Комплексная система оценки антиоксидантной активности полифункциональных элементоорганических соединений и комплексов биометаллов

• Автор: Орлова, София Ивановна
• Шифр специальности: 02.00.16, 02.00.08
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 164 с. : ил.

Содержание
Введение

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Образование и функционирование активных

метаболитов кислорода

1.2. Количественное определение содержания активных метаболитов кислорода

1.3. Антиоксидантная активность

1.4. Методы определения антиоксидантной активности

1.5. Сравнение методов оценки антиоксидантной активности

ГЛАВА 2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

2.1. Синтетические эталонные антиоксиданты

2.2. 2,6дилетбутилфенолы с гетероциклическими заместителями
2.3. 2 и 2,6Изоборнилфенолы
2.4. Фосфорсодержащие элементоорганические соединения
2.5. Металлоорганические соединения на основе ферроцена
2.6. Комплексы металлов с дипиколиламином, содержащим 2,6дииеюбутилфенол
2.7. Нитронилнитроксилыгые радикалы и комплексы меди II
на их основе
2.8. Комплексы редокснеактивных металлов с радикальными лигандами
2.9. Комплексы сурьмы ингибиторы липоксигеназы
2 Результаты сравнительного анализа активности с использованием сетевой структуры методов оценки
ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
3.1. Материалы
3.2. Оборудование
3.3. Определение антирадикальной активности соединений
с использованием ДФПГтеста
3.4. Определение активности соединений в реакции переноса электрона с использованием теста
3.5. Ферментативное генерирование супероксид
анионрадикала в системе ксантинксантиноксидаза
3.6. Оценка способности соединений реагировать с гидроксильным радикалом, генерированном в реакции ГабераВейса
3.7. Определение антиоксидантной активности по способности соединений взаимодействовать с Н2
3.8. Оценка антиоксидантной активности соедииеггий в процессе ингибирования неферментативного пероксидного окисления
линолевой кислоты
3.9. Оценка антиоксидантной активности соединений в процессе ингибирования окисления олеиновой кислоты
3 Определение влияния соединений на активность фермента лилоксигеназы
3 Определение типа ингибирования фермента липоксигеназы
3 Оценка антиоксидантной активности соединений в
процессе ингибирования окислительной деструкции липосом
3 Оценка антиоксидантной активности соединений в
процессе ингибирования i vi ПОЛ
Выводы
Литература


Около 5 электронов, переносящихся в электронтранспортной цепи, могут участвовать в образовании Ог в комплексе I НАДФубихиион 3 оксидоредуктаза и в комплексе 1 убихинол ирН2цитохром с оксидоредуктаза. Как правило, далее трансформируется митохондриальной СОД в Н2О2, который преодолевает митохондриальную мембрану и попадает в цитоплазму 2, 7. Участок образования гидроксильного радикала не имеет строгой локализации. Имея короткий период полураспада К9 с, гидроксильный радикал образуется непосредственно в том участке, где будет использован. В случае окислительного стресса ОН образуется во всех участках, где созданы соответствующие условия. АМК в митохондрии. Липокснгената
Рис. Основные источники АМК в клетке 5. НАДФН оксидазы 1Мох присутствуют как в специализированных фагоцитарных клетках макрофаги, нейтрофилы и эозинофилы, так и в нефагоцитарных клетках и играют ключевую роль в патогенезе различных заболеваний 6, включая хронические гепатиты , . Ьох, р рЬох и вТРаБе Яас12, которые при стимулировании фагоцитарных клеток подходят к плазматической мембране и взаимодействуют с цитохромом Ь8, что приводит к образованию ферментативно активного комплекса НАДФН оксидазы, катализирующего восстановление до , который затем превращается в другие токсичные формы кислорода например, гидропероксидный и гидроксильный радикалы. НАДФН оксидазы нефагоцитарных клеток имеют схожую структуру и функции, субъединица др рЬохЫох2 заменена другим белком этого же семейства обычно гомологами 0x2. Основное различие в метаболизме фагоцитарных и нефагоцитарных клеток относится к окислительновосстановительной передаче сигналов и состоит в том, что нефагоцитарная НАДФН оксидаза постоянно активна, в результате чего происходит образование небольшого количества АМК. Увеличение активности НАДФН оксидазы и, следовательно, образования АМК происходит в ответ на ряд факторов и условий. Например, доказана сигнальная функция Н2, образованного НАДФН оксидазой. Пероксид водорода окисляет остатки цистеина в активном центре тирозинфосфатаз и других белков Рис. Рис. Тирозинфосфатаза человека и ее активный центр. Липоксигеназа является мультифункциональной оксидазой, участвующей в синтезе лейкотриенов из арахидоновой кислоты в ответ на те же стимуляторы, которые способны стимулировать НАДФН оксидазу, а именно факторы роста, цитокины, гормоны и условия гипоксии . Перечисленные медиаторы инициируют разрыхление мембраны и образование О2, и далее Н2Ог, при участии СОД . Данный фермент катализирует образование гидропероксида арахидоновой кислоты НРЕТЕ. Механизм его действия включает ряд окислительных реакций, в которых образуются свободнорадикальиые интермедиаты. Показано, что в процессе окисления арахидоновой кислоты при действии 5липоксигеназы образуется супероксид анионрадикал 8. АМК могут образовываться в ферментативных процессах в различных компонентах клетки с участием оксидаз, пероксидаз и моно и диоксигеназ, а также различных ферментов семейства цитохромов Р0. К таким ферментам относятся, например, ксантиноксидаза 7, , циклооксигеназа 7, и другие НАДФН зависимые оксидоредуктазы, в ходе каталитического цикла которых образуется О2. Подобным образом оксидазы пероксисом гликолатоксидазы, аминооксидазы, уреатоксидазы и др. И2 в процессе метаболизма субсгратов . Так, например, лизилоксидаза, катализирующая образование альдегидов предшественников сшивок в коллагене и эластине, увеличивает содержание Н2. Процесс пероксидного окисления липидов приводит к образованию из полиненасыщенных жирных кислот ПНЖК трх важных активных кислородсодержащих интермедиатов гидропероксидов , пероксильных радикалов и алкоксильных радикалов . Как и в случае с Н2, гидропероксиды не являются радикалами, но их разложение в присутствии переходных металлов приводит к образованию множества реакциониоспособных и токсичных продуктов, включая альдегиды и кетоны. Малоновый диальдегид, 4гидрокси2ноненаль и акролеин являются основными продуктами пероксидного окисления полиненасыщенных жирных кислот, таких как арахидоновая и линолевая кислоты , .