Разработка элементов технологии получения растений-регенерантов капусты брокколи (Brassica oleracea L. convar. Botrytis (L.) Alef. var. cymosa Duch.) в культуре семяпочек

• Автор: Старцев, Сергей Викторович
• Шифр специальности: 06.01.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : ил.

Оглавление

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Понятие «гаплоид» и его использование в научных исследованиях и селекционном процессе

1.2. Биологическое описание и ботаническая характеристика растений капусты

1.2.1. Характеристика семейства Капустные -Brassicaceae Burnett

1.2.2. Характеристика капусты брокколи

1.2.3. Географическое распространение видов рода Brassica L

1.2.4. История изучения рода Brassica L

1.3. Культура семяпочек и ее использование в селекции сельскохозяйственных растений
1.4. Этапы культуры семяпочек и их особенности
1.4.1. Подбор условий содержания донорных растений и их генетические особенности
1.4.2. Определение стадии развития экспланта
1.4.3. Индукция гаплоидных регенерантов
1.4.4. Перевод гаплоидных растений на диплоидный уровень
1.4.5. Микроклоналыюе размножение
1.4.6. Укоренение растений-регенерантов
1.4.7. Адаптация растений-регенерантов
2. МЕТОДИКА, ЦЕЛИ, ЗАДАЧИ И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Цель и задачи исследований
2.2. Схема исследований
2.3. Условия проведения исследований
2.3.1. Почвенные и агрохимические условия проведения исследований
2.3.2 Погодные условия вегетационных периодов

2.4. Материал и методика проведения исследований
2.4.1. Исходный материал
2.4.2. Методика лабораторных опытов
2.4.2.1. Приготовление питательной среды
2.4.2.2. Приготовление концентратов регуляторов роста
2.4.2.3. Условия выращивания донорных растений
2.4.2.4. Подготовка исходных эксплантов (завязей)
2.4.2.5. Укоренение растений-регенерантов
2.4.3. Проведение оценки исходного и полученного в ходе исследований материала
3. УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ РАСТЕНИЙ-РЕГЕНЕРАНТОВ КАПУСТЫ БРОККОЛИ В КУЛЬТУРЕ ЗАВЯЗЕЙ И СЕМЯПОЧЕК
3.1. Морфогенез изолированных завязей при культивировании in vitro
3.2. Морфогенез изолированных семяпочек в культуре in vitro
3.3. Микроклональное in vitro размножение морфогенных почек и побегов
3.4. Получение растений-регенерантов, их укоренение и адаптация
4. ОЦЕНКА РАСТЕНИЙ-РЕГЕНЕРАНТОВ КАПУСТЫ БРОККОЛИ, ПОЛУЧЕННЫХ В КУЛЬТУРЕ ЗАВЯЗЕЙ И СЕМЯПОЧЕК
4.1. Характеристика растений-регенерантов R] по морфологическим признакам
4.2. Биохимический анализ растений-регенерантов Ri
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННОЙ
ПРАКТИКЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
Сокращенное Полное название
название
ГНУ вниио Государственное научное учреждение Всероссийский научно — исследовательский институт овощеводства Россельхозакадемии
БА 6-бензиламинопурин (бензиладенин)
ТДА (14-фенил-М'-(1,2,3-тиадиазол-5-ил)мочевина)
имк индолилмасляная кислота
ИУК ß-индолил-З-уксусная кислота
НУК а-нафтил-уксусная кислота
2,4-Д 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота
2,4,5-Т 2,4,5-трихлорфеноксиуксусная кислота
ХФУ 4-хлорфеноксиуксусная кислота
ТХП (пиклорам) 4-амино-3,5,6-трихлорпиколиновая кислота
кинетин 6-фурфуриламинопурин
2ip 6-(-у, у, диметилаллиламино)-пурин
БДС (BDS) питательная среда (Dunstan D.I., Short К.С., 1977)
MS питательная среда Мурасиге - Скуга (Murashige Т., Skoog F., 1962)

света, повышающая фотосинтез, и как следствие, стимулирующая развитие листьев. Такое явление преодолевают по мнению некоторых исследователей, с помощью фольги, которой оборачивают нижнюю часть пробирок или добавлением в питательную среду активированного угля (Hu C.Y., Wang Р.J., 1983). Есть мнение, что укоренение можно индуцировать, поместив проросток в нестерильные условия грунта (Kartha К. К., 1981; Debergh P.C., Maene L.J., 1981). Для некоторых видов растений укоренение стимулируют с помощью повышенной влажности и регулярного опрыскивания водой при 25-35°С, аналогичный результат достигается при обработке побегов ауксином (Debergh P.C., Maene L. J., 1981).
По методике A.B. Полякова, О.Ф. Шарафовой, С.А. Зонтиковой (2009), для капусты белокочанной, рекомендуется снижать в среде для укоренения концентрацию минеральных и органических веществ, для обеспечения хорошей адаптации растений-регенерантов к неблагоприятным факторам внешней среды и нормального роста и развития при пересадке в почву.
Согласно методическим рекомендациям репродуктивной биологии в селекции овощных культур рода Brassica L. (Бунин М.С. и др., 2003), так же практикуется подращивание и укоренение растений на фильтровальных мостиках в пробирках размером 22 X 200 мм на жидкой модифицированной среде Мурасиге и Скуга МСм (Masuda К. et. al., 1981) с содержанием 0,2 мг/л кинетина. В данном случае образование корней наблюдалось через 1-2 недели.
1.4.7. Адаптация растений-регенерантов
Успешная адаптация растений-регенерантов к естественным условиям среды зависит от ряда факторов, таких как: газовый состав, влажность, освещенность. Адаптацию растений проводят с использованием микропарников, в которых растения-регенеранты высаживают в торфяные таблетки или кассеты, набитые почвенным субстратом.
В крышках культивационных сосудов с растениями капусты, имеющими хорошо развитый стебель и сформировавшуюся корневую