Лигандообменное сорбционное концентрирование на сверхсшитых полистиролах при ВЭЖХ определении антибиотиков, аминокислот и витаминов

• Автор: Руденко, Андрей Олегович
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 179 с. : ил.

1.2. Вспомогательные устройства, материалы и реагенты

1.3. Определение водорастворимых витаминов методом ОФ ВЭЖХ в комбикормах, премиксах комбикормов и БАД

Ш.3.1. Условия хроматофафического разделения водорастворимых витаминов.

III.3.2. Пробоподготовка реальных объектов комбикорма, премиксы, БАД при ВЭЖХанализе водорастворимых витаминов

1.3.3. Хроматографический анализ экстрактов реальных объектов.

III. 3.3.1. Определение коэффициентов извлечения водорастворимых витаминов

1.3.4. Выявление возможностей использования принципа лигандного обмена на стадии подготовки проб при определении водорастворимых витаминов .
1.4. Определение жирорастворимых витаминов методом ОФ ВЭЖХ в комбикормах, премиксах комбикормов и БАД.

1.4.1. Условия хроматографического разделения жирорастворимых

витаминов

1.4.1.1. Метод щелочного гидролиза сложноэфирных форм жирорастворимых витаминов

Ш.4.2. Пробоподготовка реальных объектов комбикорма, премиксы, БАД при анализе жирорастворимых витаминов.
Ш.4.2.1. Подготовка проб комбикорма, БАД и премиксов с применением эюидкостной экстракции изопропиловым спиртом.
1.4.2.2. Подготовка проб комбикорма, с применением щелочного гидролиза.
1.5. Совместное определение водо и жирорастворимых витаминов методом ОФ ВЭЖХ в комбикормах
III.5.1 Условия хроматографического разделения смесей водо и жирорастворимых витаминов
.1.1. ТФЭ смесей жирорастворимых витаминов на сорбенте
1.5.2. Подготовка проб и хроматографический анализ
комбикорма.
1.6. Определение антибиотиков тетрациклиновой группы и лсвомицетина методом ОФ ВЭЖХ в комбикормах и мясе птицы.
1.6.1. Условия хроматофафического разделения стандартных смесей антибиотиков.
1.6.2. Пробоподготовка реальных объектов комбикорма, мясо птицы при анализе антибиотиков.
III.6.2.1 Очистка и концентрирование с использованием обращннофазового сорбента С
1.6.2.2. Очистка и концентрирование с использованием сверхсшитого полистирола
II 1.6.2.3. Очистка и концентрирование с помощью ионогенного сверхсшитого полистирола
Ш.7. Хроматографический анализ аминокислот методом ОФ ВЭЖХ в мясс г птицы, комбикормах и биологических жидкостях
Ш.7.1. Хроматографическое определение аминокислот с предварительным
получением ФИТЦпроизводных
1.7.1.1. Условия хроматографического разделения ФИТЦпроизводных аминокислот
Ш.7.1.2. Пробоподготовка и хроматографический анализ ФИТЦ1 производных аминокислот в комбикормах, биожидкостях, мясе
птицы
1. Хроматографическое определение аминокислот с использованием принципа лигандного обмена в процессе ТФЭ.
1.7.2.1. Пробоподготовка и хроматографический анализ аминокислот в образцах комбикорма в условиях лигандного обмена.
Ш.8. Совместное определение витаминов и антибиотиков тетрацикл и новой группы и леовмицетина в комбикормах методом ОФ ВЭЖХ с УФ и массспектрометрическим детектированием. З
1.8.1. Условия хроматографического разделения стандартных смесей витаминов и антибиотиков.
1.8.2. Поиск условий массспскгрометрического детектирования при совместном определении витаминов и антибиотиков
1.8.3. Пробоподготовка и анализ комбикорма в условиях совместного определения витаминов и антибиотиков.
, Ш.9. Определение алкалоида эрготамина в крови крыс методом ОФ ВЭЖХ с
флуориметрическим и массспектрометрическим детектированием
Ш.9.1. Определение эрготмина методом ОФ ВЭЖХ с флуориметрическим
детектированием
Ш.9.2. Определение эрготамина массспектрометрическим методом.
1.9.2.1. Пробоподготовка крови и массспектрометрическое определение
I эрготамина.
IV. Выбор стратегии при подготовке проб природных объектов на
модельных системах.
IV. 1. Разработка способа определение водорастворимых витаминов с использованием модельных систем
1У.2. Разработка способа определения жирорастворимых витаминов на I модельных системах. ЮЗ
1У.З. Выбор условий совместного определения водо и жирорастворимых витаминов с использованием модельных систем .
IV.4. Поиск путей определения, антибиотиков тетрациклиновой группы и левомицетипа на модельных смесях. 1
IV.5. Определение ааминокислот на модельных смесях с использованием i дериватизации фенилизотиоцианатом ФИТЦ 1
IV.5.1. Использование лигандообменного сорбционного концентрирования при определении ааминокислот на модельных системах
IV.6. Совместное определение антибиотиков тетрациклиновой группы и левомицегина и витаминов на примере модельных систем
V. Практическое применение выявленных закономерностей при подготовке проб сложных природных объектов.
V Определение водорастворимых витаминов в комбикормах, премиксах комбикормов и БАД
V.2. Определение жирорастворимых витаминов в комбикормах, премиксах комбикормов и БАД
V.3. Совместное определение водо и жирорастворимых витаминов в комбикормах
V.4. Определение антибиотиков тетрациклиновой группы и левомицегина в комбикормах и мясе птицы.
V.5. Определение ааминокислот в комбикормах, мясе, экстрактах поджелудочной и предстательной желз.
V.6. Совместное определение витаминов и антибиотиков в комбикормах
V.7. Применение принципов комплексообразован ия при определении алкалоида эрготамина в крови крыс
VI. Выводы
VII. Список цитируемой литературы.
Список используемых сокращений
ОФ ВЭЖХ обращннофазовая высокоэффективная жидкостная хроматография
НФ ВЭЖХ нормальнофазовая высокоэффективная жидкостная хроматография
ВЭТСХ высокоэффективная тонкослойная хроматография
ГХ газовая хроматография
КЗЭ капиллярный зонный электрофорез
МЭКХ мицеллярная электрокинетическая хроматография
МЭЭКХ микроэмульсионная электрокинетическая хроматография
ЯМР ядерный магнитный резонанс
ТФЭ тврдофазная экстракция
БАД биологическиактивная добавка
ТФУК трифторуксусная кислота
ССП сверхсшитый полистирол
ЛОХ лигандообменная хроматография
ФИТЦ фенил изотиоцианат
ОФА офталевый альдегид
ФМХФ 9фторметилхлорформиат
МС массспектрометрический
ФЛ флуориметрический
i ii i i
I. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


При адсорбции на сверхсшитом полистироле реализуются два основных механизма удерживания определяемых соединений обращен нофазовый и механизм, включающий пк взаимодействия между адсорбентом и ненасыщенной системой адсорбата. В водных средах наиболее ярко проявляется обращеинофазовый механизм удерживания, включающий гидрофобные взаимодействия сверхсшитьтй полистирол ССП ведет себя как типичный обращеннофазовый адсорбент С. Особенностью полистирола в данных условиях является его более высокая гидрофобность по сравнению с классическими обращеннофазовыми адсорбентами на основе силикагеля с привитыми алкильными группами. Из водный среды гидрофобный сверхсшитый полимер прочно удерживает любые органические соединения с молекулярной массой ниже 0 Эа, в том числе и достаточно полярные аналиты, что нехарактерно для других гидрофобных сорбентов и подтверждает уникальную сорбционную активность ССП. В углеводородных средах удерживание органических соединений на ССП обусловлено дд. Таким образом, можно прогнозировать способность ССП концентрировать аналиты не только из водных сред, но и из органических растворителей. Из обычных органических растворителей наименьшим сродством к полистиролу обладают метанол и гексан, наибольшим толуол и дихлорэтан. Это уникальное свойство ароматического полимерного адсорбента открывает новые возможности для анализа следовых количеств этих соединений. Кроме характерных для сверхсшитого полистирола нанопор размером Л, этот материал имеет ещ и транспортные поры размером в несколько сотен А 7,8. Жсткость матрицы влияет и на сорбционные свойства ионитов 9. II. В настоящее время выявляются возможности использования сверхсшитых полистиролов в процессах разделения электролитов по ионитноэкстракционному механизму. Установлено, что сверхсшитые полимерные материалы позволяют разделять аналиты, не имеющие общих ионов 9. Эти сорбенты хорошо зарекомендовали себя при анализе конденсированных ароматических углеводородов и гетероциклов, при определении фенолов в сточных и питьевых водах ,,1, для удаления пестицидов из водных сред ,, при изучении сорбции паров органических растворителей алканов, ацетона, метанола и др. Так, например в приВЭЖХанализе полярных пестицидов метомил, пикпорам, деизопропилатразин, клопиралид, атрозин и пр. V в режиме тврдофазной экстракции. При этом, концентрирующий патрон был напрямую соединн с аналитической колонкой. Удалось достичь пределов обнаружения аналитов в 0. Следует отметить, что в настоящее время ПДК по атразину в водопроводной воде России составляет 2 , при этом, сверхсшитые полимерные материалы очищают воду от него до значений меньших 0,2 , то есть более, чем на четыре порядка 9. НУ8рЬеге1 в качестве сорбционного материала для предколоночного концентрирования группы пестицидов и фенольных соединений из сточной воды в режиме ТФЭ. Было показано, что использование сверхсшитого полимерного материала НУБрйеге позволяет достигать наибольших коэффициентов извлечения, а пределы обнаружения указанных аналитов составили 0, 0, мкгл. В для определения четырх тетради клиновых антибиотиков и двух хинолинов в речной и грунтовой воде был разработан чувствительный метод, сочетающий стадию ТФЭ с высокоэффективной жидкостной хроматографией с МСдетектированием Е. ТФЭ проводили на патронах, заполненных сверхсшитым полистирольным сорбентом. Для проведения отбирали по мл образцов воды. Получены высокие коэффициенты извлечения аналитов 2 , а предел обнаружения составил нгл. В основе лигандообменной хроматографии ЛОХ лежат координационные взаимодействия соединения разделяются в результате образования и последующего разрыва лабильных координационных связей с центральным атомом металла, влияющих на их распределение между подвижной и неподвижной фазами. В качестве лиганда могут выступать ней тральные молекулы или анионы, связанные с ионом металла путем обобществления неподеленной электронной пары донорного атома , Б, О молекулы органического лиганда, в результате чего и образуется координационная связь. Если связь металл лиганд достаточно лабильна, т. Лигандный обмен может происходить как в неподвижной, так и в подвижной фазах.