Создание и биофармацевтическое изучение новой липосомальной лекарственной формы тиосенса для фотодинамической терапии

• Автор: Санарова, Екатерина Викторовна
• Шифр специальности: 14.04.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 156 с. : 18 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Фотодинамическая терапия опухолей

1.1.1. Фотодинамическая терапия как способ повышения селективности и эффективности лечения опухолей

1.1.2. Сущность метода фотодинамичсской терапии рака

1.1.3. Механизм деструкции раковой клетки и фотохимические реакции при фотодинамичсской терапии

1.1.4. Свет и источники излучения для фотодинампческой терапии

1.1.5. Преимущества и недостатки фотодинампческой терапии

1.2. Фотосенсибилизаторы
1.2.1. Свойства «идеального» фотосенсибилизатора
1.2.2. Классификация фотосенсибилизаторов
1.2.3. Тиосенс - отечественный инфракрасный фотосенсибилизатор
1.3. Применение липосом в фотодинампческой терапии
1.3.1. Строение липосом
1.3.2. Классификация липосом
1.3.3. Свойства липосом
1.3.4. Характеристики липосом
1.3.5. Методы получения липосом
1.3.6. Стабильность, хранение и стерилизация липосом
1.3.7. Липосомы - как средство доставки фотосепсибплизаторов к опухолевым тканям
Заключение
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 2. Материалы и методы исследований
2.1. Материалы
2.2. Оборудование
2.3. Статистическая обработка полученных результатов
2.4. Методы исследований
2.4.1. Методика получения липосом
2.4.2. Гомогенизация липосомальной дисперсии тиосспса
2.4.3. Стерилизация липосомальной дисперсии тносенса и определение количества включенного в липосомы препарата
2.4.4. Получение лиофилизироваппых липосом тиосенса
2.4.5. Определение формы и диаметра везикул тиосенса
2.4.6. Определение значения pH липосомальной дисперсии тиосенса
2.4.7. Количественное определение содержания тиосенса в липосомах
2.4.8. Применение метода тонкослойной хроматографии для качественного анализа липосомальпого тиосенса
2.4.9. Определение окисления липидов, входящих в состав липосомальпого тиосенса
2.4.10. Валидация аналитических методик

2.4.11. Изучение уровня и селективности накопления, оценка эффективности фотодииамической терапии с ЛЛЛФ тиосенса
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ Глава 3. Разработка методик химико-фармацевтического анализа лиофнлизированной липосомалыюн лекарственной формы тиосенса
3.1. Разработка методики тонкослойной хроматографии для определения качественного состава ЛЛЛФ тиосенса
3.1.1. Определение субстанции тиосенса методом ТСХ
3.1.2. Подбор подвижной фазы для разделения компонентов ЛЛЛФ тиосенса
3.1.3. Хроматографический анализ сахарозы в составе ЛЛЛФ тиосенса
3.2. Разработка методики качественного и количественного спектрофотометрического определения тиосенса в ЛЛФ
3.2.1. Изучение влияния вспомогательных веществ на спектрофотометрическое определение тиосенса в ЛЛФ (оценка специфичности)
3.2.2. Определение максимума поглощения для количественного спектрофотометрического определения тиосенса в ЛЛФ
3.2.3. Оценка соблюдения закона Бугера-Ламберта-Бера для субстанции и ЛЛЛФ тиосенса
3.2.4. Количественное определение тиосенса в липосомальной дисперсии
3.3. Валидация методики количественного спектрофотометрического
определения тиосенса в ЛЛЛФ
3.3.1. Оценка линейности методики количественного определения тиосенса в лиофнлизированной липосомальной лекарственной форме
3.3.2. Оценка метода количественного определения тиосенса в ЛЛЛФ по правильности
3.3.3 Оценка сходимости и промежуточной (внутрилабораторной)
прецизионности методики количественного определения тиосенса в ЛЛЛФ
3.3.4. Оценка селективности метода количественного определения тиосенса в ЛЛЛФ на модельных смесях
3.4. Определение перекисного окисления липидов по методике с тиобарбитуровой кислотой в ЛЛЛФ тиосенса
3.5. Определение содержания диеновых конъюгатов в ЛЛЛФ тиосенса
Заключение
Глава 4. Разработка состава и технологии получения
лиофнлизированной липосомалыюн лекарственной формы тиосенса
4.1. Исследование влияния соотношения препарат/лецитин на размер липосом и количество включенного препарата
4.2. Оценка модельных смесей для выбора состава липосом тиосенса
4.3. Технологические особенности получения липидной пленки и выбор раствора для гидратации
4.4. Влияние параметров гомогенизации на качество липосомальной дисперсии тиосенса
4.4.1. Исследование влияния давления гомогенизации
4.4.2. Исследование влияния времени (количества циклов) гомогенизации

4.5. Оценка влияния фильтрации на качество липосомальной дисперсии тиосенса
4.6. Влияние типа криопротектора на размеры липосом тиосенса в ЛЛФ
4.6.1. Использование в качестве криопротектора маннита
4.6.2. Использование в качестве крнопротектора коллидона
4.6.3. Использование в качестве криопротектора лактозы
4.6.4. Использование в качестве крнопротектора глюкозы
4.6.5. Использование в качестве криопротектора сахарозы
4.6.6. Влияние уровня содержания сахарозы в ЛЛФ тиосенса на размер липосом
4.7. Изучение стабильности липосомальной дисперсии тиосенса в процессе хранения
4.8. Оптимизация режима лиофилизации ЛЛФ тиосенса
4.9. Получение ЛЛЛФ тиосенса с использованием полупромышленных установок
Заключение
Глава 5. Стандартизация лиофнлизированной липосомальной лекарственной формы тиосенса
5.1. Выбор критериев для стандартизации ЛЛЛФ тиосенса
5.2. Мониторинг стабильности ЛЛЛФ тиосенса в процессе хранения
Заключение
Глава 6. Оценка фотодинамической активности и стабильности ЛЛЛФ тиосенса в процессе хранения
6.1. Исследование эффективности ФДТ со свежеприготовленными сериями ЛЛЛФ тиосенса
6.2. Изучение эффективности ФДТ с сериями ЛЛЛФ тиосенса в процессе хранения
6.3. Изучение фотодинамических свойств ЛЛЛФ тиосенса на перевиваемых опухолях мышей
Заключение
Общее заключение
Общие выводы
Список литературы
Приложения

ГЕЛЕВАЯ ФАЗА

ЖИДКО КРИСТАЛЛИЧЕСКАЯ ФАЗА
ГЕЛЕВАЯ ФАЗА ЖИДКО КРИСТАЛЛИЧЕСКАЯ ФАЗА

Рис. 4 Графическое (А) и схематическое (Б) изображение перехода липидной мембраны из гелевой фазы в жидкокристаллическую, иллюстрирующие снижение толщины мембранного бислоя при повышении температуры (Т)
Состав ацильных цепей ФЛ также может оказывать значительное влияние на включение ЛП при лиофилизации, например, с мальтозой [59]. При проведении ряда исследований выявлено, что липосомы с ДПФХ имеют более высокое включение, чем липосомы на основе диолеилфосфатидилхолина (ДОФХ), это объясняется слабым взаимодействием между мальтозой и двумя ненасыщенными жирными цепями (ДОФХ) по сравнению со связью между мальтозой и насыщенными (ДПФХ) и смешанными цепями (ЯФХ). Натуральные липиды нередко используют для получения лиофилизированных липосом. Процент включения у таких липосом сравним с таковым для липосом из ДПФХ и во многом зависит от соотношения по массе криопротектор/липид. В технологии липосомальных препаратов применяется также гидрогенизированный ЯФХ (гЯФХ), который более устойчив к окислению. Экспериментально доказано, что процент включения в липосомы из гЯФХ и ЯФХ равен соответственно 95 % и 85 % [32].
Длина ацильной цепи в структуре ФХ оказывает влияние и на скорость высвобождения вещества из бислоя. На примере дексаметазона показано, что высвобождение гидрофобного ЛП происходит быстрее из экструдированных