Новые экстракционные системы для определения α-аминокислот в водных средах

• Автор: Пахомова, Оксана Анатольевна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 148 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные способы извлечения и концентрирования

аминокислот

1.2. Применение экстракции в анализе аминокислот

1.3. Способы определения аминокислот

ГЛАВА И. МЕТОДИКА ЭКСПЕРИМЕНТА

2.1. Объекты исследования

2.2. Реактивы и оборудование

2.3. Методика экстракции аминокислот гидрофильными

растворителями и их смесями
2.4. Анализ экстрактов
ГЛАВА Ш. МНОГОФАКТОРНЫЕ МОДЕЛИ ЭКСТРАКЦИИ АМИНОКИСЛОТ ГИДРОФИЛЬНЫМИ РАСТВОРИТЕЛЯМИ
3.1. Построение математической модели экстракции
3.2. Оптимизация условий экстракции
3.3. Оптимизация состава трех компонентного экстрагента ГЛАВА IV. ЗАКЮМЕРНОСТИ ЭКСТРАКЦИИ АМИНОКИСЛОТ
4.1. Влияние структуры растворителей на межфазное
распределение аминокислот
4.1.1. Экстракция ацетоном
4.1.2. Экстракция эти л ацетатом
4.1.3. Экстракция спиртами
4.2 Влияние строения аминокислот на экстракцию
4.3. Экстракция аминокислот смесями растворителей
4.3.1. Экстракция аминокислот с гидрофильным углеводородным радикалом
4.3.2. Экстракция аминокислот с гидрофобным углеводородным радикалом
ГЛАВА V. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ В ВОДНЫХ
СРЕДАХ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЭКСТРАКЦИИ
5.1. Определение аминокислот в экс фак тах
5.1.1. Потенциометрическое титрование
5.1.2. Кондуктометрическое титрование
5.1.3. Анализ экстрактов методом капиллярного электрофореза
5.2. Экстракционнотитриметрическое определение
аминокислот
5.2.1. Экстракционнопотенциометрическое определение аминокислот в водных растворах
5.2.2. Экстракционнокондуктометрическое определение аминокислот в водных растворах
5.3. Анализ аминокислотных препаратов
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Концентрирование и разделение смеси аминокислот с разными и близкими по значению изоэлектрическими точками осуществляют электродиализом с ионообменными мембранами в 7секционном электродиализаторе с чередующимися катионо и анионообменными мембранами МК и МА . По полученным данным рассчитывают коэффициенты разделения аминокислот. Эффективное разделение пролина и валина достигается как на анионообменной так и на катионообменной мембранах. Экспериментальные данные подтверждают механизм транспорта аминокислот при , близких к изоэлектрической точке. Равновесная и кинетическая проницаемость ионообменников увеличивается с повышением степени набухания. Изменение гидратации анионообменной мембраны оказывает значительное влияние на процесс переноса ионов аминокислот . Методом ИКспектроскопии подтверждена перезарядка аминокислоты при переносе, а также зафиксировано изменение гидратационных характеристик мембраны при электродиализе аминокислот. Для концентрирования ароматических аминокислот из продуктов микробиологического синтеза применяют ультрафильтрацию. Аминокислоты переводят в азо или нитрофенилазопроизводные и концентрируют на ацетилцеллюлоидных или полисульфонамидных мембранах. Следует отметить сложность десорбции аминокислот . В биохимии широко применяется высоковольтный электрофорез на инертных носителях. Разделение аминокислот происходит под действием наложенного электрического тока, инертные носители полиакриламидный гель или тонкие слои целлюлозного порошка. Разделение проводят в течение 0,5 2 ч при напряжении В в зависимости от суммарных зарядов амфолитов и их молекулярных масс. В электрическом поле ионы, имеющие при данном отрицательный заряд, мигрируют к аноду, положительный к катоду. Высушенную электрофореграмму проявляют раствором нингидрина. Значение определяется величиной рК диссоциирующих групп молекул аминокислот, входящих в состав смеси. При 6,4 глутамат и аспартат концентрируются на аноде и разделяются за счет различия в молекулярных массах. Лизин, аргинин и гистидин перемещаются в противоположном направлении глицин, лейцин и пролин локализуются в месте нанесения анализируемого образца . Распространенный метод концентрирования аминокислот жидкостная экстракция, характеризуется универсальностью, возможностью определений в широком диапазоне концентраций, сочетаемостью с различными способами анализа концентрата, экспрессностью ,. На основании физикохимических исследований экстракционных процессов разработаны схемы извлечения аминокислот, апробированные на технологических растворах микробиологических производств . Для концентрирования аминокислот применяется ионообменная , мембранная и твердофазная экстракция. Разработан способ выделения аминокислот из культуральной жидкости, основанный на ионообменной экстракции раствором динонилнафталиисульфокислоты. Основным фактором, влияющим на зависимость селективности извлечения от обменной емкости ионита, является характер функциональных групп в фазе ионита жидкого или полимерного. Сульфокислоты как экстрагенты более селективны по отношению к аминокислотам, чем сульфокатиониты . Для экстракции аминокислот из многокомпонентных растворов характерен эффект соэкстракции, который уменьшается при добавлении полярного растворителя в фазу экстрагента. Фактор разделения лейцина, изолейцина, валина и лизина равен 1 в широком диапазоне . Аналогичную зависимость отмечают при разделении и других алифатических и ароматических аминокислот . Мембранная экстракция эффективный метод извлечения и концентрирования некоторых ааминокислот из разбавленных водных растворов С 5,5 КГ4 2,7 2 мольдм3. В основе находится перераспределение вещества в системе трех жидких фаз, где одна жидкость мембрана разделяет два несмешивающихся с ней различных по составу растворов , . Жидкая мембрана может быть водным раствором и взаимодействовать с двумя органическими фазами, наиболее распространены системы вода органическая мембрана вода , . Для экстракции лизина, аргинина, гистидина, метионина и глицина предложена экстрагирующая эмульсия, органическая мембрана раствор ди2этилгексилфосфорной кислоты в инертном разбавителе бензол, принимающая фаза раствор НС1 .