Определение некоторых биологически-активных веществ, основанное на эффекте сенсибилизированной флуоресценции в организованных средах

• Автор: Неврюева, Наталия Владимировна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 194 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список условных обозначений и сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литерату ры

1. Методы определения антибиотиков

1.1.1 Хроматографические методы определения антибиотиков

1.1.2. Фотометрические методы определения антибиотиков

1.1.3. Фармакопейные методы определения антибиотиков

1.1.4. Флуоримстрическое определение антибиотиков

1.2. Методы определения аминокислот за 5 лет

1.3. Методы определения антикоагулянтов

Глава 2. Экспериментальная часть
2.1. Реактивы
2.2. Приготовление микроэмульсий
2.3. Определение квантового выхода флуоресценции
2.4. Аппаратура и техника измерений
Глава 3. Сенсибилизированная флуоресценция лантаноидов в
присутствии антибиотиков в организованных средах
3.1. Флуоресценция антибиотиков в водных и организованных средах
3.2. Изучение состава и устойчивости бинарного и смешанолигандного хелатов европия с антибиотиками в водных и мицеллярных средах ПАВ.
3.3. Сенсибилизированная флуоресценция европия и тербия
с антибиотиками
3.4. Влияние второго лиганда на интенсивность флуоресценции
хелатов лантаноидов с антибиотиками
3.5. Влияние организованных сред на флуоресценцию хелатов РЗЭ
антибиотик второй лиганд
3.6. Влияние микроэмульсий на интенсивность флуоресценции смешаннолигнадного комплекса тербия с флюмеквином и фенантролином
3.6.1. Влияние на сенсибилизированную флуоресценцию тербия
3.6.2. Выбор оптимальных условий флуоресценции системы
3.6.3. Градуировочный график для определения флюмеквина в микроэмульсии ноктанводанпентанолДДС
3.7. Градуировочные графики для определения антибиотиков.
Глава 4 Сенсибилизированная флуоресценция лантаноидов с производными кумарина
4.1. Флуоресцентные свойства антикоагулянтов.
4.2. Влияние организованных сред на флуоресцентные свойства кумаринов
4.3. Сенсибилизированная флуоресценция производных кумаринов в
присутствии органических соединений
4.4. Флуоресцентные свойства комплексов кумаринов с лантаноидами.
4.5.Влияние второго лиганда на сенсибилизированную
флуоресценцию бинарных хелатов кумаринов
4.6. Флуоресцентные свойства лантаноидных комплексов кумаринов
в мицеллярных растворах ПАВ
4.7.Выбор оптимальных условий сенсибилизированной
флуоресценции кумаринов
4.8.Выбор оптимальных концентраций компонентов систем Ей КУМ
ТТА, ТЬ3 КУМ Фен.
Глава 5. Сенсибилизированная флуоресценция лантаноидов с
аминокислотами
5.1 Сенсибилизированная флуоресценция лантаноидов с
аминокислотами
5.2 Влияние второго лиганда на интенсивность сенсибилизированной флуоресценции комплексов лантаноидов с аминокислотами 5. 3. Влияние мицеллярных растворов ПАВ па сенсибилизированную флуоресценцию хелатов ОсчРгоТТА и Еи3РгоТТА
5.4. Выбор оптимальных условий сенсибилизированной
флуоресценции исследуемых систем
ГЛАВА 6. Определение флюмеквина методом ВЭЖХ с флуорнметрнческим детектированием
6.1. Выбор неподвижной и подвижной фазы
6.2. Влияние природы и концентрации ПАВ .
6.3. Влияние циклодекстринов
6.4. Влияние кислотности среды на селективность хроматографирования
6.5. Градуировочный график для определения ФЛ в присутствии уЦД
ГЛАВА 7. Использование сенсибилизированной флуоресценции лантаноидов в мицеллярных растворах ПАВ для определения 4 биологичсскиактивных веществ.
7.1. Определение флюмеквина в мышечных тканях и плазме
крови курицы.
7.2. Определение норфлоксацина в лекарственных препаратах
7.3. Определение оксолиниевой кислоты в плазме крови
флуориметрическим методом.
7.4. Определение доксициклина в плазме крови
7.5. Определение доксициклина в лекарственной форме
7.6. Определение варфарина в почве
Выводы
Литература


Диссертация состоит из. Библиография включает 1 источник. Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель и задачи исследования, изложены новизна, практическая значимость полученных результатов и основные положения, выносимые на защиту. В главе 1 дано обобщение и систематизация литературных данных по современным методам определения антибиотиков, аминокислот и антикоагулянтов в лекарственных препаратах, биологических жидкостях, тканях и объектах окружающей среды, проанализированы их достоинства и недостатки. В главе 2 описаны использованные в работе реактивы и оборудование. Третья глава посвящена изучению влияния второго лиганда, мицелл ПАВ на сенсибилизированную флуоресценцию хелатов тербия и европия с антибиотиками НОР, ФЛ, ОК, НК, ЛФ и ОФ. В четвертой главе описано определение кумаринов ВФ, КУМ и ОКМ, основанное на использовании комплексов с переносом энергии в присутствии вторых сенсибилизирющих агентов. В пятой главе оценена возможность флуоресцентного определения аминокислот, в частности i и , используя комплексообразование в
организованных средах. В шестой главе приведены результаты хроматографического определения фторхинолонов ЦФ и ФЛ в организованных средах. В приложении приведены грдуировочные зависимости определения исследуемых веществ, выбор оптимальных концентраций комплексообразования, а так же кривые насыщения хелата ДЦЕи3. ГЛАВА 1. Анализ литературы показал, что для определения антибиотиков класса хинолонов и фторхинолонов наиболее часто применяют хроматографический, флуориметрический, фотометрический и титриметрический методы анализа. Реже используют электрохимические и микробиологические методы. Каждый из этих методов предназначен для определенной группы объектов анализа, содержание определяемого компонента в которых соответствует возможностям метода. Фармакопейным является микробиологический метод, однако изза низкой чувствительности и плохой избирательности он используется редко. Лидируют два метода хроматографический и флуориметрический. Неоспоримое преимущество хроматографического метода возможность одновременного определения сразу нескольких органических веществ, даже если они относятся к одному классу соединений. В то же время, использование токсичных растворителей, дорогостоящего оборудования и продолжительное время определения ограничивает его применение в рядовых аналитических лабораториях. Флуориметрический метод отличается высокой чувствительностью, достаточно хорошей селективностью, доступностью и простотой. Хроматографические методы определения антибиотиков представлены в основном методами ВЭЖХ и ТСХ. Использование метода ТСХ объясняется простотой, экономичностью и быстротой разделения смесей веществ 1. Наибольшее число статей посвящено ОФ ВЭЖХ. Достоинством ВЭЖХ является не только возможность определения антибиотика в сложной матрице, но и достаточно низкие пределы обнаружения, величины которых определяются типом детектора. В настоящее время для определения хинолонов и фторхинолонов методом ВЭЖХ используют УФ , флуоресцентный , фотодиодный , массспектрометрический и диодноматричный детектор . Таблица 1. Сыворотка собачьей крови, прсдста тельные ткани ЦФ, ЭФ Ацетоиитрил этанолвода УФ А. Плазма ЦФ. ЭФ ОФ ион парная вэжх Метанол мМ тетрабутил аммония гидроксид , об. Сырье и инъекции ЭФ ОФ 0,1М ацетат 3 р . Уоб. Упф 1. УФ . Свинина, крольчатина ЭФ. ЦФ С8, градиентный Ортофосфат трнэтнламин ацетоиитрил УФ Х 8нм. Цельная кровь курицы ЦФ 1пецЦ 0x4мм С8,5 мкм. Лимонная кта 0. Мметанол ацетоиитрил , обУоб. Упф1. УФ Х 5нм. Рыба ФЛ. ОК ОФ Метанол фосфатный буфер рИЗ, , об. УФ . Лекарст венные формы ЭФ. ЦФ i Метанол ацетшштрил тстрабтил аммония гидроксид КН2Р . V гм. Флуорнм. ФЛ и его производные i В изократкчсский Флуорим. Почечная ткань свиньи ФЛ ОФ Лцстонитрил2. М НС4 2. Флуорим. Плазма крови НОР, ЭФ. ЦФ, ФЛ ОФ НРАС Н2Р ацетонитрил , об . Флуорим. Ткан мышц свиньи ЭФ. ЦФ ОФ Водный буфер ацетонитрпл , об . Флуорнм. Молоко ЭФ. ЦФ. ДФ, СФ ОФ, Ii, изократический 2 уксусная кислота ацетонитрпл Флуорим. Xi5.