Коксиеллез-ассоциированная инфекция крупного рогатого скота и усовершенствование лабораторных методов ее диагностики

• Автор: Наконечный, Олег Игоревич
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Омск
• Количество страниц: 143 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Этиологические и эпизоотологические особенности коксиеллеза крупного рогатого скота

1.2. Роль грызунов и клещей: основного резервуара коксиеллеза в природе

1.3. Методы лабораторной диагностики коксиеллеза крупного рогатого скота

1.3.1. Серологическая диагностика коксиеллеза крупного рогатого скота

1.3.1.1. Реакция связывания комплимента

1.3.1.2. Реакция непрямой гемагглютинации

1.3.1.3. Реакция иммунофлуоресценции

1.4. Заключение
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1.Материалы и методы
2.2. Изучение эпизоотической ситуации по коксиеллезу крупного рогатого скота, а также ассоциативным формам ее проявления в хозяйствах Омской области
2.3. Изучение инфицированности основных переносчиков
2.3.1. Исследование мышеобразных грызунов
2.3.2. Исследование клещей
2.4. Морфологические и тинкториальные свойства коксиелл
2.5. Серологические методы диагностики коксиеллеза
2.5.1. Получение коксиеллезного антигена и диагностической коксиеллезной антисыворотки для РНИФ
2.5.1.1. Контроль на чувствительность, специфичность и активность коксиеллезной сыворотки в РНИФ

2.5.1.2. Сравнительное изучение РНИФ и РПИФ при коксиеллезе
крупного рогатого скота в производственных условиях
2.5.2..Изготовление коксиеллезного эритроцитарного диагностикума для РИГА
2.5.2.1. Изучение специфичности и активности КЭД в РИГА
2.5.2.2. Изучение в сравнительном аспекте диагностической ценности
РНИФ и РНГА в производственных условиях
2.6. Постановка биопробы
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. На протяжении всего времени существования человечества остается серьезной проблема борьбы с опасными инфекционными заболеваниями. Даже при условии их успешной профилактики угроза вспышек не теряет актуальности. Это, в первую очередь, связано с тем, что ряд инфекций относится к убиквитарным, их возбудители в традиционных нормальных условиях существования закономерно переживают в организме животных. При концентрации на ограниченных площадях и ухудшении окружающих условий, способствующих снижению резистентности организма, эти животные могут тяжело переболевать соответствующими болезнями. (Л. Д. Тимченко и др., 2008).
Факторы, являющиеся в этих случаях пусковыми механизмами, могут быть различны. По сообщению Джупина С. И. (2002) это: перевод животноводства на промышленную основу, концентрация большого-числа животных на ограниченных площадях без выполнения традиционно сложившихся требований по обеспечению их подстилкой, прогулками, ежедневной чисткой и другими гигиеническими мерами. Такие действия активизируют патогенные свойства возбудителей, что приводит к клиническому проявлению болезни.
Одной из таких инфекций является широко распространенная во всех странах мира зооантропонозная природно-очаговая болезнь коксиеллез (Ку-лихорадка). Она выявлена на территории бывшего СССР и более чем в 50 субъектах Российской Федерации (И. В. Тарасевич, 2003, К. М. Лобан и др., 2002 и др.). Значение данной проблемы становится особенно явным, если принять во внимание высокую устойчивость возбудителя коксиеллеза к различным факторам внешней среды, многообразия путей выделения и передачи, наличие обширных

45-е сутки исследования, причем в селезенке они выявлялись в виде очаговых скоплений. В целом в лимфоидных органах происходило увеличение общего числа светящихся нейтрофильных гранулоцитов.
С 5-го дня исследований специфическое свечение антигена риккетсий Бернета выявляли в печени, легких, почках и надпочечниках, интенсивность флуоресценции которых с увеличением срока заражения возрастала. В печени на 5-й день болезни в просвете синусоидных капилляров обнаружены единичные слабофлуоресцирующие звездчатые ретикулоэндотелиоциты. Кроме того, в этом органе выявлены единичные клетки с выраженной диффузной зеленовато-желтой флуоресценцией цитоплазмы, а также мононуклеары со специфическим желтовато-зеленоватым свечением по периферии самих клеток в виде опоясывающего ободка.
В легких антиген С. burnetii выявлялся в альвеолярных макрофагах с 5-го дня заражения. Клетки носили выраженное диффузное желтовато-зеленоватое свечение, а по мере развития инфекционного процесса отдельные альвеолярные клетки округлялись, приобретали некоторую зернистость и достигали максимума в интенсивности флуоресценции к 15- и 20-му дню. К 45-му дню флуоресценция указанных клеток несколько снижалась, на 113-й день в легочной ткани специфической флуоресценции не наблюдалось.
Антиген коксиелл Бернета в почках животных обнаруживался в очаговых пролифератах, в основном, в виде слабого диффузного свечения различимого контура эпителиальных клеток и мононуклеаров.
В надпочечниках специфическое свечение антигена обнаруживали в эндотелиальных клетках капилляров мозгового вещества.
При исследовании срезов тонкого и толстого отделов кишечника в их лимфоидных образованиях выявлялись отдельные клетки типа