Экспериментально-биохимическое исследование индукции нервной ткани и хрусталика

• Автор: Михайлов, Александр Трофимович
• Шифр специальности: 03.00.11
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 435 c. : ил

ОГЛАШЕНИЕ

Глава I. МОРФОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ТКАНЕВЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ
1.1. Терминологическое определение морфогенетических тканевых взаимодействий
1.2. Основные критерии морфогенетических тканевых взаимодействий
1.3. Морфогенетические тканевые взаимодействия в развитии ЦНС. I Л
1.4. Морфогенетические тканевые взаимодействия в развитии хрусталика
Глава 2. "МОРФОГЕНЫ" - МЕДИАТОРЫ МОРФОГЕНЕТИЧЕСКИХ
ТКАНЕВЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ
2.1. Отношение к понятию морфоген
2.2. Естественные морфогены
2.3. Гетерогенные ("чужеродные") морфогены
Глава 3. НЕЙРАЖЗУЩИЙ И ЛИНЗОИНДУВДРШЦШ АГЕНТЫ:
НАПРАВЛЕНИЕ И МЕТОДОЛОГИЯ ПОИСКА
3.1. Подходы к идентификации нейрализующего и
3.2. Композиционное построение работы
3.3. Объекты, материал и методы исследования
3.3.1. Животные, получение зародышей, выделение тканей и органов
3.3.2. Органная культура in vitro
3.3.3. Биохимические методы

3.3.4. Иммунохимические методы

Глава 4. ЭКТОДЕРМА РАННЕЙ ГАСТРУЛЫ RAHA TEMPORARIA
КАК ТЕСТ-ТКАНЬ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ НЕЙРАЛИЗУЮ-ЩЕГО И ЛИН30ИНДУЦИРУЩЕГ0 АГЕНТОВ
4.1. Культивирование эктодермы гаструлы R.
temporarla in vitro без воздействий
4.2. Культивирование эктодермы ранней гаструлы
R. temporaria in vitro в присутствии циклических нуклеотидов или "чужеродных"
белков
4.3. Сравнительный анализ белков эктодермы ранней гаструлы и нейрального зачатка
4.3.1. Изоэлектрофокусирование (ИЭФ)
4.3.2. sds -электрофорез ( SDS -ЭФ)
4.3.3. Иммунохимический анализ
Глава 5. ИДЕНТИФИКАЦИЯ МОРФОШЕТИЧЕСКИ-АКТИВНЫХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ СЕТЧАТКИ И ГОЛОВНОГО МОЗГА КУРИНЫХ ЗАРОДЫШЕЙ
5.1. Критерии идентификации индуцированных структур и условия биотестирования экстрактов
5.2. Идентификация экстрактов с высокой морфогенетической активностью
Глава 6. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МОРФОГЕНЕТИЧЕСКИ-АКТИВНЫХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ СЕТЧАТКИ И МОЗГА КУРИНЫХ ЗАРОДЫШЕЙ
6.1. Природа агентов, определяющих морфогенетическую активность экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей
6.1.1. Определение доз ферментов и условий гидролиза
6.1.2. Влияние ферментативной обработки на индуцирующую активность экстрактов

6.2. Влияние ультрацентрифугирования на морфогенетическую активность экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей
6.3. Сравнительный биохимический анализ экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей
6.4. Фракционирование экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей и оценка морфогенетической активности фракций
Глава 7. ЭКСНЕРИМЕНТАЛЬНО-БИОХШИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ИДЕНТИФИКАЦИИ МОРФОГЕНЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГЛАЗНЫХ ПУЗЫРЕЙ КУРИНЫХ ЗАРОДЫШЕЙ
7.1. Культивирование глазных пузырей куриных зародышей с эктодермой ранней гаструлы Rana temporarla in vitro
7.2. Электрофоретическое исследование белков глазных зачатков и сетчатки у ранних зародышей кур
7.3. Определение морфогенетической активности электрофоретических фракций из глазных пузырей зародышей кур
Глава 8. ИММУНОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РЕАЛИЗАЦИИ ИНДУКЦИИ
ХРУСТАЛИКА И ЗАЧАТКА ЦНС В РАЗВИТИИ АМФИБИЙ
8.1. Анализ появления кристаллинов после индукции
хрусталика in vivo и in vitro
8.1.I. Электрофоретическая и иммунохимическая характеристика кристаллинов взрослых амфибий
8.1.2. Иммунохимическая идентификация кристаллинов в хрусталике зародышей и в эксплантатах
8.2. Иммунохимический анализ антигенов эктодермы гаструлы и нервной пластинки в развитии амфибий

нуждается в дополнительных воздействиях, в частности, развивающейся сетчатки. Линзоиндуцирующая активность, наиболее выраженная в глазных пузырях (бокалах), резко снижается с началом гистологической дифференцировки сетчатки ( Takeuchi, 1963;
Wedlock, McCallion, 1968; Starre, 1972, 1977). Сетчатка зародышей продвинутых стадий дифференцировки и взрослых животных не способна к индукции хрусталика (Лопашов, Строева, 1963; Михайлов, 1978а; Piatigorsky, 1981), но оказывает определенное действие на его развитие, стимулируя волокнообра-зование и синтез кристаллитов. ( Coulombre, Coulombre, 1971; Yamamoto, 1976; Reyer, 1977). Однако вряд ли правомочно рассматривать такие влияния, как последующий этап в индукции хрусталика (см. Jacobson, 1966; Лопашов, Хоперская, 1977). Способность эпителиальных клеток к волокнообразованию и синтезу кристаллитов уже предопределена в хрусталиковых клетках в результате предшествующих влияний со стороны энтомезо-дермы и глазных пузырей. Сетчатка оказывает лишь стимулирующее действие на эти процессы, не затрагивая и не изменяя генетической программы дифференцировки хрусталика ( Philpott, Со -ulombre, 1968; Okada et al,, 1973).
На протяжении всего онтогенеза (в том числе и у взрослых животных) в хрусталике наблюдается "однонаправленная" дифферен-цировка клеток эпителия в волокна. Что же поддерживает и направляет дифференцировку эпителиальных клеток хрусталика, когда отсутствуют влияния глазных пузырей и дифференцирующейся сетчатки? Имелись попытки приписать определенные морфогенетические свойства водорастворимым белкам хрусталика - кристаллинам (см. Вязов, Титова, 1973). Это предположение вряд ли справедливо.