Вольтамперометрическое определение сульфгидрильных соединений в биологических объектах и пищевых продуктах

• Автор: Алиева, Эльмира Шабановна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Краснодар
• Количество страниц: 122 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1 Сульфгидрильные соединения и их свойства.

1.2 Титриметрические методы определения сульфгидрильных соединений в объектах окружающей среды.

1.3 Спектральные методы анализа объектов окружающей

среды на содержание сульфгидрильных соединений

1.4 Хроматографические методы анализа объектов окружающей среды при определении сульфгидрильных соединений
1.5 Электрохимические методы определения сульфгидрильных соединений в объектах окружающей среды
1.6 Другие методы газометрическис, термометрические, кинетические, радиохимические, микробиологические анализа объектов окружающей среды при определении сульфгидрильных соединений

1.7 Электрохимическое поведение сульфгидрильных соединений

на электродах различного типа.
1.8 Анализ литературного обзора и постановка задачи.
2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
2.1 Используемые реактивы и оборудование
2.2 Методика определения концентрации сульфгидрильных соединений методом вольтамперометрии
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Оптимизация условий формирования РПЭ для определения цистеина
3.2 Электрохимическое исследование процессов на РПЭ.
3.3 Вольтамперометрическое определение сульфгидрильных
соединений с использованием РПЭ на стсклоуглеродной подложке
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Количественное определение сульфгидрильных соединений в биологических объектах, а также пищевых продуктах, фармацевтических препаратах, косметических средсгвах производится различными методами, и до сих пор актуальной проблемой является разработка высокочувствительных, селективных, экспрессных, экологически чистых методов определения соединений, содержащих тиольные группы. При разработке методик определения БНгрупп в качестве простейшей модели сульфгидрильных соединений используют Ьцистеин ЬСуБН. Глческое порошкообразное вещество со слабым специфически, апахом. Таким образом, цистсин является амфолитом. Он хорошо растворим в кислой и щелочной средах изза образования солей, а около изоэлсктрической точки его растворимость ничтожна. При диссоциации по карбоксильной группе СООН рК 1,, по аминогруппе ИНз рК2 8,, по сульфгидрильной БН рКз ,. Для цистеина солянокислого эти показатели соответственно равны 1, 8, , 5. Цистеин может реагировать с участием карбоксильной группы этернфикацня, декарбоксилирование, аминогруппы ацилирования, реакция с азотистой кислотой, сульфгидрильной группы и одновременно карбоксильной и аминогруппы циклизация, реакция с нингидрином. Водные растворы цистеина нестойки, окисляются кислородом воздуха с выпадением осадка нерастворимый иистин, разлагаются при нагревании. В нейтральном или щелочном растворе, особенно в присутствии металлов, цистеин быстро окисляется в цистин. Характерные химические свойства цистеина обусловлены наличием в его молекуле реакционноспособной сульфгидрильной группы БН. Эта группа может окисляться как спонтанно, так и под влиянием специальных ферментов. М металл. Для определения цистеина существенное значение имеют свойственные , ему химические реакции. НБСНгр рО ЫН3 О
подразделить на следующие группы газометрические, титримстрические,
спектральные, кинетические, радиохимические, хроматографические, электрохимические, микробиологические . Однако, иодометричсский метод не пригоден для широкого применения ввиду значительного влияния среды, температуры, концентрации титранта, а также возможность протекания окисления в различных направлениях. Попытки разработать условия, в которых тиольная группа вела бы себя одинаково в различных соединениях, оказались неудачными. Меркуриметрический метод, предложенный Фритцем и Пальмером , в отличие от других методов, нашел практическое применение. В этом методе меркаптан титруют перхлоратом ртути II в ацетоновом или водном растворе в присутствии буфера и с тиокетоном Михлсра в качестве индикатора. При этом определению меркаптанов не мешают органические и неорганические хлориды и бромиды, ненасыщенные соединения, а также другие ссрусодержащие функциональные группы. Главные трудности определения обусловлены присутствием элементарной серы, неорганических сульфидов, иодидов, цианидов и тиокарбоксильных соединений. II , , фсррицианида калия . Все эти методы основаны на окислении цистеина в цистин. Реакция комплексообразования лежит в основе титриметрического метода определения гидрохлорида Ьцистсина, основанного на титровании аминокислоты стандартным раствором сульфата никеля в присутствии 1пиридил2азонафтола2 в качестве индикатора. В результате реакции образуется комплексное соединение Ы1 цистеин состава 23 . Однако этот метод не отличается высокой чувствительностью и не позволяет определять цистеин в присутствии других аминокислот. Методами прямого и обратного титрования исследовано окисление цистеина действием хлорамина Т и дихлорамина Т. Метод обратного титрования стандартным раствором тиосульфата непригоден для определения цистеина . В работе предложен титримстричсский метод определения меркаптанов и серусодержаших аминокислот окислением щелочным раствором КМп при комнатной температуре в присутствии ионов бария II. В ходе титрования МпОГ восстанавливается до МпХ Барий осаждается в виде соли бария, что предотвращает дальнейшее восстановление марганца VII до МпОг. Титрование ведут до исчезновения розовой окраски раствора. Известны способы определения цистеина методом обратного титрования. По одной методике к раствору цистеина прибавляют оный избыток слабощелочного раствора оиодозобензоата калия и раствор аскорбиновой кислоты, избыток которой оттитровывают раствором иода. Другая методика основана на окислении цистеина раствором 1хлорбензотриазола в присутствии .