доз в отдаленный период после облучения. Выполнить экспериментальное исследование с облучением i vi донорской крови уисточником Со для построения калибровочной дозовой зависимости выхода стабильных и нестабильных радиационноиндуцированных хромосомных аберраций. Сформировать группу лиц с острым аварийным облучением и известными индивидуальными дозами, осуществить забор крови для культивирования лимфоцитов и последующего цитогенетического анализа в течение отдаленного периода от 5 до лет после облучения. Провести статистический анализ динамики частоты нестабильных аберраций в течение отдаленного периода. Рассчитать индивидуальные дозы облучения для лиц из сформированной группы на основе анализа частоты нестабильных хромосомных аберраций, наблюдаемых в лимфоцитах крови вскоре после облучения, а также в отдаленный период после облучения. Сопоставить расчеты величин доз, полученных по ранним и поздним цитогенетическим данным с целью уточнения границ применимости метода ретроспективной биологической дозиметрии, основанного на анализе частоты стабильных аберраций транслокаций, определяемых методом I. Провести оценку возможности ретроспективной биологической дозиметрии на основе анализа выявляемых аберраций нестабильных и стабильных, с учетом полученных данных, в наблюдаемой группе аварийно облученных лиц. Впервые были получены данные о динамике частот нестабильных и стабильных аберраций хромосом у людей, подвергшихся аварийному облучению в больших дозах и проходящих ежегодное клиникоцитогенетическое обследование за период наблюдения более лет. Установлено, что, несмотря на длительный период времени после радиационного воздействия, в лимфоцитах крови присутствуют нестабильные аберрации хромосом в форме дицентриков и центрических колец, частота которых существенно превышает спонтанный уровень, что позволяет использовать эти показатели для ретроспективной биоиндикации радиационного воздействия в период до лет после облучения. Показано, что в лимфоцитах периферической крови облученных лиц в отдаленный пострадиационный период наблюдается высокая частота стабильных аберраций транслокаций, уровень которых значительно превышает уровень наблюдаемых нестабильных аберраций. Повышенная частота стабильных аберраций транслокаций в обследованной группе однозначно коррелирует со степенью тяжести перенесенного радиационного поражения и исходными дозами, что позволяет использовать данный тип аберраций для ретроспективной биологической дозиметрии. Впервые на представительной группе лиц показано, что стабильные аберрации транслокации, наблюдаемые в отдаленный период после облучения, являются достоверными радиационными маркерами, а их сравнительно высокий уровень позволяет использовать их для ретроспективной биологической дозиметрии острого облучения в диапазоне доз от 1 до Гр. Принимая во внимание определяющую роль транслокаций в онкогенезе, в частности, в развитии гемобластозов, наблюдаемый у обследованных лиц повышенный их уровень позволяет с определенной вероятностью оценивать риски развития онкологических заболеваний в отдаленный пострадиационный период. В целом, полученные новые данные послужат уточнению разрабатываемого метода ретроспективной биологической дозиметрии, а также выявлению лиц с повышенным уровнем стабильных аберраций и на их основе выделению групп повышенного канцерогенного риска, в частности, гемобластозов. В результате проведенных исследований уточнена область применимости использования различных типов аберраций хромосом стабильных и нестабильных для биологической дозиметрии оценена возможность надежной ретроспективной оценки доз по таким цитогенетическим показателям, как дицентрики и транслокации в отдаленные сроки после облучения. На примере обследованной группы лиц апробированы методы биодозиметрии, позволяющие определить полученные индивидуальные дозы облучения.