Усовершенствование элементов технологии получения растений - регенерантов моркови столовой (Daucus carota L.) в культуре пыльников и микроспор

• Автор: Демидкина, Марина Александровна
• Шифр специальности: 06.01.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 160 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Гаплоидия

1.2. Факторы, влияющие на продуктивность андрогенеза

1.2.1. Генотип

1.2.2. Физиологические факторы

1.2.3. Химические факторы

1.3. Характеристика удвоенных гаплоидов
1.3.1. Способы удвоения гаплоидов
1.4. Ботанические и биологические особенности Daucus carota L
1.4.1. Эмбриологические и кариологические особенности
1.4.2. Строение пыльника моркови
1.4.3. Развитие пыльника моркови in vivo
1.4.4. Микроспорогенез и микрогаметогенез у моркови
1.4.5. Типы микроспор и их способность к андрогенезу
1.5. Условия культивирования
1.5.1. Методы изолирования микроспор
ГЛАВА 2. ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ, МАТЕРИАЛ,
МЕТОДИКА И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ РАБОТЫ
2.1. Цель, задачи исследований
2.2. Схема исследований
2.3 Почвенные и агрохимические условия проведения исследований
2.3.1 Погодные условия в период проведения исследования
2.4. Материалы и методики проведения исследований
2.4.1. Исходный материал
2.4.2. Методика проведения исследований
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Эффективность способов получения культуры микроспор
моркови столовой
3.1.1. Доращивание зонтичков в лабораторных условиях
3.1.2. Растрескиваемость пыльников в жидкой питательной среде в
зависимости от концентрации сахарозы
3.1.3. Механическое выделение микроспор из пыльников в жидкой
питательной среде
3.2. Влияние концентрации микроспор на эмбриогенез моркови столовой

3.3. Влияние температурной предобработки бутонов на эмбриогенез моркови в культуре микроспор
3.4. Влияние наночастиц серебра на эффективность эмбриогенеза моркови столовой
3.4.1. Влияние наночастиц серебра на донорные растения моркови столо-

3.4.2. Влияние наночастиц серебра на индукцию эмбриогенеза моркови
столовой в культуре микроспор
3.5. Подбор питательных сред для культивирования микроспор моркови
столовой
3.6. Влияние сахарозы на рост и развитие микроспор в двухслойной питательной среде при введении в культуру in vitro
3.7. Усовершенствование элементов методики культуры пыльников моркови столовой
3.7.1. Подбор оптимальных условий предобработки донорных растений
3.7.1.1. Влияние нитрата серебра на эффективность эмбриогенеза моркови
столовой в культуре пыльников
3.7.1.2. Влияние обработки донорных растений различными веществами на
индукцию эмбриогенеза моркови в культуре пыльников
3.7.1.3. Влияние обработки донорных растений препаратами Энергия -Ми
Циркон на начало каллусогенеза моркови в культуре пыльников
3.7.2. Влияние нитрата серебра на индукцию эмбриогенеза моркови столовой В культуре бутонов и ПЫЛЬНИКОВ
3.7.2.1. Влияние нитрата серебра на индукцию эмбриогенеза моркови в культуре бутонов
3.7.2.2. Влияние нитрата серебра на индукцию эмбриогенеза моркови в культуре пыльников
3.8 Получение растений-регенерантов моркови столовой »
3.8.1. Регенерация растений - регенерантов моркови столовой из каллуса
3.8.2. Укоренение побегов моркови, полученных в культуре пыльников
3.8.3. Адаптация растений - регенерантов моркови
ГЛАВА 4. ОЦЕНКА РАСТЕНИЙ - РЕГЕНЕРАНТОВ МОРКОВИ СТОЛОВОЙ, ПОЛУЧЕННЫХ В КУЛЬТУРЕ ПЫЛЬНИКОВ
4.1. Идентификация гаплоидов моркови
4.2. Характеристика растений - регенерантов Rq
4.2.1. Характеристика растений - регенерантов R j
ГЛАВА 5. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПОЛУЧЕНИЯ РАСТЕНИЙ - РЕГНЕРАНТОВ МОРКОВИ СТОЛОВОЙ В КУЛЬТУРЕ
ПЫЛЬНИКОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННОЙ
ПРАКТИКЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Сокращенное Полное название
название
ГНУ ВНИИО
Государственное научное учреждение Всероссий-
Россельхозакадемии
ский научно - исследовательский институт овощеводства Россельхозакадемии
МС питательная среда Мурасиге - Скуга (Murahige Т.,
Skoog F.,1962)
МСм питательная модифицированная среда (Masuda К.,
KikutaY., 1981)
МСп питательная среда (Poliakov А.V., 2001)
2,4 - Д 2,4 - дихлорфеноксиуксусная кислота
НЧ наночастицы
КИН кинетин
а-НУК а - нафтилуксусная кислота
ДМСО диметилсульфоксид

ток тапетума, что приводит к образованию стерильной (абортивной) пыльцы.
Второй период определяется началом дифференциации соматических тканей, центральным расположением ядра и формированием вакуолей в микроспорах. Как правило, в этом случае соматические ткани 'остаются без изменений, за исключением тапетума, клетки которого при культивировании подвергаются лизису, а из микроспор образуется стерильная пыльца. Размеры пыльника практически не увеличиваются.
Третий период наиболее благоприятен для получения андрогенных эмбриоидов из микроспор. В этот период более выражены процессы поляризации микроспор и дифференцировки тканей стенок пыльника, что делает маловероятным процесс каллусообразования из соматических клеток. Микроспоры же находятся в том критическом состоянии, когда возможен переход с гаметофитного пути развития на спорофитный путь (Тюкавин Г.Б., 2007).
Четвертый период в развитии пыльников характеризуе тся наличием в них двуклеточной и трехклеточной пыльцы. Процессы дифференцировки соматических тканей к этому времени почти завершены, и пыльца уже миновала критическую стадию развития. При культивировании in vitro таких пыльников морфологических изменений, как в соматических тканях, так и в пыльце, не наблюдается. Размеры пыльников сохраняются прежними.
Таким образом, проведенные исследования дают возможность заранее предвидеть пути морфогенеза в культивируемых in vitro пыльниках моркови. Необходимым условием для этого является не только знание стадии развития микроспор, но и степени дифференцирования тканей стенок. (Тюкавин Г.Б., 2007).